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药物疗效评估——微球大小的定量评估


通过使用该系统根据明场图像分析对微球横截面积进行定量的方式,对抗癌药物5-FU的疗效进行评估。

目的

最近,人们认为3D肿瘤微球可作为实体瘤的体外模型使用。通过抗癌药处理诱导3D微球的尺寸变化是与其抑制细胞增殖能力高度相关的指标。通过将显微镜与该系统结合对微球尺寸变化的明场图像进行分析,就可以有效定量评估抗癌药物的功效。本研究对5-FU诱导的HT-29 3D微球尺寸变化进行了定量评估。

目的

样品的制备

HT-29的细胞悬液以750个细胞/孔的密度种入96U孔板(SUMITOMO BAKELITE CO., LTD)中,以此制备微球。在开始细胞培养四天后,将5-FU加入3D微球中,并继续培养四天。在相同条件下,在贴壁细胞微孔板中制备HT-29 2D单层培养细胞,然后将5-FU添加到2D单层培养细胞中。

结论
针对由HT-29组成3D微球或2D单层的图像采集和分析

通过该系统获得包含HT-29 3D微球微孔板的明场图像(图1)。在获得一个微球的多幅包含赤道面的图像后,对每种浓度的5-FU进行平均强度投影和统计分析。HT-29 3D微球的横截面积随5-FU浓度的增加而减小,这表明5-FU抑制了微球中的细胞增殖(图2)。对于被Hoechst 33342染色的HT-29 2D单层,可利用系统获得的荧光图像计算粘附面积。HT-29 2D单层细胞的粘附面积随5-FU浓度的增加而降低(图2)。其结果表明该系统能够评估3D微球和2D单层细胞的药物功效。

图1:以下的微球明场图像 图2:3D微球或2D单层横截面积中5-FU浓度依赖性变化面积(μM2),2D单层5-FC浓度面积(μM2),3D微球

PrimeSurface为Sumitomo Bakelite Co.,Ltd.的注册商标。
Olympus为注册商标,NoviSight和Insightful Analysis、Intelligent Answers均为Olympus Corporation的商标。

Products used for this application

3D细胞分析软件

NoviSight

  • 从完整结构到亚细胞级别的3D图像识别
  • 统计分析
  • 多种默认检测方法

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