Ventajas de usar el condensador motorizado de escáner de portaobjetos SLIDEVIEW™ VS200 para ajustar el contraste de la muestra

Control del contraste de la muestra

En la microscopía óptica, el diafragma de apertura puede usarse para controlar la resolución y el contraste, ya que al cambiar el tamaño de la apertura del diafragma se modifica el cono de iluminación proyectado en el objetivo. El ajuste correcto del diafragma de apertura del condensador es fundamental para obtener imágenes de alta calidad, ya que controla la apertura numérica, la potencia de resolución, la profundidad de campo y el carácter global de la imagen.

Hay dos formas de controlar la cantidad de luz que impacta en una muestra: ajustar el diafragma del condensador o cambiar la cantidad de potencia que llega a la fuente de luz.

Más abajo puede ver una muestra de hígado de ratón con hematoxilina-eosina adquirida usando un objetivo UPlanXAPO 40x (A. N. 0,95) en un sistema de escaneo de portaobjetos con distintas configuraciones del diafragma del condensador.

Estas imágenes (de izquierda a derecha) demuestran que abrir el diafragma del condensador hace que las imágenes pierdan contraste pero que ganen resolución.*

El sistema VS200 está equipado con un condensador universal motorizado BX3-UCD8A (A. N. 0,9) de Olympus que permite controlar fácilmente la apertura. El software del sistema permite ajustar la apertura de la posición cerrada a completamente abierta en incrementos del 1%. El sistema realiza estos ajustes automáticamente, dependiendo de la magnificación del objetivo y de la apertura numérica (A. N.).

De forma predeterminada, el sistema VS200 utiliza un diafragma de apertura que es el 75% de la apertura numérica del objetivo. Cuanto más alta sea la A. N. del objetivo, más amplia será la apertura del diafragma. Es imposible crear un nuevo método de observación (MO) en el que el ajuste del diafragma de apertura sea, por ejemplo, el 53% de la apertura numérica del objetivo.

Para ello, abra el software VS200-ASW y vaya a "Configuración de dispositivo". Haga una copia del método de observación BF y asígenele un nombre.

Por último, ajuste el valor para el diafragma de apertura (tope de apertura BX3) y guarde el método de observación.

_{Nota: Cambiar el diafragma de apertura puede afectar a la corrección de sombreado para el nuevo método de observación de campo claro.
Calibre la corrección de sombreado independientemente para el nuevo método de observación.}

Ejemplo de aplicación:

La prueba de Papanicolaou, abreviada como prueba Pap, es un método de exploración cervical usado para detectar procesos potencialmente cancerosos y precancerosos en el cuello uterino.

La muestra humana de prueba Pap en estas imágenes se ha teñido con hematoxilina, naranja G6 y eosina. Las imágenes de la izquierda se han capturado usando una apertura de diafragma del 75% y las imágenes de la derecha se han capturado usando una apertura del diafragma del 50%. Las imágenes muestran que la apertura de diafragma más pequeña consigue mejorar el contraste de la imagen, al tiempo que reduce ligeramente la resolución.

_{Imágenes escaneadas con un objetivo UPlanXAPO 20x, A. N. 0,8, escaneadas con un ajuste de diafragma de apertura estándar (apertura del 75%) y escaneadas con una apertura del diafragma de apertura del 50%, que mejora el contraste con una pérdida de resolución mínima.}

Conclusión:

El diafragma de apertura ajustable y motorizado del sistema VS200 permite a los usuarios obtener lo mejor de sus muestras de forma flexible, especialmente si son muy borrosas y les falta contraste. Esto puede aplicarse a las muestras hematológicas, así como a portaobjetos inmunohistoquímicos (IHC) de tinción débil.

_{* Para obtener información sobre el diafragma de apertura y su funcionamiento, visite:
www.olympus-lifescience.com/en/microscope-resource/primer/java/kohler/contrast}