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Notas de aplicação

Mapeando células da válvula aórtica com o microscópio FLUOVIEW FV3000


As válvulas de um coração adulto saudável permitem que o sangue flua para os pulmões e por todo o corpo. No entanto, a estrutura e a função da válvula aórtica são vulneráveis ao estresse ambiental. O entendimento da composição celular da válvula aórtica é fundamental para o tratamento de doenças valvares aórticas, como a calcificação da válvula aórtica bicúspide e a degradação do folheto.

Usando o microscópio confocal FLUOVIEW FV3000, confirmamos com sucesso a contribuição das células positivas Tie2 para a válvula aórtica identificada pela tecnologia de rastreamento de linhagem.
 

Obtenha com facilidade imagens macro a micro de células de válvula aórtica de murino

Graças à objetiva de imagem macro de 1,25X, pudemos adquirir de maneira fácil e rápida uma ampla visão geral de uma fatia de válvula aórtica com uma única imagem. Ao arrastar o mouse na imagem geral, a função macro para micro do microscópio confocal FV3000 nos permitiu localizar rapidamente as células-alvo e observar as estruturas finas em uma região de interesse usando uma lente objetiva de alta resolução.
 

Vídeo: Visão geral macro para micro do padrão de expressão de Tie2 na válvula aórtica de um mouse. As células positivas Tie2 são marcadas com EGFP (verde) e as células não endoteliais são marcadas com td Tomato (vermelho).

Equipamento de imagem
Microscópio: microscópio confocal FV3000 com platina motorizada
Objetiva: de 1,25X, 10X e 40X (PLAPON1,25X, UPLSAPO10X2 e UPLSAPO40X2)
 

Como o microscópio confocal FV3000 facilitou nosso experimento

Observação macro para micro

A função macro para micro do microscópio FV3000 fornece um roteiro para aquisição de dados, permitindo que você veja dados no contexto e localize facilmente regiões de interesse para obter imagens com resolução mais alta.

Observação macro para micro
 

Linha extensa de objetivas da Olympus

A Olympus oferece uma ampla gama de objetivas. O trajeto de luz óptica do FV3000 suporta objetivas de 1,25X a 150X e adquire imagens de amostras de tecidos grandes a pequenos organismos.

Linha extensa de objetivas da Olympus

Agradecimentos
Esta nota de aplicação foi preparada com a ajuda do Dr. Wenli Fan, do Laboratório Estatal Principal de Biotecnologia Farmacêutica, Departamento de Cardiologia, Nanjing Drum Tower Hospital, Hospital Afiliado da Universidade de Nanjing. 

Referências

  1. Feng, Q. et al. PDK1 regulates vascular remodeling and promotes epithelial-mesenchymal transition in cardiac development. Mol Cell Biol 30, 3711-3721, doi:10.1128/MCB.00420-10 (2010).
  2. Di, R., Yang, Z., Xu, P. & Xu, Y. Silencing PDK1 limits hypoxia-induced pulmonary arterial hypertension in mice via the Akt/p70S6K signaling pathway. Exp Ther Med 18, 699-704, doi:10.3892/etm.2019.7627 (2019).
     

Produtos usados nesta aplicação

Microscópio de escaneamento a laser confocal

FV3000

  • Disponível para configurações de escâner híbrido galvanômetro/ressonante (FV3000RS) ou apenas galvanômetro (FV3000)
  • Detecção TruSpectral extremamente precisa e eficiente em todos os canais
  • Otimizado para imagem de célula viva com alta sensibilidade e baixa fototoxicidade
  • Inverted and upright frame options to suit a variety of applications and sample types
Objetivas macroapocromáticas

PLAPON

  • Estas objetivas exibem imagens planas de fatores de alta transmissão até a região infravermelha próxima do espectro.
  • Adquirem imagens nítidas e claras sem alteração de cor nas observações de fluorescência, campo claro e DIC Nomarski.
  • Oferecem solução imbatível para cada tipo de necessidade de formação de imagem digital de qualidade e desempenho.
Objetivas superapocromáticas

UPLSAPO

  • Fornecem compensação completa para aberrações esféricas e cromáticas vísíveis até a região infravermelha próxima.
  • Adquirem imagens brilhantes e de alta resolução de microscopia de campo claro/fluorescência em ampla faixa de aplicação no campo clínico.

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