A través de este seminario web, Nicolas mostrará lo rápido y fácil que es obtener imágenes de alta calidad, fiables y comprensibles a partir de una sola molécula de las muestras con una resolución de 15 nm en 3D. Él repasará todo el procesamiento de imágenes, desde la preparación de muestras hasta el análisis de datos, a fin de mostrarle lo que la comunidad de la microscopía de localización de una sola molécula (SMLM) ha hecho posible, los errores comunes y cómo las herramientas y el soporte de Abbelight hacen posible que las imágenes y el proceso de análisis sea mucho más fácil.
Preguntas más frecuentesPreguntas frecuentes sobre el seminario web | Procesamiento de imágenes de múltiples estructuras subcelulares a escala nanométrica¿Cuánto tiempo tarda adquirir imágenes de nanoscopía multicolor 3D?La estrategia de separación espectral significa que la adquisición de imágenes tricromática requiere normalmente menos de un minuto para un campo de visión estándar en 3D (cerca 50 × 50 µm) y unos minutos para campos de visión más grandes (150 × 150 µm). ¿Qué tan difícil es preparar estructuras nanoscópicas?La preparación de la muestra solo requiere una simple modificación a nivel del procedimiento de preparación estándar, es decir, cambiar la concentración del fijador (p. ej., PFA) o aumentar la concentración de anticuerpos. Sólo se precisa un ajuste fino conforma a su propio protocolo. El equipo de Abbelight puede orientarle para evaluar si este paso es necesario. ¿Cómo se tratan las aberraciones cromáticas en experimentos multicromáticos o con los desplazamiento de las muestras?La estrategia de separación espectral permite obtener imágenes simultáneas a partir de dos a tres canales de rojo lejano, como 647 nm, 660 nm y 680 nm. Dado que los tres colores son cercanos en términos de longitud de onda, no se dan aberraciones cromáticas con esta técnica. Las desviaciones de muestras siempre son calculadas y se aplican a la imagen en tiempo real durante la adquisición, además pueden matizarse mediante diferentes algoritmos y métodos publicados en el procesamiento posterior a la adquisición. ¿Cuál es la importancia de la nanoscopía en el diagnóstico de enfermedades como el Parkinson, el Alzheimer y la infección viral?El poder de la nanoscopia SMLM depende del resultado de una adquisición que no solamente representa una imagen, sino un archivo de texto con la posición X, Y y Z de cada molécula detectada durante la adquisición. Esto viabiliza:
Este potencial se usa actualmente para favorecer el diagnóstico de enfermedades, desarrollar nuevas terapias, diagnosticar infecciones virales o bacterianas y mucho más. |
