Life Science Solutions
Nota de aplicación

Evaluación de la eficacia de fármacos: Respuesta de los esferoides a un fármaco


La observación confocal combinada con la utilización del sistema permite evaluar la eficacia de fármacos en esferoides teñidos con un colorante fluorescente apropiado.

Objetivos

La mayoría de ensayos de eficacia para fármacos anticancerígenos se han basado en la utilización de células inmovilizadas, cultivadas como monocapas 2D. Sin embargo, estas monocapas 2D no pueden recapitular el entorno nativo complejo de las células cancerígenas, como la estructura 3D. Por ello, los cultivos celulares 3D como los esferoides están captando la atención como modelos dotados de potencial para maximizar la relevancia fisiológica de los estudios basados en células. En este estudio, se evaluó la eficacia de la estaurosporina (STS) en los esferoides a través de la observación confocal combinada con la utilización del sistema de análisis de imágenes celulares.

Objectives

Preparación de muestras

Se cultivó una suspensión celular de HeLa en una placa PrimeSurface® 96U (SUMITOMO BAKELITE CO., LTD) con una proporción de 500 células/pocillo. Se añadió STS diluido en serie a cada pocillo 48 horas después del inicio del cultivo celular. Se añadió Hoechst 33342 (colorante nuclear) y yoduro de propidio (PI: colorante para células muertas) en cada pocillo 24 horas después de la incorporación del STS.

Conclusión
Adquisición y análisis de imágenes fluorescentes

Las imágenes fluorescentes de los esferoides mencionados anteriormente, teñidos con Hoechst 33342 y PI, se obtuvieron con el sistema. Como puede verse en la Figura 1, la proporción de células muertas (pseudorojas) con respecto a todas las células (pseudoazules) en cada pocillo aumentó con el aumento de la concentración de STS. Las proporciones pueden mostrarse gráficamente en función de la concentración de STS (Figura 2, barras: SD, n=8) usando la identificación de núcleos y contando los resultados generados por el software de análisis. Estos resultados indicaron que el sistema permite realizar una evaluación sencilla de la eficacia del fármaco en una microplaca.

Conclusion

PrimeSurface es una marca comercial registrada de Sumitomo Bakelite Co., Ltd.
Olympus es una marca registrada, y NoviSight and Insightful Analysis, Intelligent Answers son marcas comerciales de Olympus Corporation.

Productos usados para esta aplicación

Software de análisis celular 3D

NoviSight

  • Reconocimiento de imagen 3D de la estructura global al nivel subcelular
  • Análisis estadístico
  • Diversos ensayos predeterminados

se ha añadido correctamente a sus marcadores

Ver marcadoresCerrar

Maximum Compare Limit of 5 Items

Please adjust your selection to be no more than 5 items to compare at once

Sorry, this page is not
available in your country.

Sbio