La iluminación brillante y uniforme de un microscopio no siempre es fácilmente alcanzada como al encender una fuente de luz. Debido a que los microscopios son sistemas ópticos sofisticados, necesitan cuidados y ajustes a fin de garantizar que produzcan imágenes de óptima calidad. Una de las alineaciones ópticas más sencillas es la iluminación Köhler dedicada a las imágenes de campo claro con luz transmitida.
El proceso de alineación por iluminación Köhler es el mismo para los microscopios verticales e invertidos; sin embargo, las ubicaciones del condensador y campo, así como los topes de apertura, varían de un microscopio a otro. Asegúrese de consultar el manual de su microscopio si tiene problemas para ubicar estos componentes.
Consejo de procedimiento: Asegúrese de que sus dispositivos ópticos estén limpios antes de comenzar este proceso; un objetivo sucio puede hacer que la alineación Köhler sea más difícil de lo que realmente es.
1. Cambiar a un objetivo de baja magnificación
Cambiar a un objetivo de baja magnificación en su microscopio, como de 10X, brinda un amplio campo de visión y una gran profundidad de enfoque.
2. Enfocar la muestra
Para garantizar la posición adecuada de las aberturas en la trayectoria óptica, enfoque su muestra como punto de partida para el resto de los ajustes ópticos.
3. Cerrar el tope de campo
Después de que la muestra haya sido enfocada, cierre el tope de campo por completo. De no estar enfocada, ajuste la altura del condensador hasta que las hojas del tope de campo estén lo más nítidas posible, en correspondencia con el enfoque de la muestra.
4. Centrar el tope de campo
A continuación, ajuste la posición del tope de campo para que se halle en el centro de la imagen de su microscopio. Use las dos perillas, ubicadas en la parte frontal del condensador, para ajustar la posición XY del tope de campo.
Para verificar la posición central, abra el tope de campo hasta que vea los bordes del octágono alcanzar el borde del campo visual. Ajústelo de ser necesario.
5. Ajustar el tope de apertura
Después de contar con la imagen en posición, ajuste su tope de apertura a fin de controlar el contraste y la resolución. Es posible usar una lente de Bertrand o un componente óptico similar para visualizar el plano focal posterior. Este debe ocupar aproximadamente el 75 % del campo visual.
Comparación de la calidad de la imagen cuando el tope de apertura es demasiado ancho (izquierda), ajustado de manera óptima (centro) y demasiado pequeño (derecha).
6. Eliminar el tope de campo del FOV
Finalmente, abra el tope de campo para que quede justo fuera del campo visual. Evite abrirlo por completo ya que esto degradará su imagen.
¡Eso es todo! Ahora podrá aprovechar un campo de iluminación uniforme y brillante para imágenes microscópicas de ¡alta calidad!
Si desea ahondar en la iluminación Köhler, consulte nuestro manual básico en el Centro de recursos para microscopios, en el cual se explora la técnica en detalle.
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