同じプローブをどれくらいの期間、回数にわたって使用できますか？

理論的には、同じプローブを複数回使用できるものの、二次汚染の可能性が高いためお勧めしません。原則として、プローブへの一度の充填で何百万もの細胞への注入に使用できますが、現実的には数千個の細胞に対応可能です。

プローブは詰まりやすいですか？

マイクロインジェクションなどのアプリケーションでは、プローブの詰まりはよく見られる問題ですが、Fluid-FMではそれほど頻繁ではありません。プローブの詰まりの要因はいくつもあり、主に注入する緩衝液や分子によるものです。ただし、CRISPR-Cas9に関するアプリケーションで問題が発生することはありません。また、実験前にプローブをコーティングできます。こうするとプローブの詰まりを防ぐだけでなく、何度も注入した後に細胞がプローブに付着するのも防げます。実際、当社では数千個もの細胞への注入に、同じプローブを詰まらせないで使用できています。

卵母細胞に注入できますか？

Fluid-FMを使用した卵母細胞への注入は興味深いテーマですが、現在のところ研究されていません。このアプリケーションを可能にするプローブや手順が開発される可能性はあります。

注入可能な用量や分量に制限はありますか？

ナノシリンジに充填する溶液濃度は調整可能であるため、細胞に注入する濃度は調整できます。また、圧力を変えることで注入量を管理できます。ただし、大量の注入量は細胞溶解を招く恐れがあるため、約1ピコリットルに制限されています。この量はすべてのアプリケーションに関係します。

FluidFM：核内直接送達によるCRISPR遺伝子編集への新たな手法

Q: 同じプローブをどれくらいの期間、回数にわたって使用できますか？

理論的には、同じプローブを複数回使用できるものの、二次汚染の可能性が高いためお勧めしません。 原則として、プローブへの一度の充填で何百万もの細胞への注入に使用できますが、現実的には数千個の細胞に対応可能です。

Q: 卵母細胞に注入できますか？

Fluid-FMを使用した卵母細胞への注入は興味深いテーマですが、現在のところ研究されていません。 このアプリケーションを可能にするプローブや手順が開発される可能性はあります。

Q: 注入可能な用量や分量に制限はありますか？

ナノシリンジに充填する溶液濃度は調整可能であるため、細胞に注入する濃度は調整できます。 また、圧力を変えることで注入量を管理できます。 ただし、大量の注入量は細胞溶解を招く恐れがあるため、約1ピコリットルに制限されています。 この量はすべてのアプリケーションに関係します。

このウェビナーではオリンパスライフサイエンスとCytosurge社がチームを組んで、遺伝子編集における最大の課題の1つである、遺伝物質の核内送達への対処方法について説明します。

リポフェクションやエレクトロポレーションなど従来の送達方法では、CRISPR-Cas媒介遺伝子編集の成功は限定され、細胞に負荷がかかります。通常、一度に1つの編集のみを導入でき、サイズは制限されます。遺伝物質は、核に到達する前に細胞膜、細胞質、核膜を通過する必要があります。従来の送達方法はこの長い経路に適応していないため、トランスフェクション効率の低さや、多くの場合それに伴う細胞生存率の低さを招きます。

Cytosurge FluidFM BOT BIOシリーズでは、力加減が繊細なナノシリンジで目的の物質を核内に直接送達することで、従来のトランスフェクション方法の限界を打破できます。この方法は操作が簡単で運ぶ物質に依存せず、作用が穏やかなので、明確に定義された混合物（Cas9、修復テンプレート、複合gRNAなど）を細胞核に導入できます。

効率と生存率の向上が特に重要なのは、希少な細胞やトランスフェクションが難しい細胞を扱う場合（人工多能性幹細胞（iPSC）、ニューロン、心筋細胞など）や、大きな修復テンプレートを送達する場合です。

これらの改善点をこのウェビナーでご覧ください。以下について学びます。

FluidFM BOT BIOシリーズが、定着した遺伝子編集の限界をどのように打破するか
ナノインジェクションプロセスがライブデモンストレーションを通してどのように作用するか

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