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Perguntas frequentes sobre imagem de lâmina inteira em meio de imersão em óleo

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Imagem de lâmina inteira em meio de imersão em óleo

Nosso escâner de lâminas de pesquisa SLIDEVIEW VS200 é conhecido por seus recursos poderosos que capturam imagens digitais de alta resolução de lâminas inteiras de vidro.

Além das características padrão, o sistema pode ser aprimorado para funcionar em meios de imersão graças a um dispensador de líquido opcional e objetivas de imersão de óleo ou silicone de alta resolução. Esses recursos ajudam a maximizar a resolução e a qualidade da imagem.

Curioso para saber como funciona? Leia as respostas para as perguntas mais comuns sobre imagens de lâminas inteiras em meio de imersão.

Como funciona o dispensador de líquido VS200?

O escâner de lâminas usa uma bomba de pressão de ar para dispensar um volume definido de gotas na superfície da lâmina. O número de gotas distribuídas depende dinamicamente da área real de escaneamento. Elas são contadas por meio de um contador de gotas de fotodíodo dentro da cabeça do dispensador.

Este método de distribuição de líquido dinâmico é exclusivo para sistemas VS200 e ajuda a garantir que apenas a quantidade de meio de imersão necessária seja aplicada à lâmina e que nenhum meio de imersão caia da lâmina no escâner.

Para ver o dispensador de líquidos em ação, assista ao vídeo rápido abaixo.

Como o meio de imersão em óleo melhora a qualidade da imagem das lâminas?

A microscopia de imersão em óleo aumenta o índice de refração de uma amostra para alta resolução óptica e qualidade de imagem. As lâminas preparadas com técnicas de imersão em óleo funcionam melhor com uma ampliação maior, onde o óleo aumenta a refração, apesar dos comprimentos focais curtos.

Que tipos de objetivas de imersão em óleo podem ser usados com o escâner de lâminas VS200?

Para imersão em óleo em campo claro e imagens de fluorescência, três opções de objetiva X Line estão disponíveis: 40X, 60X e 100X objetivas de óleo plana apocromática UPLXAPO .

Como os diferentes aumentos são usadas em imagens de lâminas inteiras?

A opção de aumento de 40X oferece um grande campo de visão para escaneamento mais rápido, enquanto as objetivas de alto aumento (60X e 100X) fornecem mais detalhes em uma velocidade de escaneamento menor.

Aqui está um exemplo real de como essas ampliações são usadas. Nós escaneamos uma amostra de sangue periférico humano (Figura 1 abaixo) de uma leucemia promielocítica aguda (APL) usando uma objetiva de óleo UPLXAPO 1,4 (Figura 2, A e C) e uma objetiva de óleo UPLXAPO 60X com uma AN 1,42 (Figura 2, B e D).

Imagem de lâmina inteira de uma amostra de sangue periférico

Figura 1. Amostra de sangue periférico humano de uma leucemia promielocítica aguda escaneada com o VS200 escâner de lâmina de pesquisa. Imagens cortesia de Jana Kirsten, Instituto de Química Clínica e Medicina Laboratorial do Centro Médico da Universidade Regensburg.

Nesta aplicação, o sangue periférico mostra os promielócitos neoplásicos com núcleos bilobados ou grânulos extremos (Figura 2, seta laranja). Esses promielócitos neoplásicos também são encontrados na medula óssea, bem como nas células blásticas mieloides nas quais estão localizados feixes inteiros de bastonetes de Auer (seta verde em A, B e C). É importante procurar esses dados se houver suspeita de um APL.

Imagem de lâmina inteira de células blásticas mieloides com hastes de Auer

Figura 2: (A) Explosão mieloide com haste de Auer adquirida com aumento de 40X, mas com zoom digital de 60x. (B) Mesma blástica adquirida com ampliação de 60X e exibida na resolução nativa. (C) Mesma imagem que A, mas com resolução nativa de 40X. (D) Explosão com grânulos em ampliação de 60X.

A leucemia promielocítica (PML) é então confirmada com a evidência de uma translocação recíproca t (t15; 17) via FISH. Como resultado dessa mudança cromossômica estrutural, ocorre a fusão de dois genes no cromossomo 15 (PML) e no cromossomo 17 (receptor de ácido retinóico, alfa [RARα]). Os pacientes que sofrem de PML podem ser tratados com ácido retinóico trans (ATRA).

A comparação da imagem A (40X) com B (60X) na Figura 2 mostra o benefício da objetiva de óleo UPLXAPO 40X com AN 1,4, já que as hastes e grânulos de Auer ainda são claramente visíveis nesta ampliação menor. Além disso, o tempo de escaneamento com a objetiva de 40X foi 50% mais rápido em comparação com a objetiva de 60X (tempo de escaneamento para uma área de 1 × 1 cm: 40X = 4:40 minutos, 60X = 10:30 minutos).

Como as objetivas X Line melhoram a imagem da lâmina inteira?

Tudo o que as objetivas X Line oferecem:

  • Nivelamento expandido para qualidade uniforme.
  • Correção cromática melhorada para reprodutibilidade de cores excepcional.
  • Abertura numérica melhorada para excelente qualidade de imagem.

Que tipos de objetivas de imersão em silicone podem ser usados com o escâner de lâminas VS200?

Para meio de imersão de silicone, três opções estão disponíveis: Objetivas de óleo de silicone super apocromáticas UPLSAPO de 40X, 60X e 100X.

Como as objetivas de imersão de silicone beneficiam as imagens de lâmina inteira?

As objetivas de imersão em silicone oferecem uma grande abertura numérica e uma longa distância de trabalho, permitindo imagens estáveis, de longo prazo e de alta resolução que não são afetadas por mudanças de temperatura.

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Gerente de Suporte de Vendas

Daniel Göttel obteve seu título de PhD em Genética Humana pelo Centro Alemão de Pesquisa Oncológica em Heidelberg, Alemanha. Trabalhou como especialista em aplicações de sistemas de escaneamento de lâminas virtuais por muitos anos e adquiriu um conhecimento prático e profundo do campo. Atualmente, Daniel é gerente de suporte de vendas para o escâner de lâminas para pesquisa SLIDEVIEW™ VS200 e para Net Image Server (NIS) SQL na Evident.

Abr 01 2021
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