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应用资料

有效分析自体软骨细胞培养的细胞生长特征


–融合度检测软件在细胞处理中的应用–

–融合度检测软件在细胞处理中的应用–

背景

稳定的细胞培养过程和对细胞生长特性的有效分析对于自体软骨细胞植入和新的再生药物开发而言,是非常重要的两个因素。这两个因素均有与之相关的难题。实现稳定的培养过程需要用以预测细胞传代最佳时间的准确、可重复的细胞融合信息。细胞生长特性分析的挑战性在于用户希望在不必培养大量细胞的情况下获取准确的数据。奥林巴斯推出了CKX-CCSW软件可以改善细胞培养过程并帮助解决这些问题。

CKX-CCSW融合度检测器软件

该软件可与显微镜和数码相机结合使用对活细胞融合度进行测量。快速、简单的细胞计数程序以及高度准确且可重复的数据可以实现恒定条件下稳定且可预测的细胞培养。此外,无需破坏培养物即可测量培养物的数量和密度,从而将污染可能性降至最低。诸如倍增时间(DT)和群体倍增水平(PDL)等重要细胞生长数据可在不干扰细胞的情况下以高效且无损的方式获得。

CKX41显微镜、DP27数码相机和CKX-CCSW软件。
CKX41显微镜、DP27数码相机和CKX-CCSW软件。

DT and PDL are calculated from the growth curve

CKX-CCSW融合度检测软件的效果

1.解决稳定自体软骨细胞培养过程的难题
细胞传代的时间通常依靠视觉进行评估,而这可能导致人为错误和造成传代时间变化。CKX-CCSW软件可提供培养皿中生长细胞的准确融合信息,因此用户能够在合适的时间进行细胞传代。

2.解决有效获取细胞生长特征分析数据的难题
CKX-CCSW融合度检测软件能够提供准确、可重复的细胞生长数据,因此用户可以安排细胞传代时间,并减少培养过程中的库存。

Appropriate Number of Cells for Passage

Fewer stocks needed when using the CCSW

准确性验证

为了评估CKX-CCSW软件的性能,可将软件计数的细胞数量与根据荧光染色图像计算的细胞数量进行比较。聚焦显微镜是获取准确生长曲线的重要因素,并且该软件的聚焦指示器可产生准确的结果。该软件的准确度估计为84–111%,表明该软件能够生成可靠的细胞生长曲线。

  • 相衬图像
    相衬图像
  • 荧光染色的细胞核图像
    荧光染色的细胞核图像

Accuracy Compared to Fluorescent Imaging (n=3)

在使用CKX-CCSW的情况下,即使细胞未染色,也可绘制与低密度到高密度细胞培养状态下进行荧光观察所获得计数准确度相当的生长曲线。

结论

CKX41显微镜、DP27数码显微镜相机和CKX-CCSW融合度检测器软件的结合让用户能够在尽可能减少人为错误的同时准确估计细胞传代的正确时间。该软件无需更改细胞培养环境工作流程即可轻松获取准确、可重复的细胞生长数据。

该项研究由日本医学研究与发展局(AMED)和经济产业省的“再生医学产业化基本评估技术开发”计划部分资助。样品制备和图像数据由OLYMPUS-RMS CORP提供。

Products used for this application

细胞融合度检查软件

CKX-CCSW

  • 测量未染色的培养细胞和融合度
  • 降低污染风险
  • 操作快速简便
  • 优化细胞培养过程
  • 提高定量分析质量
紧凑且符合人体工学的细胞培养解决方案设计

CKX53

  • 无需对中的简单相衬
  • 反相相衬(IVC)技术可提供清晰三维观察。
  • 带有3档位滑块选项的荧光
显微专用数码相机

DP27

  • 500万像素彩色CCD
  • 存档的文件具有高的像素分辨率,且同时具有高质量色彩和高保真度
  • 用于明场观察最佳的对比度和彩色模式

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