생명과학 솔루션
애플리케이션 노트

약효의 평가–약제에 대한 스페로이드의 반응


시스템의 사용과 결합된 컨포칼 관찰을 통해 적절한 형광 염료로 착색된 스페로이드의 약효를 평가할 수 있습니다.

목적

항암제의 효능 분석의 대부분은 2D 단분자층으로 생장한 고정화 세포의 사용에 의존하였습니다. 하지만 이러한 2D 단분자층은 3D 구조로 되어 있는 암세포 등의 복합적 고유 환경을 재현할 수 없습니다. 따라서 스페로이드 같은 3D 세포 배양이 세포 기반 연구의 생리학적 관련성을 향상시킬 가능성이 있는 모델로 주목을 끌고 있습니다. 본 연구에서는 세포 이미징 분석 시스템의 사용과 결합된 컨포칼 관찰을 통해 스페로이드 내 스타우로스포린(STS)의 효능을 평가하였습니다.

목적

샘플 제공

HeLa의 세포 현탁액을 500개 세포/웰로 PrimeSurface® 96U plate(SUMITOMO BAKELITE CO., LTD)에 파종하였습니다. 세포 배양 시작으로부터 48시간 후 연속 희석된 STS를 각 웰에 추가하였습니다. STS의 추가로부터 24시간 후 Hoechst 33342(핵 염색 염료) 및 프로피듐 요오드화물(PI: 죽은 세포 염색 염료)을 각 웰에 추가하였습니다.

결론
형광 이미지의 획득 및 분석

시스템을 사용하여 Hoechst 33342 및 PI로 착색된 상기 스페로이드의 형광 이미지를 획득하였습니다. 그림 1에 표시된 바와 같이, STS 농도 증가 시 각 웰에 죽은 세포(가짜 빨간색) 대 모든 세포(가짜 파란색)의 비율이 증가되었습니다. 분석 소프트웨어로 생성된 핵의 식별 및 계산 결과를 사용하여 STS 농도 대비 비율을 그래프로 표시할 수 있습니다(그림 2, bars: SD, n=8). 이러한 결과는 시스템이 하나의 마이크로플레이트 내 약효를 쉽게 평가할 수 있음을 나타냅니다.

Figure 1: STS concentration-dependent dead cells/all cells images of spheroids*

Figure 1: STS concentration-dependent dead cells/all cells images of spheroids

Figure 2: STS concentration-dependent dead cells/all cells ratio in spheroids

Figure 2: STS concentration-dependent dead cells/all cells ratio in spheroids

PrimeSurface는 Sumitomo Bakelite Co., Ltd의 등록 상표입니다.
Olympus는 등록 상표이며 NoviSight 및 Insightful Analysis, Intelligent Answers는 Olympus Corporation의 상표입니다.

이 애플리케이션에 사용되는 제품

3D 세포 분석 소프트웨어

NoviSight

  • 전체 구조에서 아세포까지 3D 이미지 인식
  • 통계 분석
  • 다양한 기본 분석

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