药物疗效评估——微球大小的定量评估

通过使用该系统根据明场图像分析对微球横截面积进行定量的方式，对抗癌药物5-FU的疗效进行评估。

目的

最近，人们认为3D肿瘤微球可作为实体瘤的体外模型使用。通过抗癌药处理诱导3D微球的尺寸变化是与其抑制细胞增殖能力高度相关的指标。通过将显微镜与该系统结合对微球尺寸变化的明场图像进行分析，就可以有效定量评估抗癌药物的功效。本研究对5-FU诱导的HT-29 3D微球尺寸变化进行了定量评估。

样品的制备

HT-29的细胞悬液以750个细胞/孔的密度种入96U孔板（SUMITOMO BAKELITE CO., LTD）中，以此制备微球。在开始细胞培养四天后，将5-FU加入3D微球中，并继续培养四天。在相同条件下，在贴壁细胞微孔板中制备HT-29 2D单层培养细胞，然后将5-FU添加到2D单层培养细胞中。

结论
针对由HT-29组成3D微球或2D单层的图像采集和分析

通过该系统获得包含HT-29 3D微球微孔板的明场图像（图1）。在获得一个微球的多幅包含赤道面的图像后，对每种浓度的5-FU进行平均强度投影和统计分析。HT-29 3D微球的横截面积随5-FU浓度的增加而减小，这表明5-FU抑制了微球中的细胞增殖（图2）。对于被Hoechst 33342染色的HT-29 2D单层，可利用系统获得的荧光图像计算粘附面积。HT-29 2D单层细胞的粘附面积随5-FU浓度的增加而降低（图2）。其结果表明该系统能够评估3D微球和2D单层细胞的药物功效。

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