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Les marqueurs fluorescents sont devenus l’un des principaux outils pour générer des images contrastées en microscopie optique. Ils simplifient la visualisation des molécules, des organites et des différents types de cellules, pour des études de localisation et de transport ultra-précises. Le système de lame virtuelle VS120 peut être utilisé pour analyser des échantillons fluorescents selon une perspective unique : une lame enregistrée avec une intensité de fluorescence maximale peut être observée sans le moindre risque d’affaiblissement de la fluorescence ou d’altération des cellules. Tous les composants du système VS120 pour la fluorescence ont été conçus pour interagir en continu et procurer un système de numérisation à grande vitesse totalement automatisé extrêmement flexible et facile à utiliser.
Le ensemble de fluorescence VS120 n’est pas destiné à un usage de diagnostic clinique.
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Lors de la numérisation d’images de fluorescence, la fenêtre de l’outil du mode Numérisation peut être agrandie via l’onglet Fluorescence, qui a été adapté afin de répondre aux exigences spécifiques de la microscopie à fluorescence multicanal. Le système VS-ASW pour les applications de fluorescence assure la correction des décalages de mise au point de chaque canal de couleur et de l’ombrage. Il est également équipé de la fonction de défloutage en ligne, un outil puissant permettant de supprimer la lumière en dehors du plan focal pendant la numérisation des lames fluorescentes. Le processus d’acquisition commence par la génération d’une vue d’ensemble en fond clair ou en fluorescence de toute la lame. Il comprend la détection automatique de l’échantillon, qui évite de perdre du temps à numériser les zones de la lame en dehors de l’échantillon. La numérisation à fort grossissement est ensuite effectuée automatiquement sur toute la lame ou sur des zones d’intérêt prédéfinies plus petites à l’aide de l’objectif sélectionné. Lors de l’acquisition, des centaines d’images de fluorescence individuelles sont comprimées simultanément sans perte de qualité, puis assemblées pour créer une version agrandie et non altérée de la lame*. Ainsi, le processus se déroule en quelques minutes, même en utilisant des objectifs à fort grossissement.
* Veuillez noter que l’ombrage dépendant de l’échantillon peut influer sur la qualité de l’image.
Toutes les fonctions sont présentées dans une interface intuitive et conviviale. L’utilisateur est guidé pas à pas tout au long du processus d’acquisition de la lame virtuelle par un assistant de numérisation intuitif. Le système VS120 permet aux utilisateurs d’examiner les images de la lame et d’assigner des grossissements individuels, des zones à numériser et d’autres paramètres, même dans le cas d’une numérisation d’un lot de lames. Bien que plusieurs modes soient prédéfinis, le logiciel avancé permet aux utilisateurs expérimentés de garder le contrôle du processus de numérisation. Ainsi, différents paramètres de numérisation peuvent être attribués à des lames individuelles, ce qui permet de réduire considérablement la durée de la numérisation et donne la possibilité de ne numériser que les zones d’intérêt et de réduire ainsi la taille des fichiers de données.
Le système VS120 est également capable de balayer plusieurs échantillons de grande taille sur 15 plans Z. En sélectionnant le mode Numérisation de plans Z fluorescents virtuels, l’examinateur de la lame peut effectuer la mise au point sur différentes profondeurs de l’échantillon et examiner les zones d’intérêt selon différentes dimensions. À chaque position de l’échantillon complet, le système VS120 acquiert une pile d’images de fluorescence à différentes positions de mise au point, et ces piles de plans Z de l’échantillon fluorescent sont stockées dans les images, ce qui permet ensuite de faire la mise au point virtuellement sur le moniteur sur chacun des plans de la pile. L’image s’affiche à l’écran lors de la numérisation et peut être visualisée immédiatement sans affecter l’acquisition, grâce aux performances élevées et aux capacités de multitraitement du logiciel VS120.
Les utilisateurs peuvent visualiser l’image d’ensemble à un faible grossissement et passer à un fort grossissement par simple zoom. Tous les échantillons peuvent être évalués instantanément et simultanément, car ils sont stockés électroniquement sur un serveur central. Par conséquent, le système VS120 se prête parfaitement à une utilisation dans un certain nombre de domaines tels que la recherche, l’anatomopathologie et l’éducation.
Les progiciels pour applications de fluorescence du système VS (VS-ASW-FL) permettent désormais d’acquérir des lames virtuelles sous lumière d’excitation de fluorescence grâce au nouveau mode de numérisation de spécial pour la fluorescence. Ce mode permet d’appliquer des paramètres précédemment enregistrés pour la numérisation d’une seule lame ou d’une sélection de lames au sein d’un lot. Lorsqu’il est utilisé en conjonction avec le chargeur de lames L100, le débit est augmenté de manière à pouvoir numériser 100 lames marquées par fluorescence en un seul cycle. Comme la durée d’exposition est la même pour toutes les lames du lot numérisé, ce mode est uniquement applicable lors de la numérisation d’une série de lames présentant une intensité de fluorescence comparable, par exemple, pour effectuer des comparaisons quantitatives.
Le système VS120 d’Olympus combine parfaitement les techniques de microscopie et d’imagerie afin de créer une lame virtuelle qui est une copie exacte de l’échantillon réel. Une image en haute résolution de l’échantillon entier est générée, et cette image peut être visualisée et évaluée en temps réel à distance du microscope, puis analysée par un grand nombre de personnes à travers le monde. Tous les utilisateurs peuvent examiner le même échantillon tout en en contrôlant individuellement la position et le grossissement, comme s’il s’agissait d’une vraie lame. Le logiciel VS120 est conçu pour fournir toutes les fonctionnalités requises pour simplifier autant que possible la recherche et le diagnostic.
Matériel | Caméra | Caméra à CCD de 2/3", taille de pixel de 6,45 x 6,45 µm, haute sensibilité, refroidissement par effet Peltier, gamme dynamique de 14 bits |
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Objectifs | Tout objectif Olympus UIS2 compatible avec le procédé de fluorescence (y compris les objectifs standard dont sont équipés les systèmes VS120 tels que PLAPON 2x, UPLSAPO 10, UPLSAPO 20X, UPLSAPO 40x) | |
Source de lumière | X-Cite exacte de Lumen Dynamics, intensité stabilisée grâce à la fonctionnalité Closed-loop Feedback, intensité de lumière émise entièrement contrôlable par pas de 1 %, longue durée de vie de la lampe (2 000 heures), couplage du guide-lumière avec la potence du microscope, lampe préalignée | |
Filtres | Roue à filtre d’excitation ultrarapide (8 positions, porte-filtres de 25 mm standard), porte-filtres dichroïques motorisé à 6 positions. Différents jeux de filtres multibandes disponibles en fonctions des besoins de l’utilisateur. Roue à filtre ultrarapide en option (8 positions, porte-filtres de 25 mm standard) pour une sélectivité élevée et un meilleur rapport signal/bruit | |
Résolution de pixel | 0,32 µm/pixel (20x/O.N. 0,75) et 0,16 µm/pixel (40x/O.N. 0,9) | |
Vitesse de numérisation
(zone de 10x10 mm, grossissement 20x) |
< 5 min avec 2 canaux
Les durées totales de numérisation de lames fluorescentes varient en fonction de l’intensité de la fluorescence de l’échantillon, du nombre de canaux de couleur et de la zone à numériser | |
Options | Tout objectif Olympus UIS2 compatible avec le procédé de fluorescence (en plus des objectifs standard dont sont déjà équipés les systèmes VS120) | |
Logiciel | Acquisition d’image de fluorescence |
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Fonctions logicielles |
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