동일한 프로브를 얼마나 자주 사용할 수 있습니까?

이론적으로는 동일한 프로브를 여러 번 사용할 수 있지만, 교차 오염이 발생할 가능성이 높기 때문에 추천하지 않습니다. 프로브 1회분은 이론적으로 수백만 개, 실질적으로는 수천 개의 세포에 주입할 수 있습니다.

프로브가 자주 막히나요?

마이크로인젝션 같은 애플리케이션에서 프로브가 막히는 일은 잦지만, Fluid-FM에서는 흔하지 않습니다. 프로브 막힘에는 완충제와 주입하려는 분자를 필두로 한 몇 가지 요인이 있습니다. 하지만, CRISPR-Cas9과 관련한 애플리케이션에서는 문제가 되지 않습니다. 실험 전에 프로브를 코팅할 수도 있습니다. 코팅은 프로브 막힘을 방지할 뿐 아니라 여러 번의 주입 후에 세포가 프로브에 달라붙는 것을 막아줍니다. 사실, 코팅한 프로브로 막힘 없이 수천 개의 세포를 주입할 수 있습니다.

난모세포(oocyte)를 주입할 수 있습니까?

Fluid-FM으로 난모세포를 주입한다는 이야기는 흥미롭지만, 아직 연구된 사항은 아닙니다. 이러한 애플리케이션을 실현할 프로브와 프로토콜이 개발될 가능성이 있습니다.

투약량이나 주입할 수 있는 양에 제한이 있습니까?

나노주사기에 채운 액체의 농도, 더 나아가 세포에 주입되는 액체의 농도를 조절할 수 있습니다. 또한 주입량을 관리하기 위해 압력을 변경할 수 있습니다. 그러나 주입량이 많으면 세포 용해가 발생할 수 있기 때문에 주입량은 약 1피코리터로 제한됩니다. 이 용량은 모든 애플리케이션에 해당합니다.

FluidFM: 핵 내 직접 전달을 통한 새로운 CRISPR 유전자 편집 방식

Olympus Life Science와 Cytosurge는 협력하여 유전자 편집의 가장 큰 과제 중 하나인 시약을 핵으로 전달하는 방법을 알려주는웨비나를 발표했습니다.

리포펙션 또는 전기천공법 같은 기존 전달 방법을 사용하면 CRISPR-Cas 매개 유전자 편집의 성공이 제한적이고 세포에 스트레스를 줍니다.일반적으로 한 번에 하나의 편집만 가능하고 편집 크기도 제한됩니다.시약은 핵에 도달하기 전에 세포막, 세포질 및 핵막을 통과해야 합니다.기존 전달 방법은 이 긴 여정에 최적화되어 있지 않습니다. 따라서 일반적으로 형질주입 효율이 낮고 생존율도 낮아지는 경우가 많습니다.

Cytosurge FluidFM BOT BIO 시리즈는 힘 민감성 나노주사기로 원하는 약리 물질을 직접 핵으로 전달하여 기존의 형질주입 방법의 한계를 극복할 수 있습니다.이 방법은 손쉽고 약리 물질의 구애를 받지 않으며 부드럽게 진행되기 때문에 Cas9, 복구 주형, 여러 gRNA 같은 잘 정의된 혼합물을 세포핵에 주입할 수 있습니다.

유도 만능 줄기세포(iPSC), 뉴런, 심근 세포와 같은 희귀하거나 형질주입이 어려운 세포로 작업할 때 또는대형 수리 템플릿을 전달할 때는 효율과 생존 능력 향상이 특히 중요합니다.

이 웨비나에서 다음과 같은 향상 방법을 직접 확인하세요.

FluidFM BOT BIO 시리즈가 현재 정착된 유전자 편집의 한계를 극복하는 방법
나노 주입 프로세스가 작동하는 방식(라이브 데모)

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