Los objetivos desempeñan un papel fundamental en su sistema microscópico, ya que ayudan a definir la calidad de imagen. La realidad es que muchos objetivos convencionales plantean desafíos en el procesamiento de imágenes que pueden comprometer al rendimiento de su microscopio.

Por suerte, la tecnología óptica sigue avanzando y corrigiendo los errores más comunes del procesamiento de imágenes. La publicación del blog de hoy explora las tres ventajas de usar los objetivos X Line^™ de alto rendimiento de Olympus para obtener datos de procesamiento de imágenes de gran calidad.

1. Planitud ampliada para una calidad uniforme

Con los objetivos convencionales puede resultar complicado conseguir imágenes planas y uniformes en un amplio campo de visión (FOV). Una planitud insuficiente de la imagen puede provocar bordes de imagen oscuros o borrosos, que reducen la calidad de imagen y dificultan el análisis o la medición de las muestras.

¿Cómo pueden ayudar nuestros objetivos X Line? Nuestros objetivos proporcionan una excelente planitud de imagen desde el centro hasta los bordes en observaciones con un amplio campo de visión. La alta calidad de imagen uniforme en todo el campo de visión ayuda a crear imágenes en mosaico muy precisas de grandes muestras, como secciones de tejidos enteros. También podrá estar seguro de que obtendrá datos de imágenes fiables para realizar análisis cuantitativos.

Analicemos un ejemplo:

Estas imágenes de 12 × 12 de una sección de cerebro de ratón Fucci2 Tg fueron capturadas con el microscopio confocal FV3000 usando objetivos de inmersión de aceite de 60x convencionales y X Line (A. N. de 1.42). Cian: DAPI [405 nm].

Tal como puede observarse, la planitud mejorada del objetivo X Line ofrece una imagen en mosaico más clara en un amplio campo de visión.

Datos de imagen por cortesía de Takako Kogure y Atsushi Miyawaki del Laboratorio de Dinámica de Funciones Celulares, RIKEN Center for Brain Science [Instituto de Ciencias del Cerebro de RIKEN].

2. Corrección cromática mejorada para una reproducibilidad del color excepcional

La aberración cromática es un desafío óptico muy común. Se produce cuando una lente no puede enfocar los distintos colores en un mismo punto. Básicamente, la lente actúa como un prisma: los colores que pasan por la lente se dividen en distintos ángulos. Si no se corrigen, las imágenes microscópicas parecerán distorsionadas con franjas de color alrededor de los bordes. A pesar de ello, muchas lentes convencionales ofrecen una aberración cromática insuficiente.

Nuestros objetivos X Line proporcionan una corrección de la aberración cromática amplia que va de 400 a 1000 nm. Esto mejora la reproducibilidad del color durante el procesamiento de imágenes por fluorescencia multicolor y de campo claro. La reproducción precisa de los colores también mejora la fiabilidad de la imagen para que pueda confiar en sus datos.

Vea la diferencia por usted mismo en las siguientes imágenes.

Estas imágenes de una célula de HeLa, etiquetada con la técnica FISH, se capturaron con el microscopio confocal FV3000 usando objetivos de inmersión de aceite 60x convencionales y X Line (A. N. de 1.42). CEP17 (espectro verde), CEP18 (espectro naranja) y núcleo (DAPI).

Con el amplio rango de corrección cromática del objetivo X Line de 400-1000 nm, las señales de color verde y rojo se visualizan forma precisa dentro del núcleo. En la imagen tomada con un objetivo convencional, las señales situadas en la parte inferior del núcleo celular aparecen fuera del mismo.

3. Apertura numérica mejorada para una calidad de imagen excelente.

La apertura numérica del objetivo define su capacidad para recoger luz y determina la resolución de imagen. Básicamente, un objetivo con una apertura numérica más alta puede capturar una resolución más alta e imágenes más claras para poder ver más detalles en su muestra.

Contrariamente, un objetivo con una magnificación alta pero una apertura numérica baja limitará su capacidad de ver los detalles de la muestra, lo que aumenta el riesgo de pasar por alto información importante.

Nuestros objetivos X Line ofrecen una apertura numérica más alta de hasta 1,45 para garantizar una calidad de imagen excelente para análisis cuantitativos. La apertura numérica mejorada puede ayudar en muchas aplicaciones, como en la detección de señales tenues durante la observación de fluorescencia o la reducción de la fototoxicidad/fotoblanqueo durante los experimentos de procesamiento de imágenes de células vivas por fluorescencia.

En el ejemplo de más abajo, podemos ver cómo la A. N. más alta de nuestros objetivos X Line puede mejorar el brillo.

Estas imágenes por fluorescencia de campo amplio de células NG108-15 se han capturado con objetivos secos 20x convencionales y X Line. Azul: núcleo; verde: microtubos, y rojo: filamentos de actina.

Como puede verse en la comparación de las imágenes, la apertura numérica mejorada del objetivo X Line capturó más luz y generó una imagen más clara.

Excelentes objetivos que permiten realizar experimentos eficientes

Los objetivos convencionales suelen requerir un equilibrio entre estas tres importantes ventajas: apertura numérica, planitud de imagen y corrección cromática. Si cambia de objetivo para conseguir una mejora en un área, puede comprometer el resto.

La serie de alto rendimiento X Line de Olympus se ha diseñado con lentes ultra finas para ayudarle a conseguir las tres ventajas posibles de un objetivo y conseguir experimentos más eficientes. Conozca más acerca de la serie X Line a fin de hallar el objetivo más adecuado para su aplicación.

* Si bien estas líneas celulares forman parte de las más importantes para la investigación médica, es imperativo reconocer la contribución de Henrietta Lacks a la ciencia que se produjo sin su consentimiento. Esta injusticia, a pesar de haber dado lugar a descubrimientos clave en inmunología, enfermedades infecciosas y cáncer, también ha generado importantes debates sobre la privacidad, la ética y el consentimiento en la medicina.
Para obtener más información sobre la vida de Henrietta Lacks y su contribución a la medicina moderna, haga clic aquí.
http://henriettalacksfoundation.org/
 

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