Wie würden Sie die Punktspreizfunktion überprüfen?

Die Punktspreizfunktion (PSF) beschreibt die Reaktion eines Imaging-Systems auf eine Punktquelle oder ein Punktobjekt. Die PSF ist also wichtig für die Kolokalisierung. Zur Überprüfung der PSF wird empfohlen, Z-Stapel in Schritten von 10–20 nm aufzunehmen und z. B. 100 nm Molekülwiederholungen zu verwenden, so dass der Benutzer die PSF im Bereich unterhalb der Auflösung messen kann.

Außerdem empfiehlt es sich, bei Olympus Objektiven immer Olympus Immersionsöl zu verwenden, weil sowohl der Brechungsindex (RI) als auch die Abbe-Zahl (auch V-Zahl genannt) von Bedeutung sind. Die Abbe-Zahl ist ein ungefähres Maß für die Dispersion des Materials, das beschreibt, wie sich der RI mit der Wellenlänge ändert. Eine hohe Abbe-Zahl weist auf eine geringe Dispersion hin. Durch die Verwendung von Olympus Immersionsöl werden chromatische Aberrationen, die durch Dispersion verursacht werden, vermieden. Achten Sie auf das Verfallsdatum auf der Immersionsölflasche.

Vergewissern Sie sich, dass Sie Deckgläser der Stärke 1,5H verwenden, und beachten Sie den RI-Wert des Eindeckmediums.

Welche anderen Arten von Objektiven bietet Olympus an?

Olympus bietet eine breite Palette von Objektiven für eine Vielzahl von Anwendungen in den Bio- und Materialwissenschaften. Deshalb kann die Wahl des richtigen Objektivs mitunter eine kleine Herausforderung sein. Zur leichteren Entscheidungsfindung hat Olympus ein Online-Tool zur Objektivauswahl entwickelt, mit dem Sie Ihre Optionen dynamisch nach Merkmalen und Anwendungen filtern können. Wenn Sie zusätzliche Unterstützung benötigen, können Sie sich an Ihren Vertreter vor Ort oder an einen unserer Mikroskopexperten wenden.

Sind die X Line Objektive oder die A Line Objektive besser für die Laser-Scanning-Mikroskopie geeignet und warum?

Sowohl X Line als auch A Line Objektive sind für die Laser-Scanning-Mikroskopie geeignet. Die X Line Objektive von Olympus bieten eine hochwertige Korrektur der chromatischen Aberration im Bereich von 400–1000 nm, was zu einer außergewöhnlichen Farbtreue führt. Darüber hinaus ermöglicht die hohe numerische Apertur die Aufnahme hochauflösender heller Bilder, während eine gute Randkorrektur (Plankorrektur) selbst bei einem großen Sehfeld hochwertige Bilder mit größerer Gleichmäßigkeit von der Mitte bis zum Rand ermöglicht.

A Line Objektive eignen sich ebenfalls hervorragend für eine hohe Auflösung und sollten für Ihre spezielle Anwendung auf jeden Fall in Betracht gezogen werden. Die Silikonöl-Immersionsobjektive der A Line werden beispielsweise für Anwendungen mit Lebendzellen empfohlen, da Silikonöl bei 37 °C nicht austrocknet und der Brechungsindex konstant bleibt. Darüber hinaus bieten Silikonöl-Objektive einen großen Arbeitsabstand, der eine Untersuchung in tieferen Gewebeschichten und in größeren Bereichen ermöglicht. Das Olympus A Line Silikonobjektiv mit 30facher Vergrößerung ist ideal für die Abbildung von Organoiden und Zebrafischen.

Haben die X Line Objektive einen Vorteil, wenn sie für die klinische Bildgebung ganzer Objektträger eingesetzt werden?

Ja, klinische Anwendungen sind einer der Bereiche, in denen die X Line Objektive von großem Nutzen sind. Bei der Verwendung eines konfokalen Laser-Scanning-Mikroskops in der Neurowissenschaft ist es beispielsweise üblich, einen ganzen Abschnitt abzubilden, der im Zusammenhang analysiert werden soll. Dafür ist das Zusammenfügen von Mosaikbildern („Stitching“) notwendig. Ein ungleichmäßiges Sehfeld kann jedoch die Aufnahme zusätzlicher vergrößerter Bilder erforderlich machen, um Stitching-Artefakte zu reduzieren. Dies wiederum führt zu mehr Beschädigungen an Ihrer Probe durch Phototoxizität oder Photobleichung und erhöht insgesamt den Zeitaufwand für den Scan. Das Olympus X Line Objektiv erreicht eine hohe Auflösung, ohne Zoom und ohne zusätzliche Bilder.

Können X Line und A Line Objektive für Mikroskope verwendet werden, die nicht von Olympus stammen?

Dies wird zwar nicht empfohlen, aber Olympus Objektive können in Verbindung mit anderen Marken verwendet werden, wenn die Objektive in das Gewinde (RMS) passen. Viele Hersteller verwenden jedoch ein anderes Gewinde, um dies zu verhindern. Außerdem variieren die Vergrößerungen anderer Hersteller aufgrund von Unterschieden bei den Komponenten wie der Tubuslänge. Zudem entstehen durch unterschiedliche Korrekturen anderer Komponenten chromatische Aberrationen. Immersionsöl von anderen Anbietern oder ungeeignete Deckgläser können zu einer chromatischen Verschiebung führen, und bei Verwendung von Mikroskopen anderer Hersteller kann sich dies noch verstärken. Die Planität/Schärfe im Randbereich dürfte ebenfalls nicht zufriedenstellend sein, da nur Olympus Objektive für eine Feldzahl von 26,5 korrigiert sind.

Was ist die kälteste Temperatur, die eine Objektivlinse vertragen kann?

Wir empfehlen Temperaturen zwischen 5 °C und 40 °C. Es ist jedoch wichtig, dass Sie eine konstante Temperatur beibehalten, da sich die Optik bei Temperaturschwankungen ausdehnen und zusammenziehen kann. Einige Kunden verwenden sogar Inkubatoren für die Lagerung ihrer Objektive.