Comment recommanderiez-vous de vérifier la fonction d’étalement du point?

La fonction d’étalement du point (PSF) décrit la réponse d’un système d’imagerie à une source ponctuelle ou à un objet ponctuel. La PSF est donc importante pour la colocalisation. Pour vérifier la PSF, il est recommandé d’acquérir des empilements Z avec des pas de 10 à 20 nm et d’utiliser, par exemple, des répétitions de molécules de 100 nm permettant à l’utilisateur de mesurer la PSF dans la zone de sous-résolution.

Il est également recommandé de toujours utiliser l’huile à immersion Olympus avec les objectifs Olympus, car l’indice de réfraction et le nombre d’Abbe (également appelé « nombre V ») sont importants. Le nombre d’Abbe est une mesure approximative de la dispersion induite par le matériau, c’est-à-dire la façon dont l’indice de réfraction varie avec la longueur d’onde. Un nombre d’Abbe élevé indique une faible dispersion. L’utilisation de l’huile d’immersion Olympus évite les aberrations chromatiques causées par la dispersion. Assurez-vous de vérifier la date de péremption sur la bouteille d’huile à immersion.

Enfin, assurez-vous que la lamelle couvre-objet est d’épaisseur n° 1,5H, et tenez compte de l’indice de réfraction du milieu de montage.

Quels autres types d’objectifs Olympus propose-t-elle?

Olympus propose une vaste gamme d’objectifs pour un grand nombre d’applications dans les domaines des sciences de la vie et des sciences des matériaux. Le choix du bon objectif peut parfois s’avérer très compliqué! Olympus a toutefois simplifié le processus en mettant à votre disposition un outil de recherche d’objectifs en ligne, lequel vous permet de filtrer vos options de façon dynamique en fonction des caractéristiques et des applications souhaitées. Si vous avez besoin d’une assistance supplémentaire, vous pouvez contacter votre représentant local ou l’un de nos experts en microscopes.

Entre les objectifs X Line et A Line, lesquels conviennent le mieux à la microscopie à balayage laser et pourquoi?

Les objectifs X Line et A Line sont tous appropriés pour la microscopie à balayage laser. Les objectifs X Line d’Olympus assurent une correction de l’aberration chromatique de haute qualité de 400 à 1000 nm, ce qui se traduit par une reproductibilité chromatique exceptionnelle. De plus, la grande ouverture numérique permet l’acquisition d’images lumineuses à haute résolution, tandis que l’excellente correction des bords (planéité) facilite l’obtention d’images de haute qualité présentant une plus grande uniformité du centre jusqu’aux bords, même avec un grand champ de vision.

Les objectifs A Line sont également excellents pour la super-résolution et sont une option importante à envisager pour certaines applications. Par exemple, les objectifs à immersion dans l’huile de silicone de la gamme A Line sont recommandés pour les applications d’observation de cellules vivantes, car l’huile de silicone ne sèche pas à 37 °C (98,6 °F) et son indice de réfraction demeure constant. De plus, les objectifs à immersion dans l’huile de silicone permettent une grande distance de travail et donc l’observation à un niveau tissulaire plus profond et sur des champs plus larges. Plus précisément, l’objectif à immersion dans l’huile de silicone 30x de la gamme A Line d’Olympus est idéal pour l’imagerie des organoïdes et des poissons zèbres.

Y a-t-il des avantages à utiliser les objectifs X Line pour l’imagerie clinique de lames entières?

Oui, les applications cliniques font partie des domaines dans lesquels les objectifs de la gamme X Line sont extrêmement utiles. Par exemple, lors de l’utilisation d’un microscope confocal à balayage laser dans des applications de neurosciences, il est courant de vouloir prendre des images d’une coupe entière et d’analyser ces images collectivement après les avoir assemblées. Cependant, un champ de vision inégal peut nécessiter la prise d’images zoomées supplémentaires pour réduire les artefacts d’assemblage. Cela augmente les photodommages causés à votre échantillon et le temps nécessaire pour numériser toute la coupe. L’objectif X Line d’Olympus vous assure une haute résolution sans que vous ayez besoin de zoomer et de prendre des images supplémentaires.

Les objectifs X Line et A Line peuvent-ils être utilisés sur des microscopes d’autres marques qu’Olympus?

Bien que nous ne le recommandions pas, si les objectifs Olympus ont le filetage approprié (RMS), vous pouvez les utiliser avec des microscopes d’autres marques. Cependant, de nombreux fabricants ont modifié le filetage de leurs microscopes pour éviter l’utilisation d’objectifs de marques concurrentes. De plus, les grossissements définis par les autres fabricants varient en raison des caractéristiques de certains composants comme la longueur du tube, et des aberrations chromatiques se produisent en raison des différentes corrections des autres composants. L’utilisation d’huile d’immersion d’autres fournisseurs ou de lamelles couvre-objets inadaptées peut entraîner des écarts chromatiques, et l’utilisation de microscopes de tiers peut aggraver un peu plus le problème. Il est également peu probable que la planéité/netteté dans la zone des bords soit satisfaisante, car seuls les objectifs Olympus sont corrigés pour avoir un indice de champ de 26,5.

Quelle est la température la plus basse qu’un objectif peut tolérer?

Nous recommandons de garder les objectifs à une température entre 5 et 40 °C (41 et 104 °F). Il est toutefois essentiel que vous les mainteniez à une température constante, car les variations de température peuvent provoquer une expansion et une contraction des composants optiques. Certains clients rangent même leurs objectifs dans des incubateurs.