Durante este webinar, Nicolas mostrará como pode ser rápido e fácil obter imagens de uma molécula única de alta qualidade, confiáveis e compreensíveis de suas amostras com uma resolução de 15 nm em 3D. Ele percorrerá todo o fluxo de trabalho de obtenção de imagens, desde a preparação da amostra até a análise de dados, para lhe mostrar o que a comunidade de microscopia de localização de molécula única (SMLM) tornou possível, quais são os erros comuns e como as ferramentas e o suporte da Abbelight podem tornar a jornada de obtenção de imagens e análise muito mais fácil.
Perguntas frequentesPerguntas frequentes sobre o webinar | Obtenção de imagens de múltiplas estruturas subcelulares em escala nanométricaQuanto tempo leva para adquirir imagens nanoscópicas multicoloridas em 3D?Graças à estratégia de desmixagem espectral, a aquisição de imagens de três cores costuma levar menos de um minuto para um campo de visão padrão em 3D (aproximadamente 50 x 50 µm) e alguns minutos para campos de visão maiores (150 x 150 µm). É difícil preparar estruturas nanoscópicas?A preparação da amostra requer apenas uma modificação simples do procedimento de preparação padrão, como alterar a concentração do fixador (por exemplo, PFA) ou aumentar a concentração de anticorpos. Requer apenas um ajuste fino do seu próprio protocolo. A equipe da Abbelight pode fornecer orientação neste sentido, se necessário. Como lidar com as aberrações cromáticas em experimentos multicoloridos e com os desvios das amostras?A estratégia de desmixagem espectral permite a obtenção simultânea de imagens de dois a três canais de vermelho distante, como 647 nm, 660 nm e 680 nm. Como as três cores são muito próximas no comprimento de onda, não há aberrações cromáticas com esta técnica. Os desvios das amostras são sempre calculados e aplicados na imagem em tempo real durante a aquisição e podem ser refinados com diferentes algoritmos e métodos publicados no processamento pós-aquisição. Qual é a importância da nanoscopia no diagnóstico de doenças como Parkinson, Alzheimer e infecções virais?O poder da nanoscopia SMLM se baseia no fato de que o resultado de uma aquisição não é apenas uma imagem, mas um arquivo de texto com a posição X, Y e Z de cada molécula detectada durante a aquisição. Isso permite:
Esse potencial é atualmente usado para ajudar a diagnosticar doenças, desenvolver novas terapias, diagnosticar infecções virais ou bacterianas e muito mais. |