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Manual básico para estereomicroscopios: Métodos de observación de luz transmitida

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Métodos de observación del estereomicroscopio

Los estereomicroscopios son herramientas útiles para examinar las muestras de modo macrométrico y estereoscópico. Estos microscopios proporcionan vías de observación individuales para cada ojo, lo que aporta a la muestra cierta profundidad para que parezca que está siendo examinada por sus ojos.

Los estereomicroscopios ofrecen dos tipos de iluminación principales: luz reflejada y luz transmitida.

  • La iluminación reflejada irradia la luz hacia abajo y en la muestra, permitiéndole observar el reflejo. Este tipo de iluminación funciona mejor con muestras opacas, como las rocas, los minerales, las plantas, los insectos y la cerámica.

  • La iluminación transmitida irradia la luz hacia arriba y a través de la muestra. Este tipo de iluminación funciona mejor con muestras que son transparentes, como las células, los tejidos, los embriones, el pez cebra u otras muestras acuáticas pequeñas.

Estereomicroscopio (microscopio estereoscópico)

Este tipo de muestra determina qué iluminación funciona mejor. En muchos casos, es posible que tenga que usar varios métodos. Cada tipo de iluminación también presenta varios métodos de observación, como puede verse en la Tabla 1 a continuación.

Tabla 1: Métodos de observación más usados para estereomicroscopios

Métodos de observación
Iluminación (de luz) reflejada Oblicua
Coaxial
Polarizada
Fluorescencia
Iluminación (de luz) transmitida Campo claro
Campo oscuro
Oblicua
Polarizada

A través de esta publicación se abordará la iluminación (de luz) transmitida con el fin de hacerle conocer mejor los métodos de observación que ofrece.

Cuatro métodos de observación comunes proporcionados por la iluminación transmitida

Como ya se habló de los métodos de observación más usados para la luz transmitida, ahora se proporcionarán sus características y aplicaciones más comunes.

  • Campo claro: La iluminación (de luz) transmitida de campo claro es el método más usado. La luz transmitida se aplica directamente debajo de la muestra. A medida que la luz pasa por la muestra, se crea contraste por la atenuación de la luz transmitida que atraviesa áreas densas de la muestra. Si la muestra no se tiñe y no tiene color inherente, entonces solo pueden obtenerse ciertas cantidades de información. En ese caso, puede resultar útil emplear otros métodos de observación.

  • Campo oscuro: La iluminación (de luz) transmitida de campo oscuro funciona bien en el caso de muestras que no están teñidas y son transparentes. La luz central, que suele atravesar la muestra, se bloquea y los rayos oblicuos de cada azimut son los únicos que impactan con la muestra. Estos rayos oblicuos son difractados, reflejados o refractados por las discontinuidades ópticas. El resultado es una muestra clara sobre un fondo negro.

  • Contraste oblicuo: La iluminación (de luz) transmitida oblicua también funciona bien con muestras no teñidas y transparentes. Este método le permite ajustar el ángulo de luz para ganar algo de contraste. Proporciona mayor contraste que el campo claro, pero menos contraste que el campo oscuro. Con el método oblicuo, es posible cambiar fácilmente el aspecto de la muestra a fin de encontrar el ángulo correcto para la iluminación.

  • Iluminación polarizada: La iluminación polarizada y transmitida puede usarse en muestras anisotrópicas, que suelen tener varios índices de refracción (muestras birrefringentes). La polarización necesita más dispositivos porque una muestra birrefringente debe ser colocada entre un polarizador y un analizador. El contraste proviene de la interacción de la luz del plano polarizado con la muestra birrefringente, el cual producirá dos componentes de onda individuales que serán polarizados en planos mutuamente perpendiculares.

Observación de campo claro de un pez cebra

Pez cebra capturado usando la observación de campo claro

Observación oblicua de medaka (izquierda). Observación de campo oscuro de medaka (derecha).

Medaka capturado con los métodos de observación de campo oscuro (derecha) y oblicuo (izquierda)

Amplíe el alcance de su observación

La capacidad para alternar de modo fácil y rápido entre los distintos métodos de observación ayuda a obtener información sobre su muestra de forma eficiente. Nuestras unidades estereoscópicas de luz transmitida del LED ayudan a alternar de forma rápida y sencilla entre iluminación polarizada, oblicua, de campo claro y de campo oscuro, así como entre los diversos métodos de contraste. ¡No pase por alto nuestra siguiente publicación de blog para averiguar cómo!

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Gerente de producto

Janeen Manning es gerente de producto de microscopios clínicos y de docencia para Evident. Antes de formar parte de Evident, ella trabajó para una empresa de dispositivos médicos especializada en enfermedades infecciosas. Posee una licenciatura en Bioquímica, Microbiología y Biología Molecular de la Universidad de Maine, como también una maestría en Artes Liberales en Biotecnología de la Universidad de Harvard.

mar 09 2020
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