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概述
 | 助力新一轮科学领域革命的新一代FLUOVIEWFLUOVIEW FV3000系列共聚焦激光扫描显微镜可应对现代科学中一些非常困难的挑战。 FV3000共聚焦显微镜具有活细胞成像以及深层组织观察所需的高灵敏度和速度，可实现多种成像模式，包括宏微观转换成像、超分辨率显微镜检查和定量数据分析。 |
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从紫光到近红外的高灵敏度多通道图像FV3000共聚焦显微镜的TruSpectral全真光谱检测器采用专利光谱检测技术，将高灵敏度与光谱灵活性结合起来，即使是很暗的荧光基团也可以被检测到。
我们新推出的FV3000近红外（NIR）解决方案通过一系列精心设计的NIR升级，将FV3000显微镜的波长检测能力进一步扩展到高达890 nm的近红外区：
(a)用胶质纤维酸性蛋白（GFAP；星形胶质细胞标记物；黄色）、钙调素依赖性蛋白激酶II（CaMKII；锥体神经元标记物；红色）、两性激素诱导的蛋白1前体（AMIGO-1；神经元膜标记物；青色）、小白蛋白（PV；抑制性神经元标记物；紫色）、锚蛋白G抗体（AnkG；轴突起始段标记物；绿色）和核黄（细胞核标记物；蓝色）标示的小鼠mPFC。 |
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宏微观转换成像和超分辨率显微镜检查FV3000显微镜的宏微观工作流程为数据采集提供了路线图，使您能够在环境中查看数据，并轻松定位感兴趣区域以获得更高分辨率的成像。
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为进行扩张显微镜观测（预扩张）而嵌入的小鼠大脑半切片，标记有抗GFP的二级抗体（Alexa-Fluor 488，绿色）、抗SV2的二级抗体（Alexa-Fluor 565，红色）、抗Homer的二级抗体（Alexa-Fluor 647，蓝色）。 |
树突标记（GFP抗体，Alexa Fluor 488，绿色）和突触标记（SV2，Alexa Fluor 565，红色）。 用cellSens高级约束迭代反卷积处理的奥林巴斯超分辨率图像。 平均半峰宽测量值约为135 nm。 使用100倍1.35 NA硅油浸入式物镜采集的图像。 |
可实现高速成像并提高生产率的混合扫描FV3000混合扫描仪提供二合一扫描仪，以增强共聚焦成像能力。
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Related Videos | 精准的延时成像延时实验要求焦点一致和对样品的光毒性低。
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使用硅油物镜观察深层组织硅油的折射率与活组织的折射率接近，因此可以将球面像差降到最低，支持用户在高分辨率下观察组织内部的深层部位。
| 经透明化处理的鸡睫状神经节的3D图像。 |
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自动化类器官成像从寻找目标对象到采集高分辨率3D图像，类器官成像的工作流程可能非常耗时，尤其是在对微孔板上的多个孔进行成像时。 FV3000系统的宏观转微观模块是一个智能解决方案，可以自动化执行类器官成像工作流程，以显著提高成像效率。 FV3000显微镜以低放大倍率采集图像，然后宏观转微观软件模块可以自动在容器或孔中定位感兴趣的对象，并以高倍率采集它们。 这一自动化过程显著缩短了您在显微镜操作上花费的时间。 |
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应用技术
TruSpectral全真光谱检测与上一代的光谱检测单元相比， TruSpectral全真光谱检测技术能够呈现更为出色的结果。FV3000显微镜各通道均采用了将光谱检测器的灵活性与基于滤色片的灵敏度相结合的TruSpectral全真光谱检测技术。 |
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TruSpectral全真光谱检测技术的工作原理基于高效率的专利技术体相位全息（VPH）透射光栅，TruSpectal全真光谱检测技术配合可调狭缝可实现最低2nm的光谱检测。 | 灵敏度和准确性与传统光谱检测单元相比， FV3000系列共聚焦显微镜均配备的TruSpectral全真光谱检测技术实现更高的光通量。体相位全息透射光栅能够以比反射光栅高三倍的透射效率来衍射光线。由此最终获得出色的活组织和固定组织多色荧光显微图像。 | 更高的量子效率FV3000显微镜的高灵敏度检测器（HSD）让您能够采集到常规检测器无法检测到的微弱荧光信号。HSD单元采用两个最大量子效率45％的GaAsP检测器，并通过Pilter固体制冷技术在极低激发光下将图像背景噪声降低20％。HSD单元可配合FV3000系统实现四通道GaAsP成像。 |
 原始信号  各通道的灵敏度调整  光谱拆分 | 多达十六通道光谱TruSpectral检测TruSpectral全真光谱检测可在所有显微镜通道上独立工作，因此能够在多达四个通道上实现真正的多通道同时λ扫描。多通道λ模式有助于实现实时和实验后处理光谱拆分由此获得出色的光谱分离结果。在多达四个动态范围的条件下，可单独调节每个检测器的灵敏度实现明亮和暗淡信号的最佳分离。 |
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光谱拆分FV3000系统的光谱反卷积算法让重叠光谱能够基于来自λ序列图像的光谱信息进行分离。在实时图像采集和采集后处理过程中，可以通过拆分算法消除通道之间的荧光串扰，从而清晰分离多达16个荧光信号。 |
使用多通道λ序列图像对用YOYO-1、Alexa Fluor 488、罗丹明-鬼笔环肽和MitoTracker Red标记的PtK2细胞进行光谱拆分。 |
 血小板与小鼠血管中的血栓结合。通过配有2 CH GaAsP PMT的共振振镜以全帧30 fps拍摄的图像。 | 两种扫描振镜模块可在两种扫描单元之间选择：常规扫描振镜（FV3000）或混合的常规/共振扫描振镜（FV3000RS）。
兼顾速度和视场数很多高速扫描方法受制于成像视野，从而限制了检查多细胞大视野的能力。FV3000RS显微镜的共振扫描振镜即便在每秒30帧的视频速率下也可能保持FN 18的全视场成像，最高可实现每秒438帧采样。 |
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循环平均化降噪处理低激光功率高速扫描尽管可以大限度降低光毒性，但往往会降低信噪比，从而难以获得高分辨率的时间序列图像。通过循环平均化降噪处理，您不但可以调整快速延时图像获得更高的信噪比，同时还可保持时间分辨率并保留原始数据。 |
（右）以低激光功率采集的30 fps数据进行了循环平均化降噪处理（10帧）。 |
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 | 从宏观到微观的观察以从宏观到微观的观察方式查看数据。使用FV3000系统经过重新设计的光路，可生成低至1.25倍的详细概览图像，然后即可轻松将所观察的结构以更高倍率成像。图像拼接可以让您采集相邻视场的连续3D（XYZ）和4D（XYZT）图像。从图像采集到拼接的全过程可完全自动化，由此节省时间并生成更多重要数据。 |
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TruSight反卷积：实现更高分辨率的图像处理利用TruSight反卷积消除模糊并获得更清晰、更锐利的图像。FV3000共焦显微镜的专用cellSens算法可通过一键点击完成从采集到处理的无缝工作流程，并通过GPU处理更快地得到结果。 |  GATTA-SIM纳米尺的图像  左图：原始共焦图像/右图：使用TruSight获得的图像 |
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 0.5 AU共聚焦图像  使用cellSens高级反卷积功能反卷积的0.5 AU共聚焦图像  奥林巴斯超高分辨OSR图像，可清晰区分点状染色。 | 多达4通道同步的Olympus超高分辨率 技术（FV-OSR）适用于共定位分析的奥林巴斯超分辨率成像模块可以依次或同时以120纳米的分辨率采集四个荧光信号，分辨率几乎是传统奥林巴斯共焦显微镜的两倍。
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TruFocus时间序列成像TruFocus技术让多点实验和长时程成像更加稳定可靠。TruFocus技术使用一种具有低光毒性的红外激光（1类）识别样品平面位置，并提供两种模式保持聚焦。
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常规物镜（左）与X Line物镜（右）对比 | 使用X Line物镜实现高性能显微成像X Line物镜可提供宽范围色差校正、均匀的图像和更高的数值孔径，由此提高FV3000共聚焦显微镜的成像质量。 |
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利用硅油物镜进行深层组织观察奥林巴斯提供四款高数值孔径硅油浸物镜，使活细胞成像获得最佳的效果。
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 PLAPON60XOSC2  PLAPON60XOSC2和UPLXAPO60XO的物镜性能比较 | 超级色差校准物镜（PLAPON60XOSC2）提高共定位分析的可靠性这款油浸物镜可大限度减少405-650nm光谱波段横向和轴向色差，使您能够获取可靠的共定位图像并进行超高定位精度的测量。物镜对近红外线区域最高达850nm波长进行色差校正，使之成为定量观察成像的理想选择。
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针对电生理实验的优化配置通过触发信号I / O接口控制盒将共聚焦成像与电生理设备同步。I / O接口控制盒还可将电压信号转换为能够以与荧光图像相同方式进行处理的图像。可轻松实现在光刺激的同时利用共聚焦扫描记录电压信号图像的功能。 |
是否需要帮助？ |
软件
直观的软件FV3000软件简化了从采集到分析的整个共聚焦成像及分析工作流程。可定制且可保存的布局设置让您无论复杂程度如何，均可轻松根据工作流程和实验需求自定义界面。 |
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实时3D渲染和分析利用FV3000软件的实时3D图像渲染功能并实时查看您的数据。3D图像可在图像采集期间进行构建并以实时图像方式显示。 选配NoviSight软件可以执行3D细胞分析。该软件特别适合多孔多细胞球等标本在3D范围内进行复杂的量化分析。 |
表达Fucci的HT29细胞系球体图像 |
选配NoviSight软件可用于进行多种3D细胞分析。 |
多位点延时和微孔板成像多位点延时（MATL）模块通过对电动载物台移动的精确控制获得强大而准确的时间序列数据，让您能够生成方便查看相关数据的细节概览显微图像。将MATL模块与多孔板导航器模块配合使用，可利用不同细胞培养容器和定制微孔板的精密直观的控制实现更多功能。 |
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利用时序管理器简化实验复杂性时序管理器软件模块可轻松处理复杂的科学实验。多天时间序列实验以微秒级扫描精度和毫秒级序列执行精度进行控制。可执行各种复杂实验方案，其中包括：
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显微图像定量分析FV3000共聚焦显微镜可增加一套可选配的分析功能来完成成像工作流程并提供定量数据。
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计数和测量 |
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FRET和FRAP实验FV3000显微镜与cellSens生命科学分析模块配合使用，可轻松获取及分析FRET和FRAP实验。
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FRET分析示例（受体光漂白） | FRAP分析示例 |
比例成像和强度调节显示（IMD）FV3000的比例成像分析软件具有强度调节显示（IMD）功能，在标准速度或高速采集时，实时显示荧光定量比例图像的变化过程。该功能对于测钙和FRET成像特别有用，可以增强信号对比度。 |
 CCCP处理前*  CCCP处理后 Hela 细胞中tsGFP1-mito表达量的变化体现线粒体产热过程的蛋白质变化。 |  （左）CFP，（右）YFP FRET  （左）原始CFP / YFP比值，（右）CFP / YFP比值的IMD 心肌细胞 |
 细胞强度随时间的变化 从Bmal1：luc稳定转染ES细胞的第12天，RA诱导分化细胞的生物发光 | 目标追踪使用cellSens目标追踪模块自动检测、追踪和分析延时图像中的运动对象。追踪功能提供了强大直观的工具来量化诸如细胞移动和分裂等动态过程。 |
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远程开发（RDK）模块远程开发模块可使用Python、C ++和Matlab等语言对特定FV3000显微镜功能进行远程控制和编程。RDK模块能够发挥系统所蕴含的更大潜力，是具有编程经验用户的强大工具。 |  |
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* 虽然它已经成为医学研究中最重要的细胞系之一，但我们必须认识到Henrietta Lacks对科学的贡献是在未经她同意的情况下发生的。这一不公正现象在导致免疫学、传染病和癌症方面重大发现的同时，也引发了关于医学中的隐私、伦理和同意方面的重要对话。 |
是否需要帮助？ |
配置
选择适合您应用的配置 |
倒置显微镜
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正置显微镜（成像型配置）
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正置显微镜（电生理型配置）
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组件  FV3000 IO接口盒
 FV3000主激光耦合器和副激光耦合器
 FV3000光谱型检测器
 FV3000透射光检测器
 FV3000高灵敏度光谱检测器
软件 FV3000多区域延时软件模块
 FV3000多点和拼图软件模块
 FV3000超分辨率模块
 FV3000远程开发套件
Scanners FV3000Galvo振镜扫描单元
 FV3000混合扫描单元
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技术参数
| FV3000 | FV3000RS | ||
|---|---|---|---|
| 主激光耦合器 | 可见光激光 |
405 nm：50 mW，488 nm：20 mW，561 nm：20 mW，640 nm：40 mW
一个选配激光端口，可用于副激光耦合器或选配的激光设备 | |
| 选配激光器 | 副激光耦合器 |
最多3个激光设备，如下所述：
445 nm：75 mW，514 nm：40 mW，594 nm：20 mW，通过光纤与主激光耦合器连接 | |
| 单个激光器设备 | 445 nm：75 mW，514 nm：40 mW，或594 nm：20 mW，直接与主激光组合器连接 | ||
| 单个NIR激光器设备 | 730 nm：30 mW，785 nm：100 mW，通过选配端口与扫描器连接 | ||
| 扫描单元 | 扫描方式 | 2个镀银常规扫描振镜 |
2个镀银常规扫描振镜；
1个镀银共振扫描振镜和1个镀银常规扫描振镜 |
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常规振镜扫描单元
（常规成像） |
扫描分辨率：64 × 64像素到4096 × 4096像素
扫描速度（单向）：512 × 512，时间为1.1秒至264秒；像素时间：2微秒至1000微秒 扫描速度（双向）：512 × 512，时间为63毫秒至250毫秒；256 × 256，时间为16毫秒至125毫秒 光学变焦：1倍至50倍，增量为0.01倍 扫描旋转：自由旋转（360度），步进为0.1度 扫描模式：PT、XT、XZ、XY、XZT、XYT、XYZ、XYλ、XYZT、XYλT、XYλZ、XYλZT 感兴趣区域扫描、矩形剪裁、椭圆形、多边形、自由形状、线、自由线及点、龙卷风模式 | ||
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共振扫描单元
（高速成像） | - |
扫描分辨率：512 × 32像素到512 × 512像素
扫描速度：使用512 × 512像素时，每秒30帧，使用512 × 32像素时，每秒438帧 光学变焦：1倍至8倍，增量为0.01倍 扫描模式：XT、XZ、XY、XZT、XYT、XYZ、XYλ、XYZT、XYλT、XYZ、XYλZT 感兴趣区域扫描、矩形剪裁、线扫描 | |
| 针孔 | 单一电动针孔，针孔直径50至800 µm（步进为1 µm） | ||
| 视场直径（FN） | 18 | ||
| 分光镜转盘 | 8孔位（高性能DM和10/90分光镜） | ||
| 扫描单元可选部件 | 激光功率监控系统，选配激光端口 | ||
| 光谱检测器 | 检测器模块 | 高灵敏制冷型磷砷化镓光电倍增管或多碱光电倍增管，2通道 | |
| 光谱法 |
电动体相位全息（VPH）透射光栅，电动可调狭缝
可选波长带宽：1至100 nm，光谱检测精度：2 nm | ||
| 分光镜转盘 | 8孔位（高性能DM和分光镜） | ||
| NIR检测器 | 检测器模块 | 砷化镓光电倍增管，1通道或2通道，带滤光块 | |
| 荧光照明装置 | 外置荧光照明光源，通过光纤连接到扫描单元，共聚焦（LSM）光路和荧光观察光路之间可电动切换 | ||
| 透射光检测器装置 | 配有集成式外置透射光光电倍增检测器和LED灯，电动切换 | ||
显微镜 |
| 倒置机身 | 正置机身（成像型） | 正置机身（电生理型） | |
|---|---|---|---|
| 显微镜机身 |
电动倒置显微镜
IX83 (IX83P2ZF) |
电动固定载物台正置显微镜
BX63L |
电动固定载物台正置显微镜
BX63L |
| 物镜转换器 | 电动六孔转换器 | 电动六孔转换器 |
编码摇摆式物镜转换器
编码滑入式物镜转换器 |
| 聚光镜 | 电动长工作距离聚光镜 | 电动万能聚光镜 | 手动长工作距离聚光镜 |
| 调焦行程 |
内置电动物镜转换器聚焦
行程：Z轴精度为0.01 μm | ||
软件 |
| 基本特点 |
专为暗室环境设计的图形化用户界面（GUI）。 用户可设置界面。
采集参数重载功能。 硬盘记录功能。在Z轴序列图像采集过程中自动调节激光的功率和电压（HV）。 Z轴序列图像的ɑ混合、最大强度投影和等值面渲染等多种重构方法。 |
|---|---|
| 2D图像显示 | 每个图像的显示：单通道并列、合并、裁剪、实时图像拼接、实时平铺、系列（Z/T/λ），LUT：单独色彩设置、伪彩色备注：图形及文本输入。 |
| 3D可视化及观察 |
交互式体渲染：体渲染显示、投影显示、动画显示。
3D动画（最大强度投影，ɑ混合），3D和2D序列操作功能。 |
| 图像格式 |
OIR图像格式
8/16位灰度/索引颜色、24/32/48位色彩、JPEG/BMP/TIFF图像功能、奥林巴斯的专用multi-tif格式。 |
| 光谱拆分 | 荧光光谱拆分模式（最多16个通道） |
| 图像分析 | 区域和线的测量、基于时间/Z轴的强度图、共定位分析。 |
| 统计处理 | 2D数据直方图显示。 |
| 可选软件 | 电动载物台控制 |
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