1 00:00:01,480 --> 00:00:05,840 在这个分为两部分的视频系列中, 我们将为您说明如何使用cellSens软件的 2 00:00:05,840 --> 00:00:10,000 深度学习技术完成无标记细胞核的探测。 3 00:00:10,000 --> 00:00:13,840 深度学习技术不使用荧光图像 探测和计数细胞核, 4 00:00:13,840 --> 00:00:18,200 而是使用简单的无染色透射图像 计数细胞核, 5 00:00:18,200 --> 00:00:23,920 从而可以避免荧光激发引起的光毒性。 6 00:00:23,920 --> 00:00:27,360 深度学习使用的神经网络由操作人员训练, 7 00:00:27,360 --> 00:00:30,880 操作人员在其中输入带有已识别细胞核的图像。 8 00:00:30,880 --> 00:00:36,400 训练完成后,系统将能够独立识别细胞核。 9 00:00:36,400 --> 00:00:40,400 在本视频中, 我们将为您介绍如何准备训练数据。 10 00:00:40,400 --> 00:00:43,520 无标记细胞核探测的后续步骤 11 00:00:43,520 --> 00:00:46,000 将在第二个视频中阐述。 12 00:00:46,000 --> 00:00:50,360 首先,进入到cellSens软件的 “计测”布局中。 13 00:00:50,360 --> 00:00:54,280 打开位于cellSens安装包中的一张训练图像。 14 00:00:54,280 --> 00:00:59,560 要访问训练图像,需执行以下操作:安装包cellSens >Product family cellSens> example images(示例图像) > 15 00:00:59,560 --> 00:01:05,960 deep learning(深度学习) > training images(训练图像)。 打开第一张图像。 16 00:01:05,960 --> 00:01:10,400 这些荧光训练图像中的细胞核使用DAPI染色。 17 00:01:10,400 --> 00:01:14,320 而且采集了明场和相衬通道。 18 00:01:14,320 --> 00:01:17,400 使用DAPI通道在软件的计测模块中 19 00:01:17,400 --> 00:01:20,440 创建二值图训练数据。 20 00:01:20,440 --> 00:01:25,120 由于要为多个图像完成这个操作, 我们可以录制宏程序。 21 00:01:25,120 --> 00:01:33,720 为此,我们从菜单栏中打开 要使用的“宏管理器”工具图标。 22 00:01:33,720 --> 00:01:47,040 点击“创建宏”,为其命名,以创建训练标签。 23 00:01:47,040 --> 00:01:51,480 然后从“选维器”中选择DAPI通道。 24 00:01:51,480 --> 00:01:55,720 选择“自动阈值”,在探测细胞核时 25 00:01:55,720 --> 00:02:01,400 软件自动计算出DAPI通道的强度阈值。 26 00:02:01,400 --> 00:02:06,000 然后点击DAPI通道。 27 00:02:06,000 --> 00:02:09,200 双击“相”名称,以便重命名。 28 00:02:09,200 --> 00:02:14,200 后续步骤中,我们用其作为训练标签的名称。 29 00:02:14,200 --> 00:02:17,200 点击下拉箭头,从出现的颜色表中选择颜色。 30 00:02:17,200 --> 00:02:21,160 使用一个与DAPI及其他通道都不同的颜色。 31 00:02:21,160 --> 00:02:23,240 我们选择红色。 32 00:02:23,240 --> 00:02:26,360 然后点击“计测”。 33 00:02:26,360 --> 00:02:29,200 探测到的细胞核显示为红色。 34 00:02:29,200 --> 00:02:31,800 如果两个细胞核挨得很近, 35 00:02:31,800 --> 00:02:35,600 则有时会被检测成一个细胞核。 36 00:02:35,600 --> 00:02:40,920 发生这种情况时,我们可以告诉系统 自动将它们拆分为两个细胞核。 37 00:02:40,920 --> 00:02:43,200 点击“选定探测到的所有对象”, 38 00:02:43,200 --> 00:02:47,640 然后点击“自动拆分选定的对象”。 39 00:03:02,600 --> 00:03:05,320 确认物体是否被正确拆分, 40 00:03:05,320 --> 00:03:08,440 然后停止记录宏。 41 00:03:19,720 --> 00:03:24,440 现在,我们将记录的宏批量应用到多张图像。 42 00:03:24,440 --> 00:03:28,240 关闭已经打开的图像。 43 00:03:28,240 --> 00:03:36,520 激活“切换批处理模式”, 然后点击“运行批处理宏”。 44 00:03:36,520 --> 00:03:41,280 在本示例中,我们使用 安装包中的示例图像。 45 00:03:41,280 --> 00:03:45,360 要定义这些输入的图像, 选择“文件系统中的文档”, 46 00:03:45,360 --> 00:03:56,240 然后选择10张训练图像。 47 00:03:56,240 --> 00:03:58,560 然后点击“下一步”。 48 00:03:58,560 --> 00:04:02,400 选择想要保存文件的位置。 49 00:04:12,320 --> 00:04:16,560 在此,我们为批处理图片重新命名为:训练标签。 50 00:04:31,720 --> 00:04:37,240 训练数据必须是.vsi格式。 51 00:04:37,400 --> 00:04:40,600 一般情况下,我们建议您勾选“关闭文档”选项, 52 00:04:40,600 --> 00:04:44,880 尤其是宏程序批处理大量的图像时。 53 00:04:44,880 --> 00:04:50,360 由于在本例中,我们只使用了10张图像, 我们就不用勾选了。 54 00:04:50,360 --> 00:04:58,520 运行批处理宏,为10张图像创建训练标签。 55 00:04:58,520 --> 00:05:02,360 核查一下,以确认所有10张图像 都成功完成了这个处理, 56 00:05:02,360 --> 00:05:09,480 而且数据都是以.vsi格式保存。 57 00:05:09,480 --> 00:05:15,040 经验之谈, 建议快速验证细胞核识别和拆分的质量。 58 00:05:15,040 --> 00:05:21,640 如果挨在一起的细胞核没有被正确拆分, 请以手动方式进行拆分。 59 00:05:29,120 --> 00:05:33,160 如果进行了修正,请不要忘记保存图像。 60 00:05:33,160 --> 00:05:35,960 您的训练数据现在就已经准备就绪。 61 00:05:35,960 --> 00:05:41,720 请观看这个视频系列的第二部分, 了解如何使用这些数据集。 62 00:05:41,720 --> 00:05:45,600 如果您想要了解 有关奥林巴斯深度学习技术的更多信息, 63 00:05:45,600 --> 00:05:49,880 请访问我们的网站: olympus-lifescience.com。