Vue d’ensemble

	FLUOVIEW nouvelle génération pour les prochaines révolutions scientifiques La série FLUOVIEW FV3000 de microscopes à balayage laser confocaux est conçue pour relever certains des défis les plus difficiles de la science moderne. Doté de la sensibilité et de la vitesse élevées requises pour l’imagerie cellulaire en temps réel ainsi que pour l’observation des tissus profonds, le microscope confocal FV3000 permet une large gamme de modalités d’imagerie, notamment l’imagerie macro-micro, la microscopie en très haute résolution et l’analyse de données quantitatives. This product has been discontinued, check out our current product

FLUOVIEW nouvelle génération pour les prochaines révolutions scientifiques

La série FLUOVIEW FV3000 de microscopes à balayage laser confocaux est conçue pour relever certains des défis les plus difficiles de la science moderne. Doté de la sensibilité et de la vitesse élevées requises pour l’imagerie cellulaire en temps réel ainsi que pour l’observation des tissus profonds, le microscope confocal FV3000 permet une large gamme de modalités d’imagerie, notamment l’imagerie macro-micro, la microscopie en très haute résolution et l’analyse de données quantitatives.

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Multiplexage d’images à sensibilité élevée de l’UV au proche infrarouge

En s’appuyant sur une technologie de détection spectrale brevetée, les détecteurs TruSpectral du microscope confocal FV3000 associent une sensibilité élevée et une grande souplesse spectrale, afin de détecter tous les fluorophores, même les plus faibles.

Grâce à la mise en œuvre d’un réseau de diffraction holographique de phase volumique (VPH), la technologie TruSpectral permet de transmettre trois fois plus de lumière qu’avec la technologie de détection spectrale traditionnelle.
Fournit des canaux ajustables indépendamment les uns des autres pour optimiser la détection du signal de chaque fluorophore. Le mode à filtre d’arrêt variable assure une acquisition d’image simultanée sur quatre canaux et jusqu’à seize canaux en mode séquentiel.
Le mode de balayage lambda permet une déconvolution spectrale précise des signaux fluorescents complexes et imbriqués.

Grâce à une série de mises à niveau soigneusement conçues, les capacités de détection dépendantes de la longueur d’onde pour le proche infrarouge de notre nouvelle solution proche infrarouge FV3000 Red sont encore plus performantes que celles du microscope FV3000 puisque celle-ci est capable de détecter des longueurs d’onde de 890 nm :

Des lasers 730 nm ou 785 nm et des détecteurs GaAs à 1 canal ou 2 canaux sensibles au proche infrarouge permettent d’activer jusqu’à 6 canaux en vue d’acquérir une imagerie par multiplexage, de l’UV au proche infrarouge (400-890 nm).
La technologie TruFocus Red permet de réaliser une capture d’imagerie séquentielle stable et en douceur en proche infrarouge.
Les objectifs X Line disposent de la plus grande plage de correction chromatique, de 400 nm à 1000 nm, pour un rendu des couleurs exceptionnel lors d’une imagerie de fluorescence multicolore.

(a)(b)

_{(a) Cortex préfrontal interne de souris avec marquage à la GFAP (glial fibrillary acidic protein, marqueur d’astrocytes, jaune), CaMKII (calmodulin-dependent protein kinase II, marqueur de neurones pyramidaux, rouge), AMIGO-1 (amphoterin-induced protein 1 precursor, marqueur de membranes neuronales, cyan), PV (parvalbumine, marqueur de neurones inhibiteurs, violet), AnkG (ankyrine-G, marqueur de segments initiaux des axones, vert)
et le colorant Nuclear Yellow (marqueur nucléaire, bleu).

Données d’images reproduites avec l’aimable autorisation de Stephanie Shiers, doctorante, et Theodore J. Price, docteur, Price Lab, professeur Eugene McDermott, directeur, Center for Advanced Pain Studies, Department of Neurobiology, School of Behavioral and Brain Sciences, Université du Texas à Dallas.

(b) Lame d’un cerveau de rat marqué au colorant Hoescht (bleu), à l’anti-IBA1 (Alexa Fluor 488 ; vert), à l’anti-MAP2 (Alexa Fluor 594, jaune), à l’anti-FOX3/NeuN (Alexa Fluor 647 ; rouge) et à l’anti-MBP (Alexa Fluor 750 ; cyan). Ces images ont été acquises grâce à un objectif UPLXAPO10X et à des détecteurs GaAsP et GaAs utilisés sur des lignes laser de
405 nm, 488 nm, 561 nm et 730 nm. Projection d’intensité maximale sur le plan Z avec le traitement de déconvolution TruSight.

Échantillon reproduit avec l’aimable autorisation de EnCor Biotechnology.}

Imagerie macro-micro et microscopie à très haute résolution

La procédure « macro-micro » du microscope FV3000 offre une feuille de route pour l’acquisition de données. Ainsi, vous pouvez observer les données dans leur contexte et localiser aisément des régions d’intérêt à étudier en plus haute résolution.

Utilisez un objectif à faible grossissement 1,25X ou 2X pour cartographier rapidement des échantillons entiers avec un grand champ de vision.
Identifiez les régions d’intérêt sur la carte globale, puis passez à un objectif à plus gros grossissement pour une imagerie confocale dont la résolution peut atteindre 120 nm avec la technologie Olympus Super Resolution (FV-OSR).
Finalisez votre acquisition et obtenez des images microscopiques prêtes à être publiées avec le traitement de l’image TruSight.

Imagerie macro à micro et microscopie Super Resolution

Hémisection d’un cerveau de souris préparée pour microscopie par dilatation (avant dilatation), marquée par des anticorps secondaires anti-GFP (Alexa Fluor 488, vert), anti-SV2 (Alexa Fluor 565, rouge) et anti-Homer (Alexa Fluor 647, bleu).
Échantillon gracieusement fourni par Ed Boyden et Fei Chen, MIT.

Imagerie macro à micro et microscopie Super Resolution

Dendrite (anti-GFP Alexa Fluor 488, vert) et marqueur synaptique (SV2, Alexa Fluor 565, rouge). Image Olympus Super Resolution traitée avec la déconvolution itérative contrainte avancée cellSens. Mesures moyennes sur toute la largeur à moitié du maximum ~135 nm. Image prise avec un objectif silicone 100X, ON 1,35.
Échantillon gracieusement fourni par Ed Boyden et Fei Chen, MIT.

Balayage hybride pour une imagerie plus rapide et plus de productivité Le scanner hybride FV3000 offre deux scanners en un et améliore les performances d’imagerie confocale. Le scanner hybride FV3000RS associe un scanner galvanométrique pour le balayage de précision et un scanner à résonance, ce qui le rend idéal pour l’imagerie à grande vitesse et en direct de phénomènes physiologiques. Capturez des images à une cadence vidéo et avec un grand champ de vision grâce au scanner à résonance, qui offre des vitesses atteignant 30 images par seconde (i/s) à FN 18 et jusqu’à 438 i/s en utilisant le mode Clip Scanning qui réduit la taille de la ROI. Utilisez le scanner à résonance pour observer les phénomènes rapides, par exemple un cœur qui bat, la circulation sanguine ou les flux calciques (Ca2+) intracellulaires. Alternez entre le scanner galvanométrique et le scanner à résonance en un clic. En savoir plus	Related Videos

Balayage hybride pour une imagerie plus rapide et plus de productivité

Le scanner hybride FV3000 offre deux scanners en un et améliore les performances d’imagerie confocale.

Le scanner hybride FV3000RS associe un scanner galvanométrique pour le balayage de précision et un scanner à résonance, ce qui le rend idéal pour l’imagerie à grande vitesse et en direct de phénomènes physiologiques.
Capturez des images à une cadence vidéo et avec un grand champ de vision grâce au scanner à résonance, qui offre des vitesses atteignant 30 images par seconde (i/s) à FN 18 et jusqu’à 438 i/s en utilisant le mode Clip Scanning qui réduit la taille de la ROI.
Utilisez le scanner à résonance pour observer les phénomènes rapides, par exemple un cœur qui bat, la circulation sanguine ou les flux calciques (Ca2+) intracellulaires.
Alternez entre le scanner galvanométrique et le scanner à résonance en un clic.

Related Videos	Imagerie séquentielle précise Les expériences séquentielles nécessitent une mise au point constante et une faible phototoxicité pour l’échantillon. L’unité TruFocus d’Olympus aide à maintenir la mise au point pendant l’imagerie de cellules vivantes, malgré les variations de température ou l’ajout de réactifs. Le détecteur haute sensibilité du microscope FV3000 requiert bien moins de puissance laser, tandis que le scanner à résonance réduit le temps d’éclairage au laser. La phototoxicité est ainsi limitée, pour des données d’imagerie confocale plus fiables sur le plan physiologique. En savoir plus

Imagerie séquentielle précise

Les expériences séquentielles nécessitent une mise au point constante et une faible phototoxicité pour l’échantillon.

L’unité TruFocus d’Olympus aide à maintenir la mise au point pendant l’imagerie de cellules vivantes, malgré les variations de température ou l’ajout de réactifs.
Le détecteur haute sensibilité du microscope FV3000 requiert bien moins de puissance laser, tandis que le scanner à résonance réduit le temps d’éclairage au laser. La phototoxicité est ainsi limitée, pour des données d’imagerie confocale plus fiables sur le plan physiologique.

Observation des tissus profonds avec les objectifs à immersion L’indice de réfraction de l’huile de silicone est proche de celui d’un tissu vivant, ce qui permet d’effectuer des observations haute résolution profondément à l’intérieur d’un tissu avec une très faible aberration sphérique. La correspondance d’indice de réfraction offre un volume focal idéal, avec à la clé une reconstruction volumique parfaite et la possibilité de réaliser une imagerie confocale haute résolution de grands organismes vivants. Les longues distances de travail offrent une imagerie microscopique détaillée en profondeur. Découvrez les données en temps réel et observez aisément des structures avec le logiciel de reconstruction 3D. En savoir plus	_{Image 3D d’un ganglion ciliaire de poussin clarifié à l’aide d’un réactif de clarification. Données d’images reproduites avec l’aimable autorisation de Ryo Egawa. École supérieure des sciences de la vie, Université de Tohoku.}

Observation des tissus profonds avec les objectifs à immersion

L’indice de réfraction de l’huile de silicone est proche de celui d’un tissu vivant, ce qui permet d’effectuer des observations haute résolution profondément à l’intérieur d’un tissu avec une très faible aberration sphérique.

La correspondance d’indice de réfraction offre un volume focal idéal, avec à la clé une reconstruction volumique parfaite et la possibilité de réaliser une imagerie confocale haute résolution de grands organismes vivants.
Les longues distances de travail offrent une imagerie microscopique détaillée en profondeur.
Découvrez les données en temps réel et observez aisément des structures avec le logiciel de reconstruction 3D.

_{Image 3D d’un ganglion ciliaire de poussin clarifié à l’aide d’un réactif de clarification.

Données d’images reproduites avec l’aimable autorisation de Ryo Egawa. École supérieure des sciences de la vie, Université de Tohoku.}

Imagerie automatisée d’organoïdes

De la recherche des objets cibles à la prise d’images 3D en haute résolution, la procédure d’imagerie des organoïdes peut prendre beaucoup de temps, en particulier lorsque plusieurs puits d’une microplaque sont impliqués. Le module Macro-micro du système FV3000 est une solution intelligente qui automatise le flux de travail d’imagerie des organoïdes pour améliorer considérablement l’efficacité de l’imagerie.

Le microscope FV3000 prend des images à faible grossissement, puis le logiciel Macro-micro peut localiser automatiquement vos objets d’intérêt dans le récipient ou le puits et prendre des images à fort grossissement. Ce processus automatisé réduit considérablement le temps que vous consacrez à l’utilisation du microscope.

Imagerie macro-micro automatisée

Technologies appliquées

Détection TruSpectral

La technologie de détection révolutionnaire TruSpectral offre des résultats exceptionnels par rapport aux détecteurs spectraux des générations précédentes. Intégrée sur chaque canal du microscope FV3000, la technologie de détection TruSpectral associe la souplesse d’un détecteur spectral et la sensibilité d’un détecteur à filtre.

Sensibilité et précision

Efficacité quantique renforcée

Principe de la technologie de détection TruSpectral

Basée sur la technique de transmission holographique de phase volumique (VPH) pour plus d’efficacité, la détection TruSpectral utilise une fente ajustable pour sélectionner les longueurs d’onde de détection de chaque canal à 2 nm.

Sensibilité et précision

Intégrée à tous les microscopes confocaux FV3000, la technologie de détection TruSpectral offre un rendement lumineux largement supérieur à celui des unités de détection spectrale traditionnelles. L’efficacité de la diffraction holographique en phase volumique est jusqu’à trois fois supérieure à celle des réseaux en réflexion. L’utilisateur bénéficie ainsi d’images de microscopie en fluorescence d’excellente qualité pour les échantillons vivants et fixés avec plusieurs fluorochromes.

Efficacité quantique renforcée

Le détecteur haute sensibilité (HSD) du microscope FV3000 permet d’examiner des échantillons dont l’émission est trop faible pour être détectée par un système conventionnel. Le HSD incorpore deux canaux GaAsP avec une efficacité quantique maximale de 45 % et un refroidissement par effet Peltier qui réduit le bruit de fond de 20 % pour les images à rapport signal sur bruit (S/B) élevé sous une lumière d’excitation très faible. Deux HSD peuvent être associés pour une imagerie GaAsP à quatre canaux avec le système FV3000.

. ,	Détection TruSpectral multicanale avec déconvolution à seize canaux La détection TruSpectral fonctionne de manière indépendante sur tous les canaux du microscope, pour un véritable balayage lambda multicanal en simultané sur un maximum de quatre canaux. Le mode lambda multicanal facilite la déconvolution spectrale en direct et en post-traitement, pour d’excellents résultats de séparation spectrale. Avec jusqu’à quatre plages dynamiques, les signaux intenses et faibles peuvent être séparés de façon optimale en ajustant séparément la sensibilité de chaque détecteur.

Ajustement de la sensibilité de chaque canal

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Détection TruSpectral multicanale avec déconvolution à seize canaux

La détection TruSpectral fonctionne de manière indépendante sur tous les canaux du microscope, pour un véritable balayage lambda multicanal en simultané sur un maximum de quatre canaux. Le mode lambda multicanal facilite la déconvolution spectrale en direct et en post-traitement, pour d’excellents résultats de séparation spectrale. Avec jusqu’à quatre plages dynamiques, les signaux intenses et faibles peuvent être séparés de façon optimale en ajustant séparément la sensibilité de chaque détecteur.

Déconvolution spectrale

L’algorithme de déconvolution spectrale du système FV3000 permet de séparer les spectres qui se chevauchent à partir des informations spectrales des images de la pile lambda. Les interférences de fluorescence entre les canaux peuvent être éliminées par l’algorithme de déconvolution pendant l’acquisition d’images en direct et le post-traitement, pour une séparation nette de jusqu’à seize fluorophores.

Déconvolution spectrale

Déconvolution spectrale multicanal d’une cellule PtK2 marquée avec YOYO-1, Alexa Fluor 488, rhodamine-phalloïdine et MitoTracker Red à l’aide d’images de la pile lambda

. , Plaquettes agrégées sur une thrombose dans un vaisseau sanguin de souris. Images prises à 30 ips en plein écran par un scanner résonant avec 2 canaux à photomultiplicateur GaAsP. Données d’images offertes par D^r Takuya Hiratsuka et D^r Michiyuki Matsuda, Graduate School of Biostudies, université de Kyoto.	Options à deux scanners Faites votre choix parmi deux systèmes de balayage : un scanner galvanométrique traditionnel (FV3000) ou un scanner hybride galvanométrique/résonant (FV3000RS). Avec le scanner galvanométrique et la technologie Olympus Super Résolution (FV-OSR), vous pourrez obtenir une résolution de 120 nm avec un rapport signal sur bruit élevé. L’unité galvanométrique offre des options de balayage flexibles, notamment un balayage en mode tornade précis et une stimulation multipoint avec un temps de commutation de 100 ms. L’unité de balayage hybride comprend un scanner galvanométrique qui assure un balayage haute précision, ainsi qu’un scanner résonant pour l’imagerie à grande vitesse. Le scanner résonant permet de capturer 30 images par seconde avec un champ de vision complet à 512 × 512 pixels, ou jusqu’à 438 images par seconde en rétrécissant l’axe Y pour capturer en direct des phénomènes physiologiques cruciaux, comme le flux calcique. Aucun compromis entre rapidité et champ d’observation De nombreuses méthodes de balayage haute vitesse limitent le champ d’observation, et donc votre capacité à examiner de grandes zones avec plusieurs cellules. Le scanner résonant intégré au microscope FV3000RS maintient un champ d’observation 1X complet avec un FN18, même à une fréquence de 30 images par seconde. Le rétrécissement de l’axe Y permet d’atteindre jusqu’à 438 images par seconde.

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Plaquettes agrégées sur une thrombose dans un vaisseau sanguin de souris. Images prises à 30 ips en plein écran par un scanner résonant avec 2 canaux à photomultiplicateur GaAsP.
Données d’images offertes par D^r Takuya Hiratsuka et D^r Michiyuki Matsuda, Graduate School of Biostudies, université de Kyoto.

Options à deux scanners

Faites votre choix parmi deux systèmes de balayage : un scanner galvanométrique traditionnel (FV3000) ou un scanner hybride galvanométrique/résonant (FV3000RS).

Avec le scanner galvanométrique et la technologie Olympus Super Résolution (FV-OSR), vous pourrez obtenir une résolution de 120 nm avec un rapport signal sur bruit élevé.
L’unité galvanométrique offre des options de balayage flexibles, notamment un balayage en mode tornade précis et une stimulation multipoint avec un temps de commutation de 100 ms.
L’unité de balayage hybride comprend un scanner galvanométrique qui assure un balayage haute précision, ainsi qu’un scanner résonant pour l’imagerie à grande vitesse.
Le scanner résonant permet de capturer 30 images par seconde avec un champ de vision complet à 512 × 512 pixels, ou jusqu’à 438 images par seconde en rétrécissant l’axe Y pour capturer en direct des phénomènes physiologiques cruciaux, comme le flux calcique.

Aucun compromis entre rapidité et champ d’observation

De nombreuses méthodes de balayage haute vitesse limitent le champ d’observation, et donc votre capacité à examiner de grandes zones avec plusieurs cellules. Le scanner résonant intégré au microscope FV3000RS maintient un champ d’observation 1X complet avec un FN18, même à une fréquence de 30 images par seconde. Le rétrécissement de l’axe Y permet d’atteindre jusqu’à 438 images par seconde.

Calcul de la moyenne glissante Le balayage haute vitesse avec un laser de faible puissance permet de limiter la phototoxicité, mais cette procédure diminue le plus souvent le rapport signal sur bruit, ce qui complique l’obtention d’images intermittentes haute résolution. Avec le traitement de moyenne glissante, vous pouvez ajuster les images intermittentes haute vitesse pour obtenir un meilleur rapport signal sur bruit tout en préservant l’échelle de temps et les données d’origine.	À gauche : Données brutes acquises à 30 ips avec un laser de faible puissance (0,05 %, 488 nm). À droite : Calcul de la moyenne glissante (10 images) sur des données acquises à 30 ips avec un laser de faible puissance.

Calcul de la moyenne glissante

Le balayage haute vitesse avec un laser de faible puissance permet de limiter la phototoxicité, mais cette procédure diminue le plus souvent le rapport signal sur bruit, ce qui complique l’obtention d’images intermittentes haute résolution. Avec le traitement de moyenne glissante, vous pouvez ajuster les images intermittentes haute vitesse pour obtenir un meilleur rapport signal sur bruit tout en préservant l’échelle de temps et les données d’origine.

Calcul de la moyenne glissante

À gauche : Données brutes acquises à 30 ips avec un laser de faible puissance (0,05 %, 488 nm).
À droite : Calcul de la moyenne glissante (10 images) sur des données acquises à 30 ips avec un laser de faible puissance.

	Passage de « macro à micro » Étudiez les données dans leur contexte grâce au passage de « macro à micro ». Avec la trajectoire optique repensée du système FV3000, générez des images globales détaillées avec un niveau de grossissement faible de 1,25X, puis identifiez aisément les structures à examiner à un grossissement supérieur. L’imagerie en mosaïque permet d’acquérir des images continues 3D (XYZ) et 4D (XYZT) de champs d’observation adjacents. La procédure complète, de l’acquisition d’image à l’assemblage, peut être entièrement automatisée, afin de gagner du temps et de générer davantage de données significatives.

Passage de « macro à micro »

Étudiez les données dans leur contexte grâce au passage de « macro à micro ». Avec la trajectoire optique repensée du système FV3000, générez des images globales détaillées avec un niveau de grossissement faible de 1,25X, puis identifiez aisément les structures à examiner à un grossissement supérieur. L’imagerie en mosaïque permet d’acquérir des images continues 3D (XYZ) et 4D (XYZT) de champs d’observation adjacents. La procédure complète, de l’acquisition d’image à l’assemblage, peut être entièrement automatisée, afin de gagner du temps et de générer davantage de données significatives.

Déconvolution TruSight : traitement des images pour une résolution supérieure Supprimez tout flou et obtenez des images plus claires et plus nettes avec la déconvolution TruSight. Les algorithmes cellSens dédiés pour le microscope confocal FV3000 permettent de bénéficier d’un flux de travail fluide, de l’acquisition jusqu’à la publication en un clic. Profitez du traitement par GPU pour obtenir encore plus rapidement des résultats.	Gauche : image confocale brute / Droite : image avec TruSight . ,

Déconvolution TruSight : traitement des images pour une résolution supérieure

Supprimez tout flou et obtenez des images plus claires et plus nettes avec la déconvolution TruSight. Les algorithmes cellSens dédiés pour le microscope confocal FV3000 permettent de bénéficier d’un flux de travail fluide, de l’acquisition jusqu’à la publication en un clic. Profitez du traitement par GPU pour obtenir encore plus rapidement des résultats.

Gauche : image confocale brute / Droite : image avec TruSight

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. ,	Technologie Super Resolution d’Olympus (FV-OSR) avec jusqu’à quatre canaux simultanés Idéal pour l’analyse de colocalisation, le module d’imagerie Super Resolution d’Olympus peut acquérir quatre signaux fluorescents soit successivement, soit simultanément, avec une résolution d’environ 120 nm, doublant ainsi la résolution d’une microscopie confocale typique. Aucun fluorophore spécial requis, compatible avec une large gamme d’échantillons Facilité d’utilisation nécessitant peu de formation Microscopie à très haute résolution obtenue par l’ajout de la technologie FV-OSR à un système de microscope confocal FV3000 En savoir plus sur le module logiciel de Super Résolution FV3000

Image confocale 0,5 AU déconvoluée avec la déconvolution avancée cellSens

Olympus Super Résolution et déconvolution avancée cellSens. Noter la séparation nette des colorations ponctuées avec OSR.

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Technologie Super Resolution d’Olympus (FV-OSR) avec jusqu’à quatre canaux simultanés

Idéal pour l’analyse de colocalisation, le module d’imagerie Super Resolution d’Olympus peut acquérir quatre signaux fluorescents soit successivement, soit simultanément, avec une résolution d’environ 120 nm, doublant ainsi la résolution d’une microscopie confocale typique.

Aucun fluorophore spécial requis, compatible avec une large gamme d’échantillons
Facilité d’utilisation nécessitant peu de formation
Microscopie à très haute résolution obtenue par l’ajout de la technologie FV-OSR à un système de microscope confocal FV3000

En savoir plus sur le module logiciel de Super Résolution FV3000

Imagerie par intermittence TruFocus La technologie TruFocus permet de renforcer la fiabilité et la précision des expériences à position multiples et de l’imagerie par intermittence longue durée. La technologie TruFocus utilise un laser infrarouge à faible phototoxicité (classe 1) pour identifier la position du plan de l’échantillon et offre deux modes de maintien de la mise au point. Le mode de mise au point automatique (AF) à une seule acquisition permet de définir plusieurs positions de mise au point, pour une acquisition efficace de la pile Z dans les expériences à positions multiples. Le mode AF continu fonctionne en continu pour maintenir la mise au point sur le plan d’observation désiré. Il est idéal pour les mesures par intermittence, car il permet d’éviter toute dérive de la mise au point liée à une variation de température ou à l’ajout de réactifs. TruFocus est compatible avec une large gamme de conditions d’imagerie confocale, notamment les objectifs secs, les récipients en plastique et les objectifs à immersion.	Related Videos

Imagerie par intermittence TruFocus

La technologie TruFocus permet de renforcer la fiabilité et la précision des expériences à position multiples et de l’imagerie par intermittence longue durée. La technologie TruFocus utilise un laser infrarouge à faible phototoxicité (classe 1) pour identifier la position du plan de l’échantillon et offre deux modes de maintien de la mise au point.

Le mode de mise au point automatique (AF) à une seule acquisition permet de définir plusieurs positions de mise au point, pour une acquisition efficace de la pile Z dans les expériences à positions multiples.
Le mode AF continu fonctionne en continu pour maintenir la mise au point sur le plan d’observation désiré. Il est idéal pour les mesures par intermittence, car il permet d’éviter toute dérive de la mise au point liée à une variation de température ou à l’ajout de réactifs.
TruFocus est compatible avec une large gamme de conditions d’imagerie confocale, notamment les objectifs secs, les récipients en plastique et les objectifs à immersion.

Comparaison d'objectifs conventionnels (à gauche) avec les objectifs X Line (à droite)	Imagerie microscopique haute performance avec objectifs X Line Avec une correction étendue de l’aberration chromatique, une grande uniformité d’image et une ouverture numérique importante, les objectifs X Line améliorent la qualité d’image du microscope confocal FV3000. En savoir plus

Comparaison d'objectifs conventionnels (à gauche) avec les objectifs X Line (à droite)

Imagerie microscopique haute performance avec objectifs X Line

Avec une correction étendue de l’aberration chromatique, une grande uniformité d’image et une ouverture numérique importante, les objectifs X Line améliorent la qualité d’image du microscope confocal FV3000.

Observation des tissus profonds avec les objectifs à immersion dans l’huile de silicone

Olympus propose quatre objectifs à immersion dans l’huile de silicone et à grande ouverture numérique dont les performances sont excellentes pour l’imagerie de cellules vivantes.

L’indice de réfraction de l’huile de silicone (n ≈ 1,40) est proche de celui d’un tissu vivant (n ≈ 1,38), ce qui permet d’effectuer des observations haute résolution profondément à l’intérieur d’un tissu vivant avec une très faible aberration sphérique.
L’huile de silicone ne sèche pas et ne durcit pas ; il n’est donc pas nécessaire de faire le plein d’huile pendant les observations par intermittence de longue durée.

. ,	Renforcez la fiabilité de vos analyses de colocalisation avec un objectif à faible aberration chromatique (PLAPON60XOSC2) L’objectif à immersion dans l’huile limite les aberrations chromatiques latérales et axiales dans le spectre 405–650 nm, afin de vous permettre d’acquérir des images de colocalisation fiables et de mesurer des objets avec une grande précision de positionnement. L’objectif compense également l’aberration chromatique en proche-infrarouge (jusqu’à 850 nm) ; il est donc idéal pour la microscopie quantitative. Grossissement : 60X ON : 1,4 (immersion dans l’huile) Distance de travail : 0,12 mm Plage de compensation de l’aberration chromatique : 405–650 nm Données optiques fournies pour chaque objectif

Comparaison des performances des objectifs PLAPON60XOSC2 et UPLXAPO60XO

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Renforcez la fiabilité de vos analyses de colocalisation avec un objectif à faible aberration chromatique (PLAPON60XOSC2)

L’objectif à immersion dans l’huile limite les aberrations chromatiques latérales et axiales dans le spectre 405–650 nm, afin de vous permettre d’acquérir des images de colocalisation fiables et de mesurer des objets avec une grande précision de positionnement. L’objectif compense également l’aberration chromatique en proche-infrarouge (jusqu’à 850 nm) ; il est donc idéal pour la microscopie quantitative.

Grossissement : 60X
ON : 1,4 (immersion dans l’huile)
Distance de travail : 0,12 mm
Plage de compensation de l’aberration chromatique : 405–650 nm
Données optiques fournies pour chaque objectif

Configurations optimisées pour les expériences électrophysiologiques

Synchronisez votre imagerie confocale avec vos équipements d’électrophysiologie au moyen de la boîte d’interface E/S à signal déclencheur. La boîte d’interface E/S convertit également les signaux de tension en images pouvant être traitées de la même manière que les images de fluorescence. Cela permet de capturer des images sous forme de tension de façon synchrone avec la photostimulation par le scanner confocal.

En savoir plus sur la boîte d’interface E/S

Logiciel

Logiciel intuitif Le logiciel FV3000 rationalise l’ensemble du flux de tâches de l’imagerie confocale, de l’acquisition jusqu’à l’analyse. La mise en page personnalisable et enregistrable permet d’adapter aisément l’interface pour répondre aux besoins de votre flux de tâches et de vos expériences, quelle qu’en soit la complexité.

Logiciel intuitif

Le logiciel FV3000 rationalise l’ensemble du flux de tâches de l’imagerie confocale, de l’acquisition jusqu’à l’analyse. La mise en page personnalisable et enregistrable permet d’adapter aisément l’interface pour répondre aux besoins de votre flux de tâches et de vos expériences, quelle qu’en soit la complexité.

Logiciel intuitif

Rendu 3D en direct et analyse

Observez vos résultats en temps réel grâce à la fonction d’affichage d’image 3D en direct du logiciel FV3000. Les images 3D peuvent être générées pendant leur acquisition, puis affichées en temps réel.

Une analyse cellulaire 3D supplémentaire peut être effectuée à l’aide du logiciel NoviSight offert en option. Profitez des puissantes fonctions pour la quantification de cellules sphéroïdes ou d’autres objets 3D dans les expériences sur plaque à puits.

Sphéroïde de cellules HT29 induit avec rapporteurs Fucci

Sphéroïde de cellules HT29 induit avec rapporteurs Fucci.
Données d’images reproduites avec l’aimable autorisation de Yuji Mishima, Ph.D., Kiyohiko Hatake M.D., Ph.D., chimiothérapie clinique, centre d’oncologie et de chimiothérapie, Fondation japonaise pour la recherche sur le cancer.

Sphéroïde de cellules HT29 induit avec rapporteurs Fucci

Sphéroïde de cellules HT29 induit avec rapporteurs Fucci.

Imagerie sur microplaque et imagerie par intermittence multizone Le module d’imagerie par intermittence multizone (MATL) offre des données par intermittence fiables et précises, grâce à un contrôle précis des mouvements de la platine motorisée. Vous pouvez ainsi générer des vues d’ensemble détaillées au microscope pour voir les données dans leur contexte. Associez le module MATL au module navigateur de puits pour renforcer encore davantage les fonctionnalités, avec des commandes intuitives et sophistiquées pour une large gamme de récipients de culture cellulaire et de microplaques sur mesure.

Imagerie sur microplaque et imagerie par intermittence multizone

Le module d’imagerie par intermittence multizone (MATL) offre des données par intermittence fiables et précises, grâce à un contrôle précis des mouvements de la platine motorisée. Vous pouvez ainsi générer des vues d’ensemble détaillées au microscope pour voir les données dans leur contexte. Associez le module MATL au module navigateur de puits pour renforcer encore davantage les fonctionnalités, avec des commandes intuitives et sophistiquées pour une large gamme de récipients de culture cellulaire et de microplaques sur mesure.

Imagerie sur microplaque et imagerie par intermittence multizone

Complexité réduite grâce au gestionnaire de séquence

Le module logiciel de gestion de séquence prend aisément en charge les protocoles les plus complexes. Les expériences par intermittence sur plusieurs jours sont contrôlées avec une précision de l’ordre de la microseconde au niveau du balayage et de l’ordre de la milliseconde pour l’exécution de la séquence. Différents protocoles complexes peuvent être exécutés, notamment :

Commutation entre un grossissement faible et élevé
Expériences à intermittence avec intervalle variable
Photostimulation entre deux imageries par FRAP ou FRET (photoblanchiment de l’accepteur)

Complexité réduite grâce au gestionnaire de séquence

Analyse d’images microscopiques quantitatives

Le microscope confocal FV3000 incorpore une suite de fonctions d’analyse facultatives pour compléter votre procédure d’imagerie et générer des données quantitatives.

Dénombrement et mesures : calculez le nombre, la taille, la luminosité et la morphologie des segments cellulaires
Colocalisation : analysez des spectres de fluorescence superposés

Dénombrement et mesures

Dénombrement et mesures
Échantillon reproduit avec l’aimable autorisation de : Hidetaka Kosako, Fujii Memorial Institute of Medical Sciences, université de Tokushima

Colocalisation

Expériences FRET et FRAP

Le microscope FV3000 associé au module d’analyse cellSens Life Science facilite l’acquisition et l’analyse des expériences FRET et FRAP.

FRAP : estimez la fraction τ/2 et la fraction mobile/immobile en ajustant la courbe de variation de luminosité provoquée par la récupération de fluorescence après blanchiment
FRET : mesurez l’efficacité FRET par photoblanchiment de l’accepteur, imagerie ratiométrique et émissions sensibilisées

Exemple d’analyse FRET (photoblanchiment de l’accepteur)

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Exemple d’analyse FRET (photoblanchiment de l’accepteur)

Exemple d’analyse FRAP

Imagerie ratiométrique et affichage à modulation de l’intensité (IMD)

Le logiciel d’analyse d’imagerie ratiométrique du microscope FV3000 comprend une fonction d’affichage à modulation de l’intensité (IMD), qui affiche les variations du rapport de fluorescence quantitative pendant les acquisitions standard et grande vitesse. Cette fonction est particulièrement utile pour l’imagerie calcique et FRET quand un affichage strictement ratiométrique présente un contraste faible en arrière-plan.

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tsGFP1-mito révèle une hétérogénéité lors de la thermogenèse mitochondriale dans des cellules HeLa.
Images du rapport (ex 405 nm/ex 488 nm) dans les cellules exprimant tsGFP1-mito avant et après le traitement CCCP à 37 °C (98,6 °F). Les échelles indiquent 10 µm (image complète) et 3 µm (encart).
Données d’images fournies avec l’aimable autorisation de Shigeki Kiyonaka, Ph.D. et Yasuo Mori, Ph.D, Molecular Biology Field, Department of Synthetic Chemistry and Biological Chemistry, Kyoto University.

(Gauche) Rapport CFP/YFP brut, (Droite) IMD du rapport CFP/YFP

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Cardiomyocyte
Données d’images offertes par Yusuke Niino et Atsushi Miyawaki, Cell Function Dynamics, Brain Science Institute de RIKEN.

. , Bioluminescence de cellules souches embryonnaires en cours de différenciation induite par AR au jour 12 après transfection stable avec Bmal1:luc Données d’images offertes par : Kazuhiro Yagita, M.D. Ph.D. Department of Physiology and Systems Bioscience, Kyoto Prefectural University of Medicine Référence : Proc Natl Acad Sci U S A. 107(8): 3846–3851 (2010)	Suivi d’objet Détectez, suivez et analysez automatiquement les objets en mouvement dans les images à intermittence à l’aide du module cellSens Object Tracking. La fonction de suivi offre un outil puissant et intuitif pour quantifier les processus dynamiques, comme les déplacements et divisions cellulaires.

Modification de l’intensité cellulaire en fonction du temps

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Bioluminescence de cellules souches embryonnaires en cours de différenciation induite par AR au jour 12 après transfection stable avec Bmal1:luc
Données d’images offertes par : Kazuhiro Yagita, M.D. Ph.D. Department of Physiology and Systems Bioscience, Kyoto Prefectural University of Medicine
Référence : Proc Natl Acad Sci U S A. 107(8): 3846–3851 (2010)

Suivi d’objet

Détectez, suivez et analysez automatiquement les objets en mouvement dans les images à intermittence à l’aide du module cellSens Object Tracking. La fonction de suivi offre un outil puissant et intuitif pour quantifier les processus dynamiques, comme les déplacements et divisions cellulaires.

Module de trousse de développement à distance (RDK) La trousse de développement à distance permet la commande et la programmation à distance de certaines fonctions du microscope FV3000 dans des langages comme Python, C++ et Matlab. Le module RDK est un outil puissant pour les utilisateurs ayant de l’expérience en programmation, qui pourront exploiter pleinement leur système.

Module de trousse de développement à distance (RDK)

La trousse de développement à distance permet la commande et la programmation à distance de certaines fonctions du microscope FV3000 dans des langages comme Python, C++ et Matlab. Le module RDK est un outil puissant pour les utilisateurs ayant de l’expérience en programmation, qui pourront exploiter pleinement leur système.

Module de kit de développement à distance (RDK)

* Bien que la lignée cellulaire HeLa soit devenue l’une des plus importantes dans la recherche médicale, nous devons absolument reconnaître que la contribution de Henrietta Lacks à la science s’est produite sans son consentement. Cette injustice, bien qu’elle ait mené à des découvertes clés en immunologie, en maladies infectieuses et en cancer, a également suscité d’importantes conversations sur la confidentialité, l’éthique et le consentement en médecine.
Pour en savoir plus sur la vie de Henrietta Lacks et sur sa contribution à la médecine moderne, cliquez sur le lien suivant :
http://henriettalacksfoundation.org/

Configurations

Sélectionnez la configuration la mieux adaptée à votre application

Microscope inversé

Adapté à l’observation de cellules cultivées en flacon
L’unité TruFocus permet une observation par intermittence avec une mise au point constante.
Ajoutez un couvre-platine ou un incubateur entièrement fermé pour préserver les conditions de culture des cellules.

Microscope droit (configuré pour l’imagerie de lames)

Optimisé pour les coupes de tissu fixées et les échantillons sur lame en verre
La tourelle porte-objectifs motorisée à 7 positions et le condenseur permettent d’automatiser les transitions entre faible grossissement et grossissement élevé, pour les applications nécessitant un passage de « macro à micro ».

Microscope droit (configuré pour l’électrophysiologie)

Beaucoup d’espace autour des objectifs, afin de faciliter l’installation d’instruments patch-clamp.
L’espace disponible peut être étendu en abaissant encore la platine pour les expériences qui nécessitent la manipulation d’échantillons de grande taille.
Des tourelles porte-objectifs à bascule et à glissière sont disponibles, afin de changer facilement d’objectif sans déranger les instruments patch-clamp installés.

Caractéristiques techniques

		FV3000	FV3000RS
Combineur laser principal	Laser de lumière visible	405 nm : 50 mW, 488 nm : 20 mW, 561 nm : 20 mW, 640 nm : 40 mW Un port laser en option pour le sous-combineur laser ou une unité laser en option
Laser en option	Sous-combineur laser	Au maximum 3 unités laser comme suit : 445 nm : 75 mW, 514 nm : 40 mW, 594 nm : 20 mW, fibre connectée au combineur laser principal
	Unité laser unique	445 nm : 75 mW, 514 nm : 40 mW ou 594 nm : 20 mW, directement connectée au combineur laser principal
	Unité laser proche infrarouge unique	730 nm : 30 mW, 785 nm : 100 mW, connectée au scanner via un port en option
Scanner	Méthode de balayage	2 miroirs galvanométriques à revêtement en argent	2 miroirs galvanométriques à revêtement en argent 1 miroir résonant à revêtement en argent et 1 miroir galvanométrique à revêtement en argent
	Scanner galvanométrique (Imagerie normale)	Résolution de balayage : 64 × 64 à 4096 × 4096 pixels Vitesse de balayage (unidirectionnel) : 512 × 512 avec 1,1 s–264 s, durée de pixel : 2 µs–1 000 µs Vitesse de balayage (bidirectionnel) : 512 × 512 avec 63 ms–250 ms, 256 × 256 avec 16 ms–125 ms Zoom optique : 1X - 50X par incréments de 0,01X Rotation de balayage : rotation libre (360 degrés) par incréments de 0,1 degré Mode de balayage : PT, XT, XZ, XY, XZT, XYT, XYZ, XYλ, XYZT, XYλT, XYλZ, XYλZT Balayage ROI, rectangle, ellipse, polygone, zone libre, ligne, ligne libre et point, mode tornade pour stimulation seulement
	Scanner à résonance (imagerie à haute vitesse)	-	Résolution de balayage : 512 × 32 à 512 × 512 pixels Vitesse de balayage : 30 i/s à 512 × 512, 438 i/s à 512 x 32 Zoom optique : 1X–8X par incréments de 0,01X Mode de balayage : XT, XZ, XY, XZT, XYT, XYZ, XYλ, XYZT, XYλT, XYZ, XYλZT Balayage ROI, rectangle, ligne
	Sténopé	Sténopé motorisé unique, diamètre de sténopé 50–800 µm (incréments de 1 µm)
	Numéro de champ (FN)	18
	Tourelle porte-cubes dichromatique	8 positions (miroirs dichroïques haute performance et miroir 10/90)
	Unité en option pour scanner	Contrôleur de puissance laser, port laser en option
Détecteur spectral	Module de détection	Photomultiplicateur GaAsP refroidi (type sensibilité élevée) ou photomultiplicateur multi-alcali, 2 canaux
	Méthode spectrale	Réseau de diffraction holographique en phase volumique motorisé, fente ajustable motorisée, bande passante de longueur d’onde sélectionnable : 1–100 nm, résolution de longueur d’onde : 2 nm
	Tourelle porte-cubes dichromatique	8 positions (miroirs dichroïques haute performance et miroir)
Détecteur proche infrarouge	Module de détection	Tube photomultiplicateur GaAs, 1 canal ou 2 canaux avec cube de filtres
Unité d’éclairage pour fluorescence		Source de lumière pour fluorescence externe, adaptateur fibre vers le port optique de l’unité de balayage, commutation motorisée entre le trajet optique du microscope à balayage laser et l’éclairage par fluorescence
Unité de détecteur à lumière transmise		Module avec détecteur à photomultiplicateur de lumière transmise externe intégré et lampe à DEL, commutation motorisée

Microscope

	Statif inversé	Statif droit (pour l’imagerie)	Statif droit (pour l’électrophysiologie)
Statif du microscope	Microscope inversé motorisé IX83 (IX83P2ZF)	Microscope droit à platine fixe motorisée BX63L	Microscope droit à platine fixe motorisée BX63L
Tourelle porte-objectifs	Tourelle porte-objectifs rotative sextuple motorisée	Tourelle porte-objectifs rotative septuple motorisée	Tourelle porte-objectifs à bascule encodée Tourelle porte-objectifs à glissière encodée
Condenseur	Condenseur à distance focale longue motorisé	Condenseur universel motorisé	Condenseur à distance de travail longue manuel
Course de mise au point	Mise au point au niveau de la tourelle porte-objectifs motorisée intégrée Course : incrément minimum : 0,01 µm

Logiciel

Fonctions de base	Interface graphique pour environnement en chambre noire. Disposition d’écran configurable par l’utilisateur. Fonctions de récupération des paramètres d’acquisition. Capacité d’enregistrement sur disque dur, puissance laser réglable et HV avec Focus stacking. Focus stacking avec mélange alpha, projection d’intensité maximale, rendu de surface iso.
Affichage des images 2D	Affichage de l’image individuelle : chaque canal individuellement côte à côte, fusion, rognage, mosaïque en direct, tuile en direct, série (Z/T/λ), LUT : réglage de couleur individuel, pseudo-couleur, commentaire : graphique et saisie de texte.
Visualisation et observation 3D	Rendu volumique interactif : affichage de rendu volumique, affichage de projection, animation affichée. Fonctionnalité d’opérations séquentielles 3D et 2D avec animation 3D (méthode de projection d’intensité maximale, mélange α).
Format d’image	Format d’image OIR Échelle de gris / indice 8/16 bits, couleur 24/32/48 bits, formats d’image JPEG / BMP / TIFF, format Olympus multi-tif.
Déconvolution spectrale	Modes de déconvolution spectrale à fluorescence (jusqu’à 16 canaux)
Analyse d’images	Mesures linéaires et de région, tracé de l’intensité dans le temps/Z, analyse de colocalisation.
Traitement statistique	Affichage d’histogramme de données 2D.
Logiciels en option	Contrôle de platine motorisé Cartographie et simulation multipoint Gestionnaire de séquence Acquisition de canal virtuel Navigation sur microplaque Kit de développement à distance Imagerie de très grande résolution (FV-OSR) Fonction de contrôle de la caméra numérique Déconvolution Analyse FRAP et FRET Mesure et classification d’objet automatique Suivi d’objets Technologie TruAI s'appuyant sur l’apprentissage profond Logiciel d’analyse cellulaire 3D NoviSight Imagerie macro-micro automatisée

FV3000

Vue d’ensemble

FLUOVIEW nouvelle génération pour les prochaines révolutions scientifiques

Multiplexage d’images à sensibilité élevée de l’UV au proche infrarouge

Imagerie macro-micro et microscopie à très haute résolution

Balayage hybride pour une imagerie plus rapide et plus de productivité

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Calcul de la moyenne glissante

Passage de « macro à micro »

Déconvolution TruSight : traitement des images pour une résolution supérieure

Technologie Super Resolution d’Olympus (FV-OSR) avec jusqu’à quatre canaux simultanés

Imagerie par intermittence TruFocus

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Expériences FRET et FRAP

Imagerie ratiométrique et affichage à modulation de l’intensité (IMD)

Suivi d’objet

Module de trousse de développement à distance (RDK)

Configurations

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Microscope inversé

Microscope droit (configuré pour l’imagerie de lames)

Microscope droit (configuré pour l’électrophysiologie)

Composants

Logiciel

Scanners

Caractéristiques techniques

Microscope

Logiciel

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