您是否需要进行长时间活细胞或模式生物研究，但不确定旧款倒置科研级显微镜能否胜任？购买新倒置显微镜是否超出您当前的预算？您可能会惊奇地发现，只需进行少量关键性改造，您现有显微镜仍然可以帮助您实现目标。
除了我们显微镜改进系列第1部分和第2部分讨论过的升级之外，添加环境控制室即可帮助您实现颇具挑战的实时成像研究目标。
环境控制对稳定活细胞成像的重要性
活细胞成像可能需要花费20分钟，几个小时甚至更长时间。除了由于实验时间较长导致与室温变化有关的Z轴漂移外，您可能还需要控制以下方面：
- 温度（最高37°C [99°F]或最低22°C [72°F]）
- 湿度
- CO 2 （如果需要低氧条件，则为O2）
显微镜的环境控制可以配置为包括所有这些功能或其中之一，轻松将其升级用于各种活细胞和模型生物成像应用。
载物台台上式装置的好处
诸如Tokai Hit和Okolab等载物台台上式系统可以提供方便可移动的腔室单元。这样就可以根据需要，添加和解除环境控制。当仪器也被用于不要求进行活细胞成像的应用时，该系统特别方便。
而且，这类系统对于在数小时甚至数天内保持活力是非常有效的。可以通过灌注口补充水和介质增加湿度和营养/激动剂，并且溶液加热器可以尽可能降低温度变化影响。
另外还要注意，浸没式物镜在与样品接触时起到散热的作用，因此使用这类光学元件可能需要增加物镜加热器。
用于活细胞成像的显微镜外罩
另一个选择是完整的显微镜培养外罩。尽管从显微镜上拆下外罩并不轻松，但与载物台台上式腔室相比，其可以在更大的范围内对环境进行控制。
这类外罩空间大到足以容纳流体分配装置，并可提供稳定的温度环境。由于频繁的热/冷循环会加快显微镜组件磨损，因此其对样品和显微镜都有好处。许多制造商都提供在外罩内保持黑暗环境的遮光型号产品，因而无需单独的显微镜室。
室内环境变化对时间序列成像的影响
特别需要注意的是，大多数显微镜细胞培养系统的校准温度均为25°C。部分系统能够精确监控温度并进行快速温度校正。即便如此，最好还是要避免将仪器放置在容易发生热变化的地点。切忌将仪器放置在通风口下方，如果难以避免，可使用挡板引导气流避开显微镜。
最后，确保显微镜远离诸如离心机、冰箱、冰柜等大型设备，以及远离经常使用的门。这些因素都会为您的时间序列成像实验增加振动伪像。气动防振工作台确实可以帮助隔离仪器，但无论如何最好还是避开成像实验的振动干扰风险。
充分发挥您的显微镜潜力
是否想要了解更多显微镜改进技巧？阅读本系列的第1部分和第2部分可以了解实现有效活细胞成像的其他方面系统更新。您可以点击此处阅读：
