同一根探针可以使用多长时间？多久使用一次？

虽然从理论上讲，您可以多次使用同一根探针，但由于交叉污染的可能性很高，因此不建议这样做。原则上，单次加载探针可以注入数百万个细胞，而实际上，可以注入数千个细胞。

探针经常发生堵塞吗？

虽然在微量注射等应用中，探针堵塞是一个常见的难题，但在使用 Fluid-FM 时却并不常见。探针堵塞取决于很多因素，主要在于所需注入的缓冲液和分子。但是，在与 CRISPR-Cas9 相关的应用中，这似乎并不是什么问题。此外，可以在实验前给探针添加涂层。这不仅可以防止探针堵塞，还可以防止多次注射后细胞粘附在探针上。事实上，我们可以用同一个探针注入数千个细胞而不会发生堵塞。

可以注入卵母细胞吗？

使用 Fluid-FM 注入卵母细胞是一个有趣的话题，然而，到目前为止，尚未开展过这方面的研究。未来有可能开发出可实现这一应用的探针和方案。

可以注射的剂量或数量有无限制？

您可以调整装入纳米注射器的液体浓度，然后调整注入细胞的浓度。此外，还可以改变压力来控制注入量。但注入量过大可能会导致细胞溶解，因此仅限于约 1 微微升。此注入量适用于所有应用。

FluidFM：通过直接核内递送进行 CRISPR 基因编辑的新方法

奥林巴斯生命科学公司和Cytosurge公司合作举办了这次网络研讨会，讨论如何克服基因编辑中很大的挑战之一：将试剂传递入细胞核。

通过传统的递送方法，如脂转染或电穿孔，CRISPR-Cas介导基因编辑的成功颇为有限，而且会对细胞形成压力。通常情况下，一次只能引入一个编辑，而且其大小也会受到限制。试剂必须穿过细胞膜、细胞质和核包膜，最后才能到达细胞核。传统的递送方法没有针对这一漫长旅程进行优化，这就是常见的转染有效率低，且常伴有生存力低的原因。

Cytosurge FluidFM BOT BIO系列可以克服传统转染方法的局限性，用力敏纳米注射器直接将所需物质送入细胞核。这种方法操作简单、温和，不受特定物质的影响，使您能够将明确定义的混合物（如Cas9、修复模板和多种gRNA）送入细胞核。

在处理稀有或难以转染的细胞（如诱导性多能干细胞（iPSC）、神经元或心肌细胞）时，或者在提供大型修复模板时，提高效率和生存力尤为关键。

在这次网络研讨会上，您将了解到以下改进：

FluidFM BOT BIO系列如何克服既定的基因编辑限制
通过现场演示，了解纳米注射的执行流程

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