Desde o seu lançamento em 2019, as objetivas X Line têm sido o carro-chefe de nossa gama de objetivas de ciências da vida — formando o núcleo de muitos de nossos sistemas de imagem de alta tecnologia. Mas o sucesso deles não para por aí. Essa óptica premiada também foi integrada a muitos sistemas de microscopia de ponta projetados fora da Olympus.
Um exemplo é o sistema de microscópio confocal projetado pela PicoQuant.
PicoQuant é um fornecedor líder de equipamentos de imagem avançados, como laseres de díodo pulsado e aquisição de dados resolvidos no tempo, contagem de fóton único e instrumentos de fluorescência. Seu foco está no desenvolvimento de sistemas altamente sensíveis, modulares e fáceis de usar para apoiar pesquisadores em biologia, física, ciências dos materiais e química.
Como parte de uma colaboração de longa data com a Olympus, a PicoQuant testou as objetivas da X Line em seu microscópio confocal com resolução temporal MicroTime 200. Este sistema, mostrado na Figura 1, fornece sensibilidade para molécula única e resolução temporal de picossegundos.
Figura 1. O microscópio confocal de resolução temporal PicoQuant MicroTime 200 fornece sensibilidade de molécula única para estudos científicos de ponta.
Como a óptica X Line melhora o desempenho de sistemas avançados de imagem
As objetivas X Line trazem um benefício exclusivo para sistemas avançados de microscópio, fornecendo melhorias simultâneas em três áreas críticas — abertura numérica, nivelamento da imagem e correção cromática. Com objetivas convencionais, uma melhoria em um desses parâmetros muitas vezes leva à deterioração dos outros. Graças à nossa técnica premiada de fabricação de lentes (Figura 2), essas compensações agora são coisa do passado.
Figura 2. As objetivas Olympus X Line evitam a compensação típica entre nivelamento da imagem, correção cromática e abertura numérica.
Dr. Marcelle König, Cientista Sênior da PicoQuant, explicou como o desempenho das objetivas X Line melhora seu confocal desenho de microscópio.
“Uma técnica importante para nossos clientes é a excitação intercalada por pulsos (PIE). Ela usa laseres pulsados sincronizados de diferentes comprimentos de onda para a excitação quase simultânea de diferentes fluoróforos dentro do volume da amostra confocal, portanto, evitar mudanças cromáticas é fundamental. Para testar as objetivas X Line, observamos esferas fluorescentes excitadas com laseres de 485 nm (azul) e 640 nm (vermelho). Em seguida, medimos as contas simultaneamente usando a abordagem PIE para verificar a mudança e os resultados foram muito convincentes — as novas objetivas são realmente melhores para evitar mudanças cromáticas em todas as três dimensões”, disse Marcelle.
Marcelle continuou, “A abertura numérica aprimorada também é benéfica porque o MicroTime 200 é sensível a uma molécula, então quanto mais fótons você conseguir de sua amostra, melhor. Um exemplo de aplicações de molécula única é a transferência de energia de ressonância Förster — ou FRET. Esta é uma técnica proeminente em biologia, e a combinação com a abordagem PIE é altamente benéfica para estudos de FRET de molécula única.”
Após a execução de teste bem-sucedida, a PicoQuant implementou oficialmente as lentes objetivas da Olympus X Line em seus sistemas MicroTime 200. A objetiva mais comumente usada para esta aplicação é a lente de imersão em óleo 100X (UPLXAPO100XO), que possui uma abertura numérica de 1,45 (Figura 3).
Figura 3. A lente de imersão em óleo Olympus X Line de 100X.
Avanço da ciência por meio da colaboração
Marcelle também destacou a forte colaboração entre a Olympus e a PicoQuant.
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