Dans ce webinaire, Stefan, Lauren et Chunsong expliqueront comment créer plus facilement des images à super-résolution. La super-résolution d'Olympus utilise le système confocal à disque rotatif IXplore SpinSR pour allier vitesse, sensibilité et résolution en vue de créer une imagerie à super-résolution compatible avec les cellules vivantes. Ils décriront les étapes nécessaires à la création d'images à super-résolution, notamment la réassignation optique, l'analyse de Fourier et la déconvolution en 3D.
Foire aux questionsFoire aux questions du webinaire | Imagerie à super-résolution de cellules vivantesQuels sont les avantages du système IXplore SpinSR par rapport aux microscopes à éclairage structuré à champ large ?La rapidité est l'un des principaux intérêts à travailler avec le microscope IXplore SpinSR. Sur les microscopes à champ large, la grille doit tourner de nombreuses fois, et le temps d'exposition de la caméra limite la vitesse des expositions multiples. Grâce aux composants optiques à disque rotatif du système IXplore SpinSR, plus besoin de disposer d'une grille d'éclairage structuré, ce qui permet de collecter des images plus rapidement et avec un nombre limité de prises de vues. En outre, le microscope IXplore SpinSR est plus performant pour les observations en profondeur grâce à ses capacités confocales qui permettent de produire des images de meilleure qualité même avec les échantillons épais. La déconvolution en 3D est-elle nécessaire pour atteindre une résolution de 120 nm ?Les composants optiques dédiés et l'algorithme Olympus Super Resolution (OSR) permettent au système d'atteindre une résolution de 120 nm. Cependant, la déconvolution améliorera encore davantage la qualité d'image et le contraste. Quel logiciel contrôle le microscope IXplore SpinSR d'Olympus ?Le système est contrôlé par le logiciel cellSens d'Olympus, qui est largement utilisé pour les microscopes Olympus et est capable de reconnaître instantanément le matériel. De plus, son interface d’utilisation est simple et intuitive. Quels types de systèmes de détection sont disponibles avec le microscope IXplore SpinR d'Olympus, et quelle est leur cadence d'images ?En matière d'imagerie, plus le pixel est petit, meilleure est la résolution. Des pixels plus petits nécessitent une meilleure sensibilité et un bruit le plus faible possible. C'est pourquoi une caméra scientifique CMOS refroidie à l'aide d'un module Peltier représente l'option de choix. Nous utilisons une caméra scientifique 2 × 2K avec un rendement quantique de plus de 80 %. La principale limite est cependant l'échantillon. Si votre échantillon est très lumineux, le temps d'exposition de votre caméra détermine la cadence d'images, et vous n'aurez pas besoin d'acquérir plusieurs images pour créer une image à super-résolution. Ainsi, si vous prenez une image à super-résolution à chaque exposition, vous obtenez jusqu'à 100 images par seconde. En outre, le système vous offre la possibilité d’utiliser deux caméras, ce qui vous permet de prendre simultanément des images de deux couleurs. Par ailleurs, le système est également doté d'un filtre d'émission rapide intégré qui vous permet de réaliser rapidement une imagerie multicolore séquentielle selon le nombre de lasers et de filtres d'émission. Quels types de lasers sont fournis avec le système IXplore SpinSR ?Nous fournissons tous les lasers courants équipant les microscopes confocaux classiques. Nous proposons de série des lasers de 405, 488, 560 et 640 nm très robustes et stables qui durent plus longtemps que les lasers à gaz traditionnels. Est-il possible d’utiliser le système IXplore SpinSR d'Olympus pour du criblage à haut contenu ?Absolument. Olympus propose le logiciel avancé de criblage à haut contenu scanR. Il offre de nombreuses fonctionnalités uniques, telles que le tout dernier module d’IA à apprentissage automatique (apprentissage profond). Il est doté d'une puissante interface interactive, est capable d'effectuer un balayage à plusieurs niveaux et est extrêmement polyvalent. Concernant le criblage à haut contenu en particulier, le logiciel scanR assure une vitesse et une précision incomparables grâce à la fonctionnalité d'acquisition parallèle intégrée au logiciel. Est-il possible de réaliser des expériences de photostimulation sur le système IXplore SpinSR en combinaison avec l'imagerie confocale ?Oui. En outre, le contrôleur en temps réel du système peut contrôler le matériel plus ancien via le mode TTL, ce qui garantit une plus grande précision pour les expériences réalisées en fonction du temps. Vos objectifs sont-ils dotés de bagues de correction des aberrations sphériques ? Sont-ils faciles à régler ?Nos objectifs de la gamme A, conçus pour des applications spécifiques, sont dotés de bagues de correction. Nous proposons aussi un objectif à immersion dans le silicone qui a une grande distance de travail. Grâce à sa bague de correction et à l'huile de silicone dont l'indice de réfraction est très proche de l’indice de réfraction de l'échantillon, vous pouvez prendre des images plus en profondeur avec moins d'aberrations. Nous proposons également des objectifs spéciaux à grande ouverture numérique, ainsi que des objectifs planapochromatiques avec une ouverture numérique de 1,5 et une bague de correction que vous pouvez régler à différentes températures. Idéalement, vous pouvez donc aller jusqu'à 200 microns si vous utilisez un objectif 30x à immersion dans le silicone. |
