Neste webinar, Stefan, Lauren e Chunsong vão debater como criar mais facilmente imagens de super-resolução. A super-resolução da Olympus usa o sistema confocal de disco giratório IXplore SpinSR para combinar velocidade, sensibilidade e resolução para imagens de super-resolução compatíveis com células vivas. Eles vão explicar as etapas envolvidas para criar imagens de super-resolução, incluindo reatribuição óptica, análise de Fourier e deconvolução 3D.
Perguntas frequentesPerguntas frequentes sobre o webinar | Imagem de super-resolução de célula vivaQuais são as vantagens do sistema IXplore SpinSR em relação aos microscópios de iluminação estruturada de campo amplo?A velocidade é uma das principais vantagens de trabalhar com o microscópio IXplore SpinSR. Nos microscópios de campo amplo, a grade tem que girar muitas vezes, e o tempo de exposição da câmera limita a velocidade nas múltiplas exposições. No sistema IXplore SpinSR, a ótica baseada em disco giratório elimina a necessidade de uma grade de iluminação estruturada para que você possa coletar imagens mais rapidamente e com menos quadros. Outra vantagem é que o microscópio IXplore SpinSR tem melhores capacidades de profundidade — você pode usar um espécime mais espessa e ainda obter uma imagem melhor devido a suas capacidades confocais. A deconvolução 3D é necessária para atingir a resolução de 120 nm?A óptica de hardware dedicada e o algoritmo Olympus Super Resolution (OSR) são os principais componentes do sistema que atingem uma resolução de 120 nm. Contudo, a deconvolução melhorará ainda mais a qualidade e o contraste da imagem. Que software executa o microscópio Olympus IXplore SpinSR?O sistema é executado pelo software cellSens da Olympus, que é amplamente utilizado para os microscópios Olympus e pode reconhecer instantaneamente o hardware correto. Além disso, a interface do usuário é simples e intuitiva. Que tipos de sistemas de detecção estão disponíveis com o microscópio Olympus IXplore SpinSR, e qual é a taxa de quadros?Ao formar imagens, quanto mais pequeno o pixel, melhor é a resolução. Com pixels menores, você precisa ter melhor sensibilidade e também precisa ter cuidado com o ruído, portanto, uma câmera científica CMOS resfriada por Peltier é a opção preferida. Usamos uma câmera científica 2k × 2k com uma eficiência quântica de mais de 80%. Contudo, a principal limitação é a amostra. Se você tiver uma amostra mais brilhante, o tempo de exposição de sua câmera decide a taxa de quadros, e você não terá que adquirir várias imagens para construir uma imagem de super-resolução. Portanto, se para cada exposição você obtiver uma imagem de super-resolução, você alcançará até 100 quadros por segundo. Além disso, o sistema lhe dá a opção de ter duas câmeras, o que lhe permite obter uma imagem de duas cores simultaneamente. Contudo, o sistema também vem com um filtro de emissão rápida integrado que permite fazer imagens multicoloridas sequenciais rápidas, dependendo do número de lasers e filtros de emissão. Com que tipos de lasers o sistema IXplore SpinSR é fornecido?Fornecemos todos os lasers usuais que os microscópios confocais convencionais possuem. Temos lasers de estado sólido que são muito robustos e estáveis e duram mais que os lasers a gás convencionais, com 405, 488, 560 e 640 como padrão. É possível usar o sistema IXplore SpinSR para a triagem de alto conteúdo?Sim, com certeza. A Olympus oferece o software avançado de triagem de alto conteúdo scanR. Ele vem com muitos recursos únicos, como o mais recente módulo de IA de autoaprendizagem (deep learning). Ele tem uma poderosa interface interativa, pode realizar varredura multinível e é extremamente versátil. Especificamente em relação à triagem de alto conteúdo, ele oferece velocidade e exatidão excepcionais devido à característica de aquisição paralela incorporada no software scanR. É possível realizar experimentos de fotoestimulação no sistema IXplore SpinSR em combinação com formação de imagens confocais?Sim. Além disso, o controlador em tempo real do sistema pode controlar hardware mais antigo através do TTL, que é muito mais exato para experimentos dependentes do tempo. Suas lentes objetivas possuem colares de correção para aberrações esféricas? São fáceis de ajustar?Oferecemos objetivas A Line orientadas para a aplicação com colares de correção e uma objetiva de imersão em silicone que tem uma longa distância de trabalho. Possui um colar de correção e o óleo de silicone combina mais estreitamente com o índice de refração da amostra, para que você possa formar imagens mais profundamente e com menos aberrações. Também temos algumas objetivas especiais de abertura numérica alta, lentes planas apocromáticas com uma AN de 1,5 e vêm com um colar de correção que você pode configurar a diferentes temperaturas. Assim, idealmente você pode ir até 200 mícrons se estiver usando uma objetiva de imersão em silicone de 30x. |
