약효의 평가–약제에 대한 스페로이드의 반응

시스템의 사용과 결합된 컨포칼 관찰을 통해 적절한 형광 염료로 착색된 스페로이드의 약효를 평가할 수 있습니다.

목적

항암제의 효능 분석의 대부분은 2D 단분자층으로 생장한 고정화 세포의 사용에 의존하였습니다. 하지만 이러한 2D 단분자층은 3D 구조로 되어 있는 암세포 등의 복합적 고유 환경을 재현할 수 없습니다. 따라서 스페로이드 같은 3D 세포 배양이 세포 기반 연구의 생리학적 관련성을 향상시킬 가능성이 있는 모델로 주목을 끌고 있습니다. 본 연구에서는 세포 이미징 분석 시스템의 사용과 결합된 컨포칼 관찰을 통해 스페로이드 내 스타우로스포린(STS)의 효능을 평가하였습니다.

샘플 제공

HeLa의 세포 현탁액을 500개 세포/웰로 PrimeSurface® 96U plate(SUMITOMO BAKELITE CO., LTD)에 파종하였습니다. 세포 배양 시작으로부터 48시간 후 연속 희석된 STS를 각 웰에 추가하였습니다. STS의 추가로부터 24시간 후 Hoechst 33342(핵 염색 염료) 및 프로피듐 요오드화물(PI: 죽은 세포 염색 염료)을 각 웰에 추가하였습니다.

결론
형광 이미지의 획득 및 분석

시스템을 사용하여 Hoechst 33342 및 PI로 착색된 상기 스페로이드의 형광 이미지를 획득하였습니다. 그림 1^*에 표시된 바와 같이, STS 농도 증가 시 각 웰에 죽은 세포(가짜 빨간색) 대 모든 세포(가짜 파란색)의 비율이 증가되었습니다. 분석 소프트웨어로 생성된 핵의 식별 및 계산 결과를 사용하여 STS 농도 대비 비율을 그래프로 표시할 수 있습니다(그림 2, bars: SD, n=8). 이러한 결과는 시스템이 하나의 마이크로플레이트 내 약효를 쉽게 평가할 수 있음을 나타냅니다.

PrimeSurface는 Sumitomo Bakelite Co., Ltd의 등록 상표입니다.
Olympus는 등록 상표이며 NoviSight 및 Insightful Analysis, Intelligent Answers는 Olympus Corporation의 상표입니다.

* 비록 헬라 세포가 의료 연구에서 가장 중요한 세포주가 되었다고 해도, 과학에 대한 Henrietta Lacks의 공헌이 동의를 받지 않은 것이었다는 것을 인정해야만 합니다. 이로 인해 면역학, 전염병, 암에 대한 중요한 발견이 이루어졌지만 사생활, 윤리, 의학적 동의에 대한 중요한 논의도 촉발되었습니다.
Henrietta Lacks의 삶과 현대 의학에 대한 그녀의 공헌을 알아보려면 여기를 클릭하세요.
http://henriettalacksfoundation.org/