Microscopes à balayage laser
Pour les applications industrielles et en sciences de la vie
La microscopie à balayage laser est utilisée en recherche en biologie et en sciences des matériaux pour prendre des images d’échantillons en haute résolution avec un contraste élevé. Les microscopes laser peuvent balayer des échantillons point par point, ce qui permet un sectionnement optique qui peut ensuite être utilisé pour construire des images 3D d’une grande précision. Nos microscopes à balayage laser sont compatibles avec de nombreuses modalités d’imagerie afin de répondre aux défis les plus difficiles rencontrés dans le domaine des sciences de la vie et des sciences des matériaux. D’une grande sensibilité et extrêmement rapides, nos microscopes à balayage laser permettent de prendre des images de cellules vivantes, d’observer des tissus profonds et de mesurer et d’analyser les échantillons avec une grande précision. Faites votre choix parmi une large gamme de systèmes à balayage laser adaptés à diverses applications scientifiques, notamment l’imagerie d’échantillons biologiques dans les domaines de la recherche sur le cancer et de la recherche en biologie du développement, ou encore la caractérisation de la rugosité de surface des métaux et l’inspection de la qualité des composants électroniques comme les semi-conducteurs et les batteries des véhicules électriques. Evident a des solutions adaptées à tous les besoins. |
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Solutions industrielles
Foire aux questions sur les microscopes à balayage laser
Quelles sont les utilisations possibles d’un microscope à balayage laser ?
Les microscopes confocaux à balayage laser sont utilisés dans la recherche en sciences de la vie sur une grande variété d’échantillons vivants et fixés pour procéder à des études anatomiques, physiologiques et biochimiques à l’échelle cellulaire et moléculaire. Leur capacité inhérente à sectionner optiquement la lumière permet aux microscopes à balayage laser de réaliser une reconstruction précise en haute résolution et avec un fort contraste de structures 3D à partir d’une série d’images prises à différentes profondeurs.
Pour en savoir plus sur les utilisations de la microscopie confocale, rendez-vous sur notre centre de ressources en microscopie.
Comment fonctionnent les microscopes confocaux à balayage laser ponctuel ?
La microscopie confocale offre plusieurs avantages par rapport à la microscopie optique à champ large classique, notamment la possibilité de contrôler la profondeur de champ, l’élimination ou la réduction du bruit de fond sur le plan focal (rapport signal/bruit élevé) et la capacité de collecter des coupes optiques sériées sur des échantillons épais. La clé fondamentale dans l’approche confocale consiste à utiliser des techniques de filtrage spatial pour éliminer la lumière ou les reflets émanant des zones de l’échantillon hors du plan focal et du champ de vision immédiat.
Un microscope confocal à balayage laser ponctuel crée des coupes optiques d’un échantillon en balayant point par point un champ de vision avec un faisceau laser focalisé. L’objectif du microscope focalise ensuite cette lumière sur l’échantillon. Les photons émis par les fluorophores contenus dans l’échantillon situé au point de focalisation sont captés par l’objectif et renvoyés vers le scanner en passant par un sténopé conjugué au plan focal de l’objectif. Ainsi, seuls les photons situés dans le plan focal sont détectés par le tube photomultiplicateur. L’acquisition des photons à chaque point de la position du laser permet de construire une image pixel par pixel.
Pour en savoir plus sur la microscopie confocale, rendez-vous sur notre centre de ressources en microscopie.
Qu’est-ce que la microscopie à balayage laser multiphotonique ?
La microscopie multiphotonique est une excellente technique d’imagerie en profondeur dans les échantillons épais, en particulier lors d’expériences in vivo. Les impulsions laser proche infrarouge fortement focalisées pénètrent plus profondément dans les tissus biologiques que la lumière visible, car la lumière proche infrarouge subit moins d’absorption et de diffusion. Pour réaliser les prises de vue, l’échantillon est balayé avec un laser pulsé de longueur d’onde de 700 à 1300 nm pour l’excitation. L’excitation multiphotonique est intrinsèquement localisée sur le plan focal, ce qui réduit la phototoxicité. Plus important encore, un sténopé confocal n’est pas nécessaire pour le sectionnement optique. Davantage de lumière, y compris les photons de fluorescence dispersés, peut donc être recueillie. Le résultat : des images 3D détaillées et lumineuses des couches profondes des échantillons épais.
Découvrez le microscope à balayage laser multiphotonique FVMPE-RS™d’Olympus.
Comment puis-je améliorer la résolution de mes images avec les microscopes à balayage laser d’Olympus ?
En général, la résolution est considérablement améliorée en microscopie confocale par rapport aux techniques classiques de microscopie en champ large. Comme la résolution en microscopie à balayage laser dépend de l’ouverture numérique (ON) de l’objectif, il est essentiel d’utiliser des objectifs à grande ON pour obtenir une image en haute résolution. Olympus propose une série d’objectifs à grande ON, comme les objectifs X Line™, qui sont dotés d’une grande ouverture numérique (ON) et assurent une excellente planéité d’image et une correction chromatique pour améliorer la résolution de l’image sur un champ de vision plus large. Pour prendre des images des tissus profonds, nos objectifs à immersion dans le silicone A Line™ possèdent un indice de réfraction proche de celui des cellules vivantes permettant une imagerie 3D plus lumineuse avec une meilleure résolution et un minimum d’aberration sphérique.
Pour une meilleure résolution en imagerie profonde avec notre système multiphotonique FVMPE-RS, les objectifs TruResolution™ sont dotés d’une bague de correction automatique qui compense dynamiquement les aberrations sphériques tout en maintenant une position de mise au point précise. Ils s’ajustent automatiquement à chaque plan de l’image d’un volume pour produire des images 3D plus nettes et plus lumineuses des couches profondes.
Pour supprimer le flou des images lors de leur traitement afin d’obtenir des images en haute résolution plus claires et plus nettes, Olympus a développé des algorithmes de déconvolution TruSight™ 2D et 3D spécialisés pour les images des systèmes confocaux laser et Olympus Super Resolution (OSR).
Quelle est la résolution optique des microscopes à balayage laser Olympus ?
Pour les études nécessitant une plus haute résolution, comme les analyses de colocalisation, le module d’imagerie Olympus Super Resolution (OSR) du système FV3000 peut acquérir quatre signaux fluorescents soit séquentiellement, soit simultanément, avec une résolution latérale (X-Y) d’environ 120 nm, ce qui représente près du double de la résolution des microscopes confocaux habituels.
Vous voulez en savoir plus sur la technologie Olympus Super Resolution ?
Quel est le grossissement maximal d’un microscope confocal à balayage laser ?
Le microscope FV3000 de la série FLUOVIEW™ peut être utilisé avec des objectifs de grossissements variés allant d’un objectif de faible grossissement de 1,25X à un objectif de fort grossissement de 150X, selon l’application envisagée. Les objectifs de faible grossissement (1,25X à 4X) sont parfaits pour observer la structure d’un tissu entier. Pour observer la morphologie des cellules qui constituent le tissu, on utilise des objectifs de grossissement moyen, entre 10X et 40X, et pour observer les microstructures à l’intérieur des cellules, on utilise habituellement des objectifs de fort grossissement de 60X ou plus. Le zoom optique peut encore augmenter le grossissement de l’image jusqu’à 50 fois au-delà du niveau de grossissement de l’objectif en réduisant l’angle du miroir de balayage.
Combien coûte un microscope confocal à balayage laser ?
Les microscopes à balayage laser peuvent être intégrés à un système en fonction de votre budget et de votre application. Si vous avez un objet cible limité à observer, il est possible de limiter le nombre de lasers, de détecteurs et de types d’objectifs pour que le prix reste abordable. Il est également possible d’améliorer le système en ajoutant les unités nécessaires à mesure que les objectifs de vos travaux de recherche évoluent au fil du temps.
Contactez votre représentant Olympus local pour discuter de nos systèmes confocaux à balayage laser et obtenir un devis.
Tutoriels vidéo sur la microscopie à balayage laser
Objectifs TruResolution
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