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Objetivas de microscópio: onde a mágica acontece

Objetivas de microscópio: onde a mágica acontece

Neste webinar, os especialistas em microscópio da Olympus Lauren e Klaus falam sobre a importância de uma boa óptica em um sistema de microscópio complexo e quais características ópticas são importantes para a alta qualidade final da imagem. Eles também destacam as novas conquistas ópticas graças à nova tecnologia de fabricação de lentes e explicam como essas novas lentes podem beneficiar quase qualquer aplicação de microscopia óptica, incluindo obtenção de imagens de lâminas inteiras, sistemas de super-resolução e microscopia de escaneamento a laser.

Apresentação:

Klaus Willeke, gerente de marketing de produtos
Lauren Alvarenga, gerente de produtos, microscopia de ciências da vida

Perguntas frequentes

Perguntas frequentes sobre o webinar | Objetivas de microscópio: onde a mágica acontece

Como você recomendaria verificar a função de dispersão de pontos?

A função de dispersão de pontos (PSF) descreve a resposta de um sistema de imagem a uma fonte pontual ou objeto pontual. Dessa forma, a PSF é importante para a colocalização. Para verificar a PSF, recomenda-se adquirir Z-stacks com etapas de 10–20 nm e usar, por exemplo, repetições de moléculas de 100 nm, permitindo que o usuário meça a PSF na área de sub-resolução.

Também se recomenda usar sempre óleo de imersão Olympus com as lentes Olympus. Isso porque tanto o índice de refração (RI) quanto o número de Abbe (também chamado de número V) são importantes. O número de Abbe é uma medição aproximada da dispersão do material, que descreve como o RI muda com o comprimento de onda. Um número de Abbe alto indica uma baixa dispersão. O uso de óleo de imersão Olympus evita as aberrações cromáticas causadas pela dispersão. Certifique-se de verificar a data de validade no frasco de óleo de imersão.

Por fim, certifique-se de que a lamínula do vidro de proteção seja um vidro de proteção de 1,5 H e considere o RI do meio de montagem.

Que outros tipos de objetivas a Olympus oferece?

A Olympus oferece uma ampla gama de lentes objetivas para qualquer número de aplicação tanto nas ciências da vida quanto nas ciências dos materiais; escolher a lente certa às vezes pode ser assoberbante! Contudo, a Olympus simplificou o processo ao fornecer uma ferramenta de busca de objetivas online, facilitando a filtragem dinâmica das suas opções por características e aplicações. Se você precisar de suporte adicional, você pode falar com seu representante de campo local ou com um de nossos especialistas em microscópio.

As lentes X Line ou A Line são melhores para A microscopia de escaneamento a laser e por quê?

As lentes X Line e A Line são adequadas para a microscopia de escaneamento a laser. As lentes X Line da Olympus fornecem uma correção da aberração cromática de alta qualidade entre 400–1000 nm, resultando em uma excepcional reprodutibilidade de cores. Além disso, a alta abertura numérica permite a aquisição de imagens brilhantes de alta resolução, enquanto uma boa correção de bordas (nivelamento) facilita a obtenção de imagens de alta qualidade com maior uniformidade desde o centro até as bordas, mesmo com um grande campo de visão.

As lentes A Line também são excelentes para super-resolução e são uma escolha importante a se considerar para sua aplicação específica. Por exemplo, as lentes de imersão em óleo de silicone A Line são ideais para aplicações de células vivas, já que o óleo de silicone não seca a 37 °C (98,6 °F) e o seu RI permanece constante. Além disso, as lentes de óleo de silicone oferecem uma longa distância de trabalho para permitir a observação em um nível de tecido mais profundo e em campos mais amplos. Especificamente, a lente de silicone de 30x A Line da Olympus é ideal para a obtenção de imagens de organoides e peixe-zebra.

Existe algum benefício em usar objetivas X Line para a obtenção de imagens clínicas de lâminas inteiras?

Sim, as aplicações clínicas são uma das áreas na qual as objetivas X Line são extremamente benéficas. Por exemplo, ao usar um microscópio confocal de escaneamento a laser em aplicações de neurociência, é comum desejar obter imagens de seção inteira a ser analisada coletivamente; isso requer a costura de blocos. Contudo, um campo de visão irregular pode exigir a obtenção de imagens adicionais com zoom para reduzir os artefatos de costura. Portanto, isso aumenta a quantidade de danos fotográficos à sua amostra e aumenta o tempo gasto para o escaneamento total. As objetivas X Line da Olympus alcançam uma alta resolução sem a necessidade de fazer zoom ou tirar imagens adicionais.

A lente objetiva X Line e A Line pode ser usada para microscópios que não são da Olympus?

Embora não seja recomendado, se as lentes se ajustarem à rosca (RMS), as lentes Olympus podem ser usadas em conjunto com outras marcas. Contudo, muitos fabricantes mudaram a rosca para evitar isso. Além disso, os aumentos definidos por outros fabricantes variam devido a componentes como o comprimento do tubo, e aberrações cromáticas são produzidas devido a diferentes correções de outros componentes. O óleo de imersão de outros fornecedores ou as lamínulas inadequadas podem ocasionar deslocamentos cromáticos, e o uso de microscópios de terceiros pode agravar isso. Também é improvável que o nivelamento/nitidez na área das bordas seja satisfatório, já que somente as objetivas Olympus são corrigidas para um número de campo de 26,5.

Qual a temperatura mais fria que uma lente objetiva pode aguentar?

Recomendamos temperaturas entre 5 °C e 40 °C (41 °F e 104 °F). Contudo, é essencial que você mantenha uma temperatura consistente, já que mudanças podem causar expansão e contração na óptica. Alguns clientes até armazenam as suas objetivas em incubadoras.


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Objetivas apocromáticas estendidas

UPLXAPO

Essas objetivas apocromáticas estendidas oferecem uma alta abertura numérica (AN), nivelamento da imagem amplo e homogêneo e compensação da aberração cromática de 400 nm a 1.000 nm. Elas possibilitam a captura de imagens de alta resolução e brilho para uma variedade de aplicações, incluindo a microscopia de campo claro, de fluorescência e de super-resolução confocal. 

  • Alta AN, nivelamento da imagem amplo e homogêneo e compensação de aberração cromática de ampla faixa de 400 nm a 1.000 nm
  • Imagem de precisão altamente confiável para aplicações amplas de microscopia de campo claro/fluorescência a microscopia confocal/super-resolução

Objetivas de microscópio: onde a mágica acontece

Neste webinar, os especialistas em microscópio da Olympus Lauren e Klaus falam sobre a importância de uma boa óptica em um sistema de microscópio complexo e quais características ópticas são importantes para a alta qualidade final da imagem. Eles também destacam as novas conquistas ópticas graças à nova tecnologia de fabricação de lentes e explicam como essas novas lentes podem beneficiar quase qualquer aplicação de microscopia óptica, incluindo obtenção de imagens de lâminas inteiras, sistemas de super-resolução e microscopia de escaneamento a laser.

Perguntas frequentes

Perguntas frequentes sobre o webinar | Objetivas de microscópio: onde a mágica acontece

Como você recomendaria verificar a função de dispersão de pontos?

A função de dispersão de pontos (PSF) descreve a resposta de um sistema de imagem a uma fonte pontual ou objeto pontual. Dessa forma, a PSF é importante para a colocalização. Para verificar a PSF, recomenda-se adquirir Z-stacks com etapas de 10–20 nm e usar, por exemplo, repetições de moléculas de 100 nm, permitindo que o usuário meça a PSF na área de sub-resolução.

Também se recomenda usar sempre óleo de imersão Olympus com as lentes Olympus. Isso porque tanto o índice de refração (RI) quanto o número de Abbe (também chamado de número V) são importantes. O número de Abbe é uma medição aproximada da dispersão do material, que descreve como o RI muda com o comprimento de onda. Um número de Abbe alto indica uma baixa dispersão. O uso de óleo de imersão Olympus evita as aberrações cromáticas causadas pela dispersão. Certifique-se de verificar a data de validade no frasco de óleo de imersão.

Por fim, certifique-se de que a lamínula seja um vidro de proteção de 1,5 H e considere o RI do meio de montagem.

Que outros tipos de objetivas a Olympus oferecem?

A Olympus oferece uma ampla gama de lentes objetivas para qualquer número de aplicação tanto nas ciências da vida quanto nas ciências dos materiais; escolher a lente certa às vezes pode ser exaustivo! Contudo, a Olympus simplificou o processo ao fornecer uma ferramenta de busca de objetivas online, facilitando a filtragem dinâmica das suas opções por características e aplicações. Se você precisar de suporte adicional, você pode falar com seu representante de campo local ou com um de nossos especialistas em microscópio.

As lentes X Line ou A Line são melhores para a microscopia de escaneamento a laser e por quê?

As lentes X Line e A Line são adequadas para a microscopia de escaneamento a laser. As lentes X Line da Olympus fornecem uma correção da aberração cromática de alta qualidade entre 400–1000 nm, resultando em uma excepcional reprodutibilidade de cores. Além disso, a alta abertura numérica permite a aquisição de imagens brilhantes de alta resolução, enquanto uma boa correção de bordas (nivelamento) facilita a obtenção de imagens de alta qualidade com maior uniformidade desde o centro até as bordas, mesmo com um grande campo de visão.

As lentes A Line também são excelentes para super-resolução e são uma escolha importante a se considerar para sua aplicação específica. Por exemplo, as lentes de imersão em óleo de silicone A Line são ideais para aplicações de células vivas, já que o óleo de silicone não seca a 37 °C (98,6 °F) e o seu RI permanece constante. Além disso, as lentes de óleo de silicone oferecem uma longa distância de trabalho para permitir a observação em um nível de tecido mais profundo e em campos mais amplos. Especificamente, a lente de silicone de 30x A Line da Olympus é ideal para a obtenção de imagens de organoides e peixe-zebra.

Existe algum benefício em usar objetivas X Line para a obtenção de imagens clínicas de lâminas inteiras?

Sim, as aplicações clínicas são uma das áreas na qual as objetivas X Line são extremamente benéficas. Por exemplo, ao usar um microscópio confocal de escaneamento a laser em aplicações de neurociência, é comum desejar obter imagens de seção inteira a ser analisada coletivamente; isso requer a costura de blocos. Contudo, um campo de visão irregular pode exigir a obtenção de imagens adicionais com zoom para reduzir os artefatos de costura. Portanto, isso aumenta a quantidade de danos fotográficos à sua amostra e aumenta o tempo gasto para o escaneamento total. As objetivas X Line da Olympus alcançam uma alta resolução sem a necessidade de fazer zoom ou capturar imagens adicionais.

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Embora não seja recomendado, se as lentes se ajustarem à rosca (RMS), as lentes Olympus podem ser usadas em conjunto com outras marcas. Contudo, muitos fabricantes mudaram a rosca para evitar isso. Além disso, as ampliações definidas por outros fabricantes variam devido a componentes como o comprimento do tubo, e aberrações cromáticas são produzidas devido a diferentes correções de outros componentes. O óleo de imersão de outros fornecedores ou os vidros de proteção inadequados podem ocasionar deslocamentos cromáticos, e o uso de microscópios de terceiros pode agravar isso. Também é improvável que o nivelamento/nitidez na área das bordas seja satisfatório, já que somente as objetivas Olympus são corrigidas para um número de campo de 26,5.

Qual a temperatura mais fria que uma lente objetiva pode aguentar?

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  • Alta AN, nivelamento da imagem amplo e homogêneo e compensação de aberração cromática de ampla faixa de 400 nm a 1.000 nm
  • Imagem de precisão altamente confiável para aplicações amplas de microscopia de campo claro/fluorescência a microscopia confocal/super-resolução
Especialistas
Klaus Willeke
Product Marketing Manager

Hello, I’m Klaus Willeke, Product Marketing Manager at Olympus Life Science Division and I’m responsible for our new X Line objectives. During my geology studies, the polarization microscope was an essential tool for determining and researching mineral compositions and structures. I was always fascinated by how colorful the world of minerals appears through a polarization microscope and how much you can discover with the help of light and good optics.

I’ve been working for Olympus for more than 22 years where I was 17 years a sales representative for industrial and life science microcopy in Germany and after that in European Product Marketing in the Scientific Solutions Division of Olympus, responsible for upright clinical and research microscopes and X Line lenses. 

Lauren Alvarenga
Gerente de Produto, Microscopia de Ciências da Vida

Olá! Eu sou Lauren Alvarenga e trabalho como gerente de produto para pesquisa de imagens na Olympus, onde atualmente sou responsável por software de imagem e microscópios invertidos e de superresolução. Eu tenho um bacharelado em comunicações fotográficas biomédicas do Rochester Institute of Technology.
Regulação pós-transcricional do transportador renal de fosfato Npt2a pelo hormônio da paratireóide. Estou na Olympus desde 2015, dando suporte às linhas de produtos FLUOVIEW nos EUA, Canadá e América Latina.

Objetivas de microscópio: onde a mágica aconteceAbr 24 2024
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