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Guia do microscópio estereoscópico: métodos de observação de luz transmitida

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Métodos de observação do microscópio estereoscópico

Os microscópios estereoscópicos são ferramentas úteis para examinar espécimes macroscópica e estereoscopicamente. Estes microscópios fornecem caminhos de observação individuais para cada olho, o que proporciona alguma profundidade ao espécime, de forma a parecer que você está observando a olho nu.

Microscópios estereoscópicos oferecem dois tipos principais de iluminação: refletida e transmitida.

  • A Iluminação refletida projeta a luz para baixo no espécime, permitindo-o observar o reflexo. Este tipo de iluminação funciona melhor com espécimes opacos, como rochas, minerais, plantas, insetos e cerâmica.

  • A Iluminação transmitida projeta a luz para cima e através do espécime. Este tipo de iluminação funciona melhor com os espécimes translúcidos, como células, tecidos, embriões, peixes-zebra ou outras amostras aquáticas pequenas.

Microscópio estereoscópico

O tipo de espécime determina o tipo de iluminação que funcionará melhor. Em muitos casos, você poderá precisar usar vários métodos. Cada tipo de iluminação também possui diversos métodos de observação, tal como mostrado na Tabela 1 a seguir.

Tabela 1 — Métodos de observações comumente usados para microscópios estereoscópicos

Métodos de observação
Iluminação refletida Oblíqua
Coaxial
Polarizada
Fluorescência
Iluminação transmitida Campo claro
Campo escuro
Oblíqua
Polarizada

Hoje, irei explicar a iluminação transmitida, para que você possa aprender mais sobre os métodos de observação dela.

Quatro métodos de observação comuns da iluminação transmitida

Agora que nós mostramos a maioria dos métodos de observação usados para luz transmitida, vamos explorar as suas características e aplicações comuns.

  • Campo claro: a iluminação transmitida de campo claro é o método mais usado. A luz transmitida é aplicada diretamente abaixo do espécime. A luz passa pelo espécime e, com isso, o contraste é criado pela atenuação da luz transmitida através das áreas densas da amostra. Se a amostra não estiver tingida e não possuir cor inerente, somente pequenas quantidades de informação poderão ser obtidas. Neste caso, outros métodos de observação serão mais úteis.

  • Campo escuro: a iluminação transmitida de campo escuro funciona bem para amostras não tingidas e transparentes. A luz central que geralmente passa pelo espécime é bloqueada e somente os raios oblíquos de todos os azimutes chegam ao espécime. Os raios oblíquos são difratados, refletidos e/ou refratados por descontinuidades ópticas. O resultado é um espécime claro em um fundo escuro.

  • Contraste oblíquo: a iluminação transmitida oblíqua também funciona bem com amostras não tingidas e transparentes. Este método permite ajustar o ângulo da luz para ganhar algum contraste. Ele fornece um contraste maior em comparação com o campo claro, mas menor em comparação com o campo escuro. Com o método oblíquo, você pode alterar a aparência da amostra facilmente para encontrar o ângulo correta da iluminação.

  • Iluminação polarizada: a iluminação transmitida polarizada pode ser usada em espécimes anisotrópicos, os quais geralmente possuem múltiplos índices de refração (espécimes birrefringentes). A polarização exige mais equipamentos, pois o espécime birrefringente deve ser colocado entre um polarizador e um analisador. O contraste é obtido a partir da interação da luz polarizada do plano com o espécime birrefringente, o que produzirá dois componentes de onda separados que são polarizados em planos mutuamente perpendiculares.

Observação de peixe-zebra com campo claro

Imagem de peixe-zebra capturada usando observação de campo claro

Observação oblíqua de medakas (esquerda). Observação de campo escuro de medakas (direita).

Imagem de medaka capturada usando os métodos de observação oblíquo (esquerda) e de campo escuro (direita)

Expanda o escopo da observação

A capacidade de alternar rápida e facilmente entre métodos de observação pode ajudá-lo a obter informações sobre a sua amostra eficientemente. As nossas bases estereoscópicas de luz transmitida por LED podem ajudá-lo a alternar entre as iluminações de campo claro, oblíqua e polarizada, bem como entre diferentes métodos de contraste, de forma rápida e fácil. Para ver como, leia a próxima publicação do nosso blog!

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Gerente de Produto

Janeen Manning é gerente de produto de microscópios educacionais e clínicos na Evident. Antes de ingressar na Evident, trabalhou para uma empresa de dispositivos médicos especializada em doenças infecciosas. Ela tem um Bacharelado de Ciências em Bioquímica, Microbiologia e Biologia Molecular da Universidade de Maine e um Mestrado de Artes Liberais em Biotecnologia da Universidade de Harvard.

Mar 09 2020
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