Life Science Solutions
Note d’application

Cartographie des cellules d’une valve aortique à l’aide du microscope FLUOVIEW FV3000


Les valves d’un cœur adulte sain permettent au sang de circuler vers les poumons et dans tout le corps. Cependant, la structure et le bon fonctionnement de la valve aortique sont vulnérables aux perturbations environnementales. La compréhension de la composition cellulaire de la valve aortique est essentielle pour le traitement des valvulopathies aortiques, comme la calcification de la valve aortique bicuspide et la dégradation des lames valvulaires.

En utilisant le microscope confocal FLUOVIEW FV3000, nous avons pu confirmer la contribution des cellules exprimant le récepteur Tie2 à la valve aortique au moyen de la technologie de traçage de lignée.
 

Passage facile de l’imagerie macro à l’imagerie micro de cellules d’une valve aortique murine

Grâce à l’objectif d’imagerie macro à grossissement de 1,25x, nous avons pu acquérir facilement et rapidement une grande vue d’ensemble d’une coupe de valve aortique sur une seule image. La fonction « macro à micro » du microscope confocal FV3000 nous a permis de localiser rapidement les cellules cibles par un simple glissement de curseur sur l’image de vue d’ensemble, puis d’observer les structures fines d’une région d’intérêt à l’aide d’un objectif à haute résolution. 
 

Vidéo : Passage d’une vue macro à une vue micro du profil d’expression du récepteur Tie2 dans la valve aortique d’une souris Les cellules exprimant le récepteur Tie2 sont marquées avec la protéine EGPF (verte), et les cellules non endothéliales sont marquées avec la protéine tdTomato.

Équipement d’imagerie
Microscope : microscope confocal FV3000 avec platine motorisée
Objectif : 1,25x, 10x et 40x (PLAPON1.25X, UPLSAPO10X2 et UPLSAPO40X2)

L’apport du microscope confocal FV3000 à notre expérience

Passage de l’observation macro à l’observation micro

La fonction « macro à micro » du microscope FV3000 simplifie le repérage pour l’acquisition de données en vous permettant de voir les données dans leur contexte tissulaire et de localiser aisément des régions d’intérêt à observer en plus haute résolution.

Passage de l’observation macro à l’observation micro
 

La vaste gamme d’objectifs Olympus

Olympus offre une vaste gamme d’objectifs. Le trajet optique du FV3000 est compatible avec des objectifs allant de 1,25x à 150x et permet l’acquisition d’images d’échantillons allant des tissus de grande taille à de petits organismes.

Extensive Lineup of Olympus Objectives

Remerciements
Cette note d’application a été rédigée avec l’aide de Dre Wenli Fan, State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology, Department of Cardiology, Nanjing Drum Tower Hospital, The Affiliated Hospital of Nanjing University. 

Références

  1. Feng, Q. et al. PDK1 regulates vascular remodeling and promotes epithelial-mesenchymal transition in cardiac development. Mol Cell Biol 30, 3711-3721, DOI : 10.1128/MCB.00420-10 (2010).
  2. Di, R., Yang, Z., Xu, P. et Xu, Y. Silencing PDK1 limits hypoxia-induced pulmonary arterial hypertension in mice via the Akt/p70S6K signaling pathway. Médecine expérimentale et thérapeutique, 18, 699-704, DOI :10.3892/etm.2019.7627 (2019).
     

Appareil requis pour cette application

Microscope confocal à balayage laser

FV3000

  • Disponible en configuration galvanomètre seul (FV3000) ou hybride galvanomètre / résonant (FV3000RS)
  • Nouvelle détection TruSpectral haute efficacité et grande précision pour tous les canaux
  • Optimisé pour la prise d’images de cellules vivantes avec une sensibilité élevée et une faible phototoxicité
  • Inverted and upright frame options to suit a variety of applications and sample types
Objectifs apochromatiques macro

PLAPON

  • Affichent des images planes d’échantillons nécessitant des facteurs de transmission élevés jusqu’à la région du proche infrarouge du spectre.
  • Permettent d’acquérir des images nettes et précises, sans altération des couleurs lors des observations en fluorescence, en fond clair et DIC Nomarski.
  • Offrent une solution inégalable répondant à toutes les exigences de l’imagerie numérique en matière de qualité et de performances.
Objectifs super apochromatiques

UPLSAPO

  • Compensent intégralement les aberrations sphériques et chromatiques de la région du visible jusqu’à la région du proche infrarouge.
  • Permettent l’acquisition d’images en fluorescence/en fond clair lumineuses et de haute résolution dans de nombreuses applications cliniques.

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