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Nota de aplicación

Digitalización del portaobjetos usando un microscopio manual y una cámara digital


La creciente importancia de la digitalización de muestras en portaobjetos

Cada vez es más importante aumentar la eficiencia de las operaciones en laboratorio mediante la digitalización de los portaobjetos; una práctica a la que se le conoce como procesamiento de imágenes de portaobjetos completo (whole slide imaging, WSI). El procesamiento de imágenes de portaobjetos completo ofrece muchas ventajas en cuestión de productividad, ya que no es necesario configurar un microscopio para observar una muestra. Más bien, las imágenes de portaobjetos virtuales pueden ser visualizadas desde su PC, en el cual es posible modificar la posición de la observación y magnificación, además se llevar a cabo una observación simultánea y remota con compañeros a distancia.

Si bien los escáneres motorizados para portaobjetos virtuales permiten agilizar el proceso WSI, no todos los investigadores cuentan con el presupuesto necesario, el espacio de escritorio o la capacidad de datos para adquirir uno. Como alternativa, es posible combinar el microscopio manual BX53 de Olympus con una cámara digital DP74 para llevar a cabo el procesamiento de imágenes de portaobjetos completo de forma asequible y en un espacio de trabajo reducido.

La creciente importancia de la digitalización de muestras en portaobjetos

Digitalización de portaobjetos usando el procesamiento manual de portaobjetos completo

El procesamiento manual de portaobjetos completo (mWSI) genera datos a partir de imágenes digitales de una muestra completa sin usar una platina motorizada. El método mWSI combina el microscopio manual BX53, la cámara digital DP74 y el software cellSens de Olympus. Se trata de una estrategia efectiva para crear imágenes en mosaico con una magnificación baja. A medida que la platina es desplazada de forma manual, las imágenes adquiridas se unen en tiempo real. Así, es posible captar la imagen del espécimen (muestra) completo dentro un rango arbitrario. Por ejemplo, un área de la muestra de 15 mm2 puede escanearse en unos 30 segundos usando una lente de objetivo 4X.

Aplicaciones comunes para el procesamiento manual de portaobjetos completo

Caso 1. Debate en grupo

En algunas situaciones, como en los grupos de estudio, puede ser necesario mostrar toda la muestra con una magnificación alta y una baja. Con el procesamiento manual de portaobjetos completo, es posible capturar una imagen de la muestra entera usando un objetivo de magnificación baja (Figura 1). El grupo puede comentar la imagen del portaobjetos virtual a través de la visualización de pantalla, en lugar de configurar y usar un microscopio. El mWSI también resulta útil para analizar las imágenes de muestras capturadas con una magnificación alta, ya que es posible identificar la ubicación de la imagen con respecto al portaobjetos de la muestra entera (Figura 2).

Figura 1: Imagen de una muestra con baja magnificación

Figura 2: Es posible identificar fácilmente la ubicación de la imagen

Caso 2. Imágenes para documentos de investigación y conferencias académicas

Los documentos y los pósteres de conferencias académicas suelen mostrar una amplia serie de imágenes. No obstante, puede ser complicado capturar toda la muestra pese al uso de un objetivo de magnificación baja. El procesamiento de imágenes manual de portaobjetos completo facilita la unión de varias áreas con el fin de adquirir una imagen global clara (Figura 3) y después cortar la imagen mosaico con la intención de capturar un área específica (Figura 4).

Fig. 3: Amplia imagen global de una muestra

Fig. 3: Amplia imagen global de una muestra

Fig. 4: Recorte de imagen global para capturar el área de interés

Fig. 4: Recorte de imagen global para capturar el área de interés 

Caso 3. Conservación digital de archivos

En el pasado, era necesario usar escáneres motorizados para portaobjetos virtuales a fin de capturar una muestra completa a modo de imagen de portaobjetos virtual. Pero con el procesamiento de imágenes manual de portaobjetos completo ahora es posible crear un archivo digital usando menos datos. Para ello, solo se tiene que agregar la cámara digital DP74 y el software cellSens en el microscopio BX53.
En el caso de algunas muestras, como por ejemplo los grupos celulares, es necesario capturar el plano multifocal. Esto puede hacerse con facilidad mediante la grabación de un video y el cambio manual de la posición de enfoque para obtener la información necesaria en un archivo mucho más pequeño.

Figura 5: Imagen de un grupo celular

Caso 4. Consulta remota/a distancia

Los debates asociados a la observación remota/a distancia, más frecuentes en el ámbito educativo, suelen requerir un ponente que comparta electrónicamente las imágenes de las muestras capturadas con un microscopio. Sin embargo, configurar un microscopio para una videoconferencia puede ser una tarea compleja y consumir mucho tiempo. Mediante una digitalización previa de toda la muestra previamente gracias al procesamiento manual de portaobjetos completo, podrá estudiar fácilmente una muestra con asesores y compañeros a distancia.

Mejore la observación con el procesamiento de imágenes manual de portaobjetos completo

Usar el método de procesamiento de imágenes manual de portaobjetos completo combinado con el microscopio manual BX53, la cámara digital DP74 y el software cellSens de Olympus, le permitirá observar las muestras de forma más eficaz y con un costo (Esp. coste) inferior al de los escáneres motorizados para portaobjetos virtuales.

Productos usados para esta aplicación

Microscopio de fluorescencia semimotorizado

BX53

  • Iluminación LED de alta luminosidad con colores vivos
  • Concepto modular que permite motorizar los componentes individualmente
  • Fácil adquisición de imágenes por fluorescencia multicolor
Cámara digital para microscopía

DP74

  • Obtenga imágenes de especímenes vivos en alta calidad y en color a 60 fps
  • La nueva función «Navegador de Posiciones» nos permite conocer fácilmente la ubicación de un área de interés incluso durante observaciones en altas magnificaciones
  • El sensor CMOS refrigerado permite obtener nítidas imágenes de fluorescencia con escaso ruido
Soluciones para ciencias de la vida

cellSens

  • Plataforma de software para la captura y el análisis de imágenes
  • Intuitiva interfaz del usuario basada en aplicaciones
  • Amplia gama de funciones que van desde la simple toma fotográfica hasta avanzados experimentos multidimensionales en tiempo real

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