Visão geral

	Um salto quântico na formação de imagens de células vivas O LV200 foi cuidadosamente projetado para bioluminescência de células de longa duração. Um design óptico completamente novo aumenta substancialmente a sensibilidade e permite o estudo detalhado de células fotossensíveis e sondas de luminescência a alta ampliação. O sistema incorporado para o controle da temperatura, a umidade e o fluxo de gás ajudam a manter as células cultivadas ou os cortes de tecido em condições saudáveis durante todo o período de observação, e o gabinete exclusivo à prova de luz protege a amostra e a óptica de qualquer luz externa. Entre em contato

Um salto quântico na formação de imagens de células vivas

O LV200 foi cuidadosamente projetado para bioluminescência de células de longa duração. Um design óptico completamente novo aumenta substancialmente a sensibilidade e permite o estudo detalhado de células fotossensíveis e sondas de luminescência a alta ampliação. O sistema incorporado para o controle da temperatura, a umidade e o fluxo de gás ajudam a manter as células cultivadas ou os cortes de tecido em condições saudáveis durante todo o período de observação, e o gabinete exclusivo à prova de luz protege a amostra e a óptica de qualquer luz externa.

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Formação de imagens sem danos à célula

A luminescência encontra-se dentro da amostra e, portanto, não é tóxica às células. Também não é preciso se preocupar com ruído de fundo ou autofluorescência. Portanto, a luminescência é a iluminação certa para a formação de imagens de células vivas.

Microscopia de bioluminescência avançada

A luminescência tem diversos potenciais benefícios sobre a fluorescência, incluindo melhores relações sinal/fundo devido à falta de emissão de fundo, fototoxicidade e fotobranqueamento, o que torna a luminescência ideal para acompanhar quantitativamente alterações de longo prazo em sistemas de células vivas. A observação da luminescência foi contida no passado devido a diversos desafios técnicos. Com o LUMINOVIEW LV200, a Olympus desenvolveu com sucesso um sistema de microscópio de luminescência que supera esses desafios e, pela primeira vez, aproveita o poder da formação de imagens de bioluminescência em um sistema comercial.

Superando as limitações da fluorescência

O microscópio de fluorescência e as suas técnicas relacionadas oferecem diversas vantagens, bem como algumas limitações. A formação de imagens de bioluminescência tem o potencial de superar essas limitações. O design óptico único do novo Olympus LV200 reúne as vantagens da fluorescência e da bioluminescência para criar um sistema capaz de obter imagens claras de alta resolução.

Superando as limitações da fluorescência

Fluorescência

As emissões de fluorescência tendem a ser de curta duração e claras, exigindo frequências específicas de luz para excitação. Consequentemente, esta iluminação é necessária no momento da formação de imagem, o que significa que o sistema óptico deve poder fornecer uma luz forte e totalmente controlável em um comprimento de onda e projetar a luz emitida em um comprimento de onda diferente para os olhos do usuário e/ou câmera. Apesar destes requisitos ópticos relativamente complexos, as técnicas de fluorescência evoluíram para possibilitar descobertas inovadores em diversas áreas de pesquisa.

Formação de imagens de bioluminescência

As emissões de luminescência tendem a ter vida útil variável e costumam ser fracas, mas devido à falta de fundo ou de fluorescência, elas podem ser medidas com uma relação sinal/ruído (S/R) alta. Isso faz com que a luminescência seja ideal para aplicações com autofluorescência alta, tal como formação de imagem de animal inteiro ou em amostras contendo diversos compostos de bibliotecas químicas. Os sistemas de formação de imagem in vivo e os leitores de microplacas de luminescência apresentaram grande sucesso nessas áreas.

Relação sinal/ruído alta sem branqueamento/toxicidade

A formação de imagens de bioluminescência tem grandes vantagens em comparação com a formação de imagens de fluorescência, pois combina uma alta relação S/R sem efeitos de branqueamento/toxicidade. Além disso, somente células viáveis emitem sinais de luminescência, pois a emissão é possível apenas com um metabolismo funcional. Consequentemente, as medições bioluminescência são ideias para células vivas sensíveis e são absoluta e diretamente quantitativas. Estas vantagens já não se limitam à formação de imagem macro e medição em massa, mas agora podem ser aplicadas também à microscopia de alta resolução.

Imagens de alta qualidade

A Olympus desenvolveu o sistema de formação de imagem de bioluminescência LV200 LUMINOVIEW, que fornece imagens incrivelmente detalhadas usando CCDs padrão em vez de detectores de fótons especializados. Para isso, o design óptico do sistema é altamente especializado para maximizar a coleta de luz – um aspecto essencial devido aos baixos níveis de luz emitidos.

Um caminho óptico otimizado

O caminho óptico do objeto até a câmera é reto e o mais curto possível para garantir que o máximo de luz chegue até o chip CCD. Espelhos, filtros e lentes adicionais também não são necessários para absorver a luz, reduzindo ainda mais o sinal. Além disso, as lentes de tubo foram concebidas com uma abertura numérica (AN) extremamente alta, o que permite um grande aumento da sensibilidade em comparação com microscópios ópticos convencionais. Consequentemente, o LV200 produz saídas de sinal diversas vezes maiores que sistemas tradicionais e, portanto, pode ser usado com câmeras CCD convencionais ou EM-CCD. O LV200 pode usar ampliações diferentes de 0,8X a 20X, permitindo um enquadramento claro de amostras de seções grandes de cérebro até células individuais.

	Formação de imagem com resolução maior Estas propriedades ópticas únicas garantem uma resolução unicelular refinada que não era anteriormente possível com formação de imagem de luminescência. Essas melhorias, em conjunto com o número de sondas de luminescência disponíveis atualmente, podem levar as imagens de microscópio a um nível diferente. Estas propriedades também possibilitam uma resolução espacial excelente, para que sinais fracos próximos a áreas com sinais altos possam ser diferenciados com muita facilidade, o que não é possível em um luminômetro.

Formação de imagem com resolução maior

Estas propriedades ópticas únicas garantem uma resolução unicelular refinada que não era anteriormente possível com formação de imagem de luminescência. Essas melhorias, em conjunto com o número de sondas de luminescência disponíveis atualmente, podem levar as imagens de microscópio a um nível diferente. Estas propriedades também possibilitam uma resolução espacial excelente, para que sinais fracos próximos a áreas com sinais altos possam ser diferenciados com muita facilidade, o que não é possível em um luminômetro.

Uso em ambiente de laboratório normal

O gabinete único à prova de luz do LV200 protege as amostras e a óptica da luz externa e permite que o microscópio seja usado com luz ambiente no laboratório. Para aplicações ou amostras que exigem tempos de exposição muito longos, pode ser necessário mover o microscópio para uma sala com pouca iluminação.

Expandindo as capacidades de formação de imagem atuais

Com componentes ópticos otimizados para detecção de luz luminescente, o LV200 também foi concebido para atender aos requisitos de uma vasta gama de pesquisas. Ele possui rodas de filtro de excitação e de emissão integradas para permitir luminescência de cor dupla, bem como imagens de fluorescência de luz transmitida. As áreas-alvo da amostra podem ser encontradas facilmente antes de alterar para detecção por luminescência com a iluminação de campo claro padrão e insertos de contraste de fase. Portanto, também é possível produzir sobreposições luminescentes e fluorescentes em imagens de campo claro, o que permite o uso de capacidades de localização e colocalização que não eram possíveis anteriormente.

Expandindo as capacidades de formação de imagem atuais

	Incubação O sistema agora é capaz de formação de imagem de longo prazo, por isso é importante que as amostras fiquem na platina durante todo o experimento de formação de imagem. O LV200 foi concebido para que amostras possam ser colocadas dentro de uma câmara de ambiente controlado altamente precisa, com controle de temperatura independente para a platina, câmara de incubação, tampa superior e objetiva. Além disso, um reservatório de água é usado para manter o nível de umidade correto e o controle do fluxo de CO2 possibilita a estabilidade do pH. Este controle do ambiente permite que as amostras sejam monitoradas continuamente por dias ou até semanas, sem a necessidade de mover a amostra entre o microscópio e a incubadora.

Incubação

O sistema agora é capaz de formação de imagem de longo prazo, por isso é importante que as amostras fiquem na platina durante todo o experimento de formação de imagem. O LV200 foi concebido para que amostras possam ser colocadas dentro de uma câmara de ambiente controlado altamente precisa, com controle de temperatura independente para a platina, câmara de incubação, tampa superior e objetiva. Além disso, um reservatório de água é usado para manter o nível de umidade correto e o controle do fluxo de CO2 possibilita a estabilidade do pH. Este controle do ambiente permite que as amostras sejam monitoradas continuamente por dias ou até semanas, sem a necessidade de mover a amostra entre o microscópio e a incubadora.

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Especificações

Observation Methods	Luminescence imaging, transmitted brightfield, basic transmitted fluorescence
LV200 Main Body	Light-tight dark box
	Manual objective lens focusing
	Coaxial XY stage
	Motorized exciting filter wheel with 3 positions for standard 25 mm optical filters
	Motorized emission filter wheel with 6 positions for standard 25 mm optical filters
	Condenser for transmission brightfield coupled to light guide
	C-mount for camera
	Tube lens optimized for luminescence imaging, 0.2 X magnification
Illumination Unit	External halogen lamp housing coupled with light guide
Controller	IX-UCB controller for filter wheels and illumination
Hand Switch	Hand switch for filter wheels and illumination
Environmental Control	Double-layered chamber type incubator for 35 mm dish including controller, stage heater, top cover heater,
Environmental Control	main body heater, objective heater, flow meter for 5 % CO2, 95 % air
System Table	Approx. 600 (W) x 600 (D) mm x 700 (H) (needed if large-size camera is used)
Camera Options	Depending on application and required sensitivity, cooled CCD cameras, EM-CCD cameras or deep-cooled slow-scan
Camera Options	CCD cameras can be used. (Please ask about camera/software compatibility.)
Power Consumption	Main unit 850 VA
Power Consumption	Controller 840 VA
Installation Space	Approx. 1500 (W) x 750 (D) mm (depending on configuration)
Total Mass Weight	Approx. 70 kg (depending on configuration)

Recommended Objectives

	NA	WD (mm)	Correction (mm)
UPLSAPO 10X	0.4	3.1	0.17
UPLSAPO 20X	0.75	0.6	0.17
UPLSAPO 40X	0.9	0.18	0.11 - 0.23
UPLSAPO 60XO	1.35	0.15	0.17
UPLSAPO 100XOI	1.4	0.13	0.17
LUCPFLN 20X	0.45	6.6 - 7.8	0 - 2
LUCPFLN 40X	0.6	2.7 - 4	0 - 2
PLAPON 60XO	1.42	0.15	0.17