¿Qué recomendación puede darse para verificar la función de extensión de puntos?

La función de extensión de puntos (PSF) describe la respuesta de un sistema de procesamiento de imágenes a una fuente u objeto puntual. Por ello, la PSF es importante para la colocalización. A fin de verificar la PSF, se recomienda adquirir un apilamiento en Z con pasos de 10 a 20 nm y usar, por ejemplo, repeticiones moleculares de 100 nm, para que el usuario pueda medir la PSF en el área con subresolución.

Asimismo, se recomienda usar siempre aceite de inmersión Olympus con las lentes Olympus. Esto se debe a que tanto el índice de refracción (RI) como el número (de) Abbe (también denominado número V) son importantes. El número (de) Abbe es una medida aproximada de la dispersión del material, que describe cómo cambia el RI con la longitud de onda. Un número (de) Abbe alto indica una baja dispersión. El uso del aceite de inmersión Olympus evita las aberraciones cromáticas causadas por la dispersión. Asegúrese de verificar la fecha de vencimiento en la botella del aceite de inmersión.

Por último, asegúrese de que el cubreobjetos presente una capa de vidrio de 1,5 H y tome en cuenta el RI del medio de montaje.

¿Qué otro tipo de objetivos ofrece Olympus?

Olympus ofrece una amplia gama de lentes de objetivo para cualquier cantidad de aplicaciones, tanto en las ciencias de la vida como en la ciencia de los materiales; pero, es cierto que elegir la lente adecuada a veces puede ser engorroso. Sin embargo, Olympus ha simplificado el proceso al proporcionar una herramienta de búsqueda de objetivos en línea, lo que facilita el filtrado dinámico de sus opciones por función y aplicación. Si necesita asistencia adicional, es posible ponerse en contacto con el representante de campo local o con uno de los expertos en microscopía de Olympus.

¿Las lentes de las líneas X Line o A Line son mejores para la microscopía de escaneo láser? ¿Por qué?

Tanto las lentes X Line como las A Line son apropiadas para la microscopía de escaneo láser. Las lentes de la línea X Line de Olympus permiten una corrección de la aberración cromática de alta calidad, de 400 a 1000 nm, lo que da como resultado una reproducibilidad del color excepcional. Además, la alta apertura numérica permite la adquisición de imágenes brillantes de alta resolución, mientras que la buena corrección de bordes (planitud) posibilita imágenes de alta calidad con mayor uniformidad desde el centro hasta los bordes, incluso en un amplio campo visual (de visión).

Los lentes de la A Line también son excelentes en materia de súper resolución y una opción importante a considerar para aplicaciones específicas. Por ejemplo, las lentes de inmersión en aceite de silicona A Line son recomendadas para aplicaciones de células vivas, ya que el aceite de silicona no se seca a 37 ˚C (98,6 ° F) y su RI permanece constante. Además, las lentes de aceite de silicona ofrecen una amplia distancia de trabajo para permitir la observación a un nivel tisular más profundo y en campos más amplios. De forma particular, la lente de silicona 30x A Line es ideal para imágenes de orgánulos y peces cebra.

¿Se obtiene algún beneficio al usar objetivos X Line en el procesamiento de imágenes clínicas a partir de portaobjetos completos?

Sí, las aplicaciones clínicas son una de las áreas en las que los objetivos de la línea X Line son extremadamente beneficiosos. Por ejemplo, al usar un microscopio confocal de escaneo láser en aplicaciones de neurociencia, es común querer capturar imágenes de una sección completa para analizarla de forma colectiva; para ello, se requerirá la unión de imágenes por la aplicación mosaico. Sin embargo, un campo de visión irregular puede requerir la captura de imágenes con aumentos (zooms) adicionales para reducir los artefactos de la aplicación mosaico. A su vez, esto podría aumentar el daño fotográfico en su muestra y la cantidad de tiempo que toma el escaneo total. El objetivo de la línea X Line alcanza una alta resolución sin necesidad de aumentos (hacer zoom) ni capturas adicionales de imágenes.

¿Es posible usar lentes de objetivo X Line y A Line en microscopios que no son de la marca Olympus?

Si bien no se recomienda, las lentes de Olympus pueden usarse junto con otras marcas únicamente si se ajustan a la rosca de montaje (RMS). No obstante, muchos fabricantes han cambiado la rosca de montaje para evitarlo. Además, las magnificaciones establecidas por otros fabricantes varían debido a componentes, como la longitud del tubo, y se producen aberraciones cromáticas debido a diferentes correcciones aplicadas por otros componentes. El aceite de inmersión de otros proveedores o los cubreobjetos inadecuados pueden provocar cambios cromáticos, y el uso de microscopios de terceros pueden agravarlos. Puede que la planitud/nitidez en el área periférica tampoco sea satisfactoria, ya que solo los objetivos Olympus pueden corregirse para un número de campo de 26,5.

¿Cuál es la temperatura más fría que puede tolerar una lente de objetivo?

Se recomienda temperaturas entre 5 °C y 40 °C (41 °F y 104 °F). Sin embargo, es fundamental que se mantenga una temperatura constante, ya que los cambios pueden causar expansión y contracción en la óptica. Incluso algunos clientes almacenan sus objetivos en incubadoras.