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Notas de aplicação

Análise de medicamentos anticâncer — Dirigindo-se ao interior dos esferoides


A análise de imagens fluorescentes combinada ao uso do sistema de análise de imagens celulares permite a caracterização de compostos direcionados a uma área hipóxica dentro dos esferoides.

Objetivos

A heterogeneidade celular no tecido tumoral está intimamente relacionada à progressão do câncer, angiogênese, resistência a medicamentos e outros problemas. Portanto, a heterogeneidade celular está se tornando um fator importante na estratégia de desenvolvimento de medicamentos. Uma vez que um modelo in vitro de esferoides tumorais pode recapitular um microambiente de tumores sólidos em tecido vivo, espera-se que ele seja uma ferramenta útil na análise da heterogeneidade em células cancerosas. O sistema de análise de imagens celulares analisa quantitativamente os dados de imagem obtidos a partir de observações fluorescentes confocais. Neste estudo, a citotoxicidade de um medicamento foi avaliada quantitativamente por meio da visualização do tamanho dos esferoides e do microambiente dentro dos esferoides.

Objectives

Preparação de amostras

Os esferoides tumorais (TH-29) foram preparados usando uma placa PrimeSurface® 96U (SUMITOMO BAKELITE CO., LTD). Foram adicionados Hoechst 33342 e a sonda MAR (GORYO Chemical) aos esferoides um dia antes de serem medidos pelo sistema. Então, foram visualizados o tamanho e a área hipóxica dos esferoides.

Conclusão

De acordo com as imagens de projeção de intensidade máxima dos esferoides compostos por diferentes números de células HT-29, a área hipóxica aumentou com um aumento no tamanho dos esferoides (Figura 1). O tratamento dos esferoides que apresentavam uma grande área hipóxica com irinotecano (inibidor da topoisomerase) resultou na redução simultânea do tamanho dos esferoides e da área hipóxica (Figura 2 (a) e (b)). No entanto, o tratamento com rotenona (um inibidor da cadeia de transferência de elétrons na mitocôndria) resultou apenas na redução da área hipóxica sem uma redução do tamanho dos esferoides (Figura 2 (c) e (d)). Esses resultados indicaram que o sistema permite a avaliação quantitativa dos diferentes efeitos dos medicamentos na heterogeneidade das células cancerosas.

Conclusion

PrimeSurface é uma marca registrada da Sumitomo Bakelite Co., Ltd.
Olympus é uma marca registrada e NoviSight e Insightful Analysis, Intelligent Answers são marcas da Olympus Corporation.

Produtos usados nesta aplicação

Software de análise celular 3D

NoviSight

  • Reconhecimento de imagem 3D de toda a estrutura até o subcelular
  • Análise estatística
  • Variedade de ensaios padrão

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