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Tecnología FluidFM: Enfoque novedoso para la edición genómica por CRISPR mediante entrega intranuclear directa

Tecnología FluidFM: Enfoque novedoso para la edición genómica por CRISPR mediante entrega intranuclear directa

Olympus Life Science y Cytosurge colaboran juntos para ofrecer un seminario web acerca de cómo superar uno de los mayores desafíos en la edición genómica: la administración de reactivos al núcleo. ¿Qué aprenderá?

  • ¿Cómo el sistema FluidFM® BOT de la serie BIO de Cytosurge supera las limitaciones establecidas en la edición genómica?
  • ¿Cómo se lleva a cabo el proceso de nanoinyección a través de una demostración en vivo?

Presentador:

Dr. Paul Monnier, Field Application Scientist, Cytosurge AG

FAQ

Webinar FAQs | Tecnología FluidFM: Enfoque novedoso para la edición genómica por CRISPR mediante entrega intranuclear directa

¿Por cuánto tiempo puede usarse la misma sonda y con qué frecuencia?

Si bien la misma sonda puede usarse teóricamente varias veces, no es recomendable debido a la alta probabilidad de contaminación entre muestras. En principio, una sola carga de sonda podría usarse para inyectar millones de células y, en la práctica, miles de ellas.

¿La sonda se obstruye con frecuencia?

Si bien la obstrucción de las sondas es un inconveniente común en aplicaciones como la microinyección, no es algo que se observe comúnmente con la tecnología Fluid-FM. La obstrucción de la sonda depende de una serie de factores, principalmente de la disolución amortiguadora (tampón químico) y molécula que se desea inyectar; sin embargo, no parece ser un problema en las aplicaciones relacionadas con CRISPR-Cas9. Además, la sonda puede ser revestida antes del experimento. Esto no solo impide que la sonda se obstruya, sino que también evita la adherencia de las células en la sonda después de varias inyecciones. De hecho, es posible inyectar varios miles de células con la misma sonda sin que se produzcan obstrucciones.

¿Es posible inyectar ovocitos?

La inyección de ovocitos con Fluid-FM es un tema de conversación interesante; sin embargo, hasta el momento, no se ha estudiado. Existe el potencial de desarrollar una sonda y protocolos que permitan esta aplicación.

¿Existe alguna limitación en la dosis o la cantidad que puede inyectarse?

Es posible regular la concentración del líquido cargado en la nanojeringa y, a continuación, la concentración inyectada en la célula. Asimismo, la presión puede modificarse a fin de controlar el volumen inyectado. No obstante, la inyección de grandes volúmenes puede provocar lisis celular y, por ello, está limitada a un picolitro aproximadamente. Este volumen es crucial en todas las aplicaciones.

Tecnología FluidFM: Enfoque novedoso para la edición genómica por CRISPR mediante entrega intranuclear directa

Olympus Life Science y Cytosurge colaboran juntos para ofrecer un seminario web acerca de cómo superar uno de los mayores desafíos en la edición genómica: la administración de reactivos en el núcleo.

Con los métodos de administración tradicionales, como la lipofección o la electroporación, el éxito de la edición genómica mediada por la técnica CRISPR-Cas es limitado y estresante para las células. Por lo general, solo se puede ejecutar una modificación a la vez que, además, se verá limitada en tamaño. Por otro lado, los reactivos deben atravesar la membrana celular, el citoplasma y la envoltura nuclear antes de llegar al núcleo. Por ende, estos métodos de administración  tradicionales no están optimizados para este largo trayecto, lo cual explica que sea común obtener bajas tasas de eficiencia en la transfección y que, a menudo, se combinen con una baja viabilidad.

El sistema FluidFM® BOT de la serie BIO de Cytosurge puede superar las limitaciones que encuentran los métodos de transfección tradicionales al administrar directamente la carga genética deseada por medio de una nanojeringa sensible a la fuerza del núcleo. Este método es fácil, independiente de la carga y delicadeza. De esta manera, permite introducir mezclas bien definidas en el núcleo celular, como la Cas9, las plantillas de reparación y múltiples guías sintéticas RNA (gRNA).

Dotarse de una eficiencia y viabilidad mejoradas es crucial cuando se trabaja con células raras o difíciles de infectar por transformación, como las células madre pluripotentes inducidas (iPSC), las neuronas o los cardiomiocitos, o cuando se administran grandes plantillas de reparación.

Tome conocimiento de estas mejoras hoy mismo a través de su inscripción. ¿Qué aprenderá?

  • ¿Cómo el sistema FluidFM® BOT de la serie BIO de Cytosurge supera las limitaciones establecidas en la edición genómica?
  • ¿Cómo se lleva a cabo el proceso de nanoinyección a través de una demostración en vivo?
Expertos
Tecnología FluidFM: Enfoque novedoso para la edición genómica por CRISPR mediante entrega intranuclear directafeb 27 2024
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