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概述
 | 针对科学领域推出的新一代FLUOVIEW系统FLUOVIEW FV3000系列激光扫描共聚焦显微镜能够解决一些现代科学艰巨的挑战。FV3000共聚焦显微镜具有活细胞成像和深层组织观察所需的高灵敏度和高速度，能够实现包括从宏观到微观成像、超分辨率显微观察和定量数据分析在内的多种成像方式。在正置式和倒置式显微镜镜架之间选择适合包括发育生物学、干细胞研究、电生理、肿瘤研究、载玻片成像等在内的多种生命科学应用的一款。 |
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TruSpectral全真光谱高灵敏度多通道成像采用专利的光谱检测技术的FV3000共聚焦显微镜的TruSpectral全真光谱检测器将高灵敏度与光谱灵活性集于一体，可以检测微弱的荧光团。
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从宏观到微观成像和超分辨率显微镜FV3000显微镜的从宏观到微观工作流程提供了数据采集路线图，让您能够在背景中查看数据并轻松定位感兴趣区域进行高分辨率成像。
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半个冠状小鼠脑片在显微镜下拍摄的图，二抗标记的是GFP（Alexa Fluor 488，绿色）、SV2（Alexa Fluor 565，红色）、Homer（Alexa Fluor 647，蓝色）。 |
树突（Anti-GFP抗体 Alexa Fluor 488，绿色）和突触标记（SV2，Alexa Fluor 565，红色）。利用cellSensCI反卷积功能处理的奥林巴斯超级分辨率图像。测量获得半波峰宽约为135nm。使用100X 1.35 NA硅油物镜获取的图像。 |
混合扫描可实现高速成像以及更高的出图率FV3000混合扫描单元将两套扫描振镜合二为一，提升共焦成像功能。
| Loading the player…  FV3000: 心肌细胞Related Videos |
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Loading the player…  FV3000：活细胞多标记荧光延时影像Related Videos | 精确的时间序列成像时间序列成像实验需要对样品进行持续聚焦以及低光毒性。
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利用硅油物镜进行深层组织观察硅油的折射率接近于活组织的折射率，因此能够以小球差进行活组织内部的深度高分辨率观察。
| Loading the player… /data/Video/Library/3Dimageofchickciliaryganglionclearedbytissueclearingreagent_480.mp4 经透明化处理的小鸡睫状神经节3D图像。 |
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应用技术
TruSpectral全真光谱检测与上一代的光谱检测单元相比， TruSpectral全真光谱检测技术能够呈现更为出色的结果。FV3000显微镜各通道均采用了将光谱检测器的灵活性与基于滤色片的灵敏度相结合的TruSpectral全真光谱检测技术。 |
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TruSpectral全真光谱检测技术的工作原理基于高效率的专利技术体相位全息（VPH）透射光栅，TruSpectal全真光谱检测技术配合可调狭缝可实现最低2nm的光谱检测。 | 灵敏度和准确性与传统光谱检测单元相比， FV3000系列共聚焦显微镜均配备的TruSpectral全真光谱检测技术实现更高的光通量。体相位全息透射光栅能够以比反射光栅高三倍的透射效率来衍射光线。由此最终获得出色的活组织和固定组织多色荧光显微图像。 | 更高的量子效率FV3000显微镜的高灵敏度检测器（HSD）让您能够采集到常规检测器无法检测到的微弱荧光信号。HSD单元采用两个最大量子效率45％的GaAsP检测器，并通过Pilter固体制冷技术在极低激发光下将图像背景噪声降低20％。HSD单元可配合FV3000系统实现四通道GaAsP成像。 |
 原始信号  各通道的灵敏度调整  光谱拆分 | 多达十六通道光谱TruSpectral检测TruSpectral全真光谱检测可在所有显微镜通道上独立工作，因此能够在多达四个通道上实现真正的多通道同时λ扫描。多通道λ模式有助于实现实时和实验后处理光谱拆分由此获得出色的光谱分离结果。在多达四个动态范围的条件下，可单独调节每个检测器的灵敏度实现明亮和暗淡信号的最佳分离。 |
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光谱拆分FV3000系统的光谱反卷积算法让重叠光谱能够基于来自λ序列图像的光谱信息进行分离。在实时图像采集和采集后处理过程中，可以通过拆分算法消除通道之间的荧光串扰，从而清晰分离多达16个荧光信号。 |
使用多通道λ序列图像对用YOYO-1、Alexa Fluor 488、罗丹明-鬼笔环肽和MitoTracker Red标记的PtK2细胞进行光谱拆分。 |
血小板与小鼠血管中的血栓结合。通过配有2 CH GaAsP PMT的共振振镜以全帧30 fps拍摄的图像。 | 两种扫描振镜模块可在两种扫描单元之间选择：常规扫描振镜（FV3000）或混合的常规/共振扫描振镜（FV3000RS）。
兼顾速度和视场数很多高速扫描方法受制于成像视野，从而限制了检查多细胞大视野的能力。FV3000RS显微镜的共振扫描振镜即便在每秒30帧的视频速率下也可能保持FN 18的全视场成像，最高可实现每秒438帧采样。 |
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循环平均化降噪处理低激光功率高速扫描尽管可以大限度降低光毒性，但往往会降低信噪比，从而难以获得高分辨率的时间序列图像。通过循环平均化降噪处理，您不但可以调整快速延时图像获得更高的信噪比，同时还可保持时间分辨率并保留原始数据。 |
（右）以低激光功率采集的30 fps数据进行了循环平均化降噪处理（10帧）。 |
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 | 从宏观到微观的观察以从宏观到微观的观察方式查看数据。使用FV3000系统经过重新设计的光路，可生成低至1.25倍的详细概览图像，然后即可轻松将所观察的结构以更高倍率成像。图像拼接可以让您采集相邻视场的连续3D（XYZ）和4D（XYZT）图像。从图像采集到拼接的全过程可完全自动化，由此节省时间并生成更多重要数据。 |
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TruSight反卷积：实现更高分辨率的图像处理利用TruSight反卷积消除模糊并获得更清晰、更锐利的图像。FV3000共焦显微镜的专用cellSens算法可通过一键点击完成从采集到处理的无缝工作流程，并通过GPU处理更快地得到结果。 |  GATTA-SIM纳米尺的图像  左图：原始共焦图像/右图：使用TruSight获得的图像 |
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 0.5 AU共聚焦图像  使用cellSens高级反卷积功能反卷积的0.5 AU共聚焦图像  奥林巴斯超高分辨OSR图像，可清晰区分点状染色。 | 多达4通道同步的Olympus超高分辨率 技术（FV-OSR）适用于共定位分析的奥林巴斯超分辨率成像模块可以依次或同时以120纳米的分辨率采集四个荧光信号，分辨率几乎是传统奥林巴斯共焦显微镜的两倍。
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TruFocus时间序列成像TruFocus技术让多点实验和长时程成像更加稳定可靠。TruFocus技术使用一种具有低光毒性的红外激光（1类）识别样品平面位置，并提供两种模式保持聚焦。
| Loading the player…  TruFocus: Z-Drift CompensatorRelated Videos |
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常规物镜（左）与X Line物镜（右）对比 | 使用X Line物镜实现高性能显微成像X Line物镜可提供宽范围色差校正、均匀的图像和更高的数值孔径，由此提高FV3000共聚焦显微镜的成像质量。 |
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利用硅油物镜进行深层组织观察奥林巴斯提供四款高数值孔径硅油浸物镜，使活细胞成像获得最佳的效果。
| Loading the player…  硅油物镜：用于活细胞成像Related Videos |
 PLAPON60XOSC2  PLAPON60XOSC2和UPLXAPO60XO的物镜性能比较 | 超级色差校准物镜（PLAPON60XOSC2）提高共定位分析的可靠性这款油浸物镜可大限度减少405-650nm光谱波段横向和轴向色差，使您能够获取可靠的共定位图像并进行超高定位精度的测量。物镜对近红外线区域最高达850nm波长进行色差校正，使之成为定量观察成像的理想选择。
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针对电生理实验的优化配置通过触发信号I / O接口控制盒将共聚焦成像与电生理设备同步。I / O接口控制盒还可将电压信号转换为能够以与荧光图像相同方式进行处理的图像。可轻松实现在光刺激的同时利用共聚焦扫描记录电压信号图像的功能。 |
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软件
直观的软件FV3000软件简化了从采集到分析的整个共聚焦成像及分析工作流程。可定制且可保存的布局设置让您无论复杂程度如何，均可轻松根据工作流程和实验需求自定义界面。 |
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实时3D渲染和分析利用FV3000软件的实时3D图像渲染功能并实时查看您的数据。3D图像可在图像采集期间进行构建并以实时图像方式显示。 选配NoviSight软件可以执行3D细胞分析。该软件特别适合多孔多细胞球等标本在3D范围内进行复杂的量化分析。 |
表达Fucci的HT29细胞系球体图像 |
选配NoviSight软件可用于进行多种3D细胞分析。 |
多位点延时和微孔板成像多位点延时（MATL）模块通过对电动载物台移动的精确控制获得强大而准确的时间序列数据，让您能够生成方便查看相关数据的细节概览显微图像。将MATL模块与多孔板导航器模块配合使用，可利用不同细胞培养容器和定制微孔板的精密直观的控制实现更多功能。 |
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利用时序管理器简化实验复杂性时序管理器软件模块可轻松处理复杂的科学实验。多天时间序列实验以微秒级扫描精度和毫秒级序列执行精度进行控制。可执行各种复杂实验方案，其中包括：
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显微图像定量分析FV3000共聚焦显微镜可增加一套可选配的分析功能来完成成像工作流程并提供定量数据。
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计数和测量 |
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FRET和FRAP实验FV3000显微镜与cellSens生命科学分析模块配合使用，可轻松获取及分析FRET和FRAP实验。
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FRET分析示例（受体光漂白） | FRAP分析示例 |
比例成像和强度调节显示（IMD）FV3000的比例成像分析软件具有强度调节显示（IMD）功能，在标准速度或高速采集时，实时显示荧光定量比例图像的变化过程。该功能对于测钙和FRET成像特别有用，可以增强信号对比度。 |
 CCCP处理前  CCCP处理后 Hela 细胞中tsGFP1-mito表达量的变化体现线粒体产热过程的蛋白质变化。 |  （左）CFP，（右）YFP FRET  （左）原始CFP / YFP比值，（右）CFP / YFP比值的IMD 心肌细胞 |
从Bmal1：luc稳定转染ES细胞的第12天，RA诱导分化细胞的生物发光 | 目标追踪使用cellSens目标追踪模块自动检测、追踪和分析延时图像中的运动对象。追踪功能提供了强大直观的工具来量化诸如细胞移动和分裂等动态过程。 |
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远程开发（RDK）模块远程开发模块可使用Python、C ++和Matlab等语言对特定FV3000显微镜功能进行远程控制和编程。RDK模块能够发挥系统所蕴含的更大潜力，是具有编程经验用户的强大工具。 |  |
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配置
选择适合您应用的配置 |
倒置显微镜
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正置显微镜（成像型配置）
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正置显微镜（电生理型配置）
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组件  FV3000 IO接口盒
 FV3000主激光耦合器和副激光耦合器
 FV3000光谱型检测器
 FV3000透射光检测器
 FV3000高灵敏度光谱检测器
软件 FV3000多区域延时软件模块
 FV3000多点和拼图软件模块
 FV3000超分辨率模块
 FV3000远程开发套件
Scanners FV3000Galvo振镜扫描单元
 FV3000混合扫描单元
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技术参数
| FV3000 | FV3000RS | ||
|---|---|---|---|
| 主激光耦合器 | 紫外/可见光激光 | 405nm：50mW，488nm：20mW，561nm：20mW，640nm：40mW | |
| 选配激光 | 副激光耦合器 | 445nm：75mW，514nm：40mW，594nm：20mW | |
| 近红外激光器 | 可选配730nm/785nm/808nm/980nm 等单谱线近红外激光器 | ||
| 激光控制 |
内置AOTF系统，具备光闸开关功能，可快速切换激光并调制各个激光强度连续可调，调节范围0.1%-100%，最小步进0.01%
激光强度连续可调，调节范围0.1%-100%，最小步进0.01% | ||
| 扫描单元 | 扫描方法 | 2个镀银Galvo扫描振镜振镜 |
2个镀银Galvo扫描振镜振镜
1个镀银共振和1个镀银Galvo振镜扫描 |
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常规扫描振镜
（常规成像） |
扫描分辨率：64×64至4096×4096
扫描速度：512X512 16帧/秒（双向扫描），256X256 62帧/秒 （双向扫描） 线扫速度：4000线/秒 光学变倍：1X–50X，0.01X步进 旋转扫描：360°自由旋转，步进0.1° 扫描模式：PT，XT，XZ，XY，XZT，XYT，XYZ，XYλ，XYZT，XYλT，XYλZ，XYλZT ROI扫描、矩形裁剪、椭圆、多边形、自由区域、直线、自由直线和点，用于光刺激的龙卷风模式 | ||
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共振扫描振镜
（高速成像） | - |
扫描分辨率：512×32至512×512
扫描速度：512X 512 30帧/秒 @ FN 18，512X32 438帧/秒 线扫速度：15800线/秒 光学变倍：1-8X，0.01X步进 扫描模式：XT，XZ，XY，XZT，XYT，XYZ，XYλ，XYZT，XYλT，XYZ，XYλZT ROI扫描、矩形裁剪，直线 | |
| 针孔 | 电动单针孔，针孔直径φ50-800μm，步进1μm | ||
| 视场数（FN） | 18 | ||
| 二向色镜转轮 | 8孔位（包含高性能DM和10/90反射镜） | ||
| 扫描器选配单元 | 激光功率监控器，可选激光接口 | ||
| 高灵敏度光谱检测器 | 检测器模块 | 半导体制冷型磷砷化镓（GaAsP）光电倍增管，2通道 | |
| 光谱分光方式 |
电动体相位全息（VPH）透射光栅，电动可调狭缝，
可调节波长带宽：1-100nm，光谱检测精度：2nm，步进调节精度：1nm | ||
| 二向色镜转轮 | 8孔位（包含高性能DM和反射镜） | ||
| 光谱检测器 | 检测器模块 | 多碱光电倍增管，2通道 | |
| 光谱分光方式 |
电动体相位全息（VPH）透射光栅，电动可调狭缝，
可调节波长带宽：1-100nm，光谱检测精度：2nm，步进调节精度：1nm | ||
| 二向色镜转轮 | 8孔位（包含高性能DM和反射镜） | ||
| 系统控制 | 控制单元 |
操作系统: Windows7 专业版64位（英文版），Windows 10 专业版64位;
内置用于实现精确成像时序的专用I/F电路板和硬件时序器 | |
| 显示 | 30或32英寸显示器（WQUXGA 2560×1600） | ||
| 荧光照明单元 | 外置荧光照明光源，通过光纤连接至扫描单元，共聚焦（LSM）光路和荧光观察光路电动切换 | ||
| 透射光检测单元 | 外置透射光光电倍增管检测器和LED光源，电动切换 | ||
显微镜 |
| 倒置机架 | 正置机架（用于成像） | 正置机架（用于电生理） | |
|---|---|---|---|
| 显微镜机架 |
电动倒置显微镜
IX83 (IX83P2ZF) |
电动固定载物台正置显微镜
BX63L |
电动固定载物台正置显微镜
BX63L |
| 物镜转盘 | 电动六孔位物镜转盘 | 电动七孔位物镜转盘 |
编码型摇摆式物镜转换器
编码型滑入式物镜转换器 |
| 镜 | 电动长工作距离聚光镜 | 电动万能聚光镜 | 手动长工作距离聚光镜 |
| 聚焦行程 |
内置电动物镜转盘聚焦
行程：最小增量：10nm | ||
软件 |
| 基本功能 |
专为暗室环境设计的GUI。用户可设置布局。
采集参数一键重载功能。硬盘自动记录保存功能；随Z轴深度变化激光强度和HV值自动调节功能。 Z序列有ɑ混合、最大亮度投影、等值面渲染等多种重构方式。 |
|---|---|
| 2D图像显示 | 每个图像显示方式：单通道并列，叠加，剪切，实时拼图，多维序列（Z/T/λ）；LUT:单色设置，伪彩设置；注释：图形和文字注释。 |
| 3D图像显示 |
互动式3D立体渲染：立体渲染显示、投影显示、动画显示。
3D动画（最大亮度投影，α混合）3D和2D序列操作功能 |
| 图像格式 |
OIR图像格式
8/16位灰度显示/指示演示，24/32/48位彩色，JPEG / BMP / TIFF图像功能，奥林巴斯专用multi-tif格式。 |
| 光谱拆分 | 多达16通道荧光实时光谱拆分模式 |
| 图像分析 | 区域和线条测量、时间/ Z轴上的强度图、荧光共定位分析。 |
| 统计处理 | 2D数据直方图显示。 |
| 选配软件 | 电动载物台控制 |
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