En voir plus avec la microscopie confocale proche infrarouge

Les technologies améliorées du système ont permis un multiplexage étendu pour voir plus de choses dans une même image.

L’imagerie proche infrarouge (NIR) offre de meilleures capacités de multiplexage en étendant le profil spectral d’excitation (λ_Ex) et de détection (λ_Em) du système FV4000. Cela permet d’utiliser des fluorophores supplémentaires pour réduire au minimum le chevauchement des signaux d’émission.

• Multiplexez jusqu’à six canaux avec la technologie TruSpectral™ modernisée et nos détecteurs SilVIR™ à haute sensibilité.
• La fente et le réseau holographique en phase volumique (VPH) hautement efficaces peuvent détecter une plage de longueurs d’onde de 400 à 900 nm, ce qui est unique dans le secteur*, avec un pas minimal de 1 nm.
• Élargissez votre choix de fluorochromes en utilisant jusqu’à six canaux de détecteurs à large bande ou à décalage vers le rouge pour réduire au minimum les photodommages et diminuer l’autofluorescence.
• Les combinateurs de lasers modulaires permettent d’utiliser jusqu’à 10 lignes laser de 405 à 785 nm en parallèle.
   

  * En date de mars 2023.

• Cellules HeLa marquées par six fluorochromes Noyaux cellulaires (DAPI ; bleu), membrane cellulaire (AF488 ; vert), pore nucléaire (AF561 ; jaune), microtubule (Qdot605 ; magenta), mitochondries (MitoTracker DeepRed ; cyan), actine (AF750 phalloïdine ; gris)

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Des images d’un total de 77 positions XYZ à quatre canaux (11 × 7) ont été acquises à l’aide d’un scanner résonnant 1K en 16 minutes pour créer l’image assemblée, ce qui aurait auparavant nécessité 2 heures avec un scanner galvanométrique. Coupe coronale d’un cerveau de souris de lignée H, cyan ; DAPI (noyaux cellulaires), vert ; YFP (neurone), jaune ; cy3 (astrocytes), magenta ; AlexaFluor 750 (microtubule). Échantillon gracieusement fourni par : Takako Kogure et Atsushi Miyawaki, Cell Function Dynamics, RIKEN CBS.

Des images 3D en haute résolution de l’intérieur d’échantillons épais

Sphéroïde de cellule HeLa marqué au DAPI (cyan, noyaux cellulaires) et à l’AlexaFluor790 (magenta, Ki-67). L’imagerie du volume entier du sphéroïde a été rendue possible par l’utilisation du proche infrarouge à 785 nm, alors que seule l’observation des noyaux des cellules à la surface du sphéroïde était possible avec un laser de 405 nm.

Pour l’imagerie d’échantillons épais, le microscope FV4000 vous permet de prendre des images 3D en haute résolution.

• Profitez de la longueur d’onde plus grande du proche infrarouge pour pénétrer plus profondément dans les tissus grâce à la large étendue dynamique et à la sensibilité du détecteur SilVIR.
• Prenez des images plus profondément dans les tissus avec moins de diffusion et d’absorption en tirant parti du fait que les composés diffusant la lumière, comme la mélanine et l’hème, absorbent moins de lumière entre 700 et 1500 nm.
• Prenez des images nettement plus profondément que ce qui serait possible avec les lasers visibles grâce aux lasers à diodes de 685, 730 et 785 nm sur le FV4000.
• Les objectifs à immersion dans l’huile de silicone à grande ouverture numérique réduisent au minimum les aberrations sphériques, et l’huile de silicone ne sèche pas : deux avantages pour l’imagerie à intervalles.
• Améliorez la qualité d’image globale et la résolution Z grâce à la déconvolution TruSight™ pour produire de magnifiques images 3D d’échantillons épais.
• Profitez d’un processus simplifié, de l’acquisition des images à leur publication, grâce aux algorithmes spécialisés du logiciel cellSens™.

Des images des couches profondes d’une grande clarté

Utilisez nos objectifs à immersion dans l’huile de silicone avec le microscope FV4000 et réalisez des images claires des caractéristiques et des structures d’intérêt au plus profond de votre échantillon. L’huile de silicone a un indice de réfraction proche de celui des cellules vivantes ou des tissus, ce qui réduit considérablement l’aberration sphérique par rapport à l’air, à l’eau ou à d’autres huiles. Avec moins d’aberrations, il est possible d’obtenir des couches profondes de votre échantillon. En outre, l’huile d’immersion de silicone ne sèche pas à 37 ℃ (98,6 °F), ce qui la rend efficace pour l’imagerie à intervalles de longue durée.

Faites passer votre imagerie confocale au niveau supérieur et gagnez du temps lors de l’analyse des données. Le rapport signal sur bruit du microscope est déjà très bon, mais le débruitage de la technologie TruAI™ peut réduire le bruit encore davantage pour produire de superbes images par résonance riches en données.

Pour accélérer l’analyse des images, vous pouvez pré-entraîner un modèle d’IA afin que le système soit capable de segmenter automatiquement vos données d’image, ce qui réduit considérablement la charge de travail liée à ce processus manuel souvent fastidieux. La technologie TruAI simplifie ensuite davantage l’analyse pour vous permettre d’obtenir vos données rapidement.

Segmentation des images TruAI

L’analyse des images nécessite l’extraction des données à l’aide de techniques de segmentation reposant sur des seuils de valeur d’intensité. Mais cette façon de travailler peut être chronophage et être influencée par les conditions de l’échantillon.

La segmentation des images TruAI à l’aide de l’apprentissage profond permet de rationaliser le traitement des images et de réduire au minimum les variables liées aux échantillons, pour une analyse plus précise des images. Elle permet de segmenter des images d’échantillons avec une fluorescence très faible ou des tissus généralement difficiles à extraire à l’aide de la simple méthode de seuillage.

Le microscope FV4000 est conçu pour être modulaire, ce qui vous permet de configurer facilement le système en fonction de vos applications et de votre budget. Vous pouvez commencer avec un FV4000 standard et passer facilement à l’imagerie multiphotonique en ajoutant le module MPE si vos recherches évoluent.