약제에 대한 암 스페로이드 내 미토콘드리아의 반응

결합 해체 물질이 스페로이드 내 미토콘드리아에 미치는 영향을 시각화할 수 있습니다.
이는 미토콘드리아에 대한 독성을 시험하는 유망한 방법입니다.

목적

미토콘드리아는 세포 에너지를 공급하는 필수 세포기관입니다. 미토콘드리아성 기능에 대한 독성은 새 화합물에 대해 시험할 중요 요소입니다. 본 연구에서는 약제에 대한 3D 세포 배양물 내 미토콘드리아 반응을
조사하였습니다.

샘플 제공

3D 세포 배양을 준비하기 위해 HT-29의 세포 현탁액을 U자형 96웰 플레이트에 파종하고 96시간 동안 배양하였습니다. 스페로이드를 MitoTracker® Red CMXRos(막전위 의존적 미토콘드리아 염색 염료) 및 FCCP(연합 해제 물질, 0-300 μM)로 45분 동안 배양하고 뒤이어 4% 포르말린으로 고정시키고 DAPI로 핵 염색하였습니다.

결론
이미지의 획득 및 분석

상기 스페로이드의 컨포칼 형광 이미지를 획득하였습니다. 세포 내 핵 및 미토콘드리아의 평균 광도를 평균 강도 투사 방법을 사용하여 5μM마다 획득된 겹치기 이미지로 추정하였습니다 . 핵에 대한 FCCP의 영향은 관찰되지 않았으며(그림 1 (a)), 반면에 FCCP 농도의 증가 시 세포 내 미토콘드리아의 평균 광도가 감소되었습니다(그림 1 (b) 및 2).

MitoTracker는 Molecular Probes, Inc.의 등록 상표입니다.
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