In diesem Webinar zeigt Ihnen Dr. Bourg, wie schnell und einfach es sein kann, qualitativ hochwertige, zuverlässige und verständliche Einzelmolekülbilder Ihrer Proben mit einer Auflösung von 15 nm in 3D zu erhalten. Dabei erläutert er den gesamten Imaging-Arbeitsablauf – von der Probenvorbereitung bis zur Datenanalyse – und zeigt Ihnen, was mittlerweile in der Einzelmolekül-Lokalisations-Mikroskopie (Single-Molecule Localisation Microscopy, SMLM) heute möglich ist, was die häufigsten Fehler sind und wie die Tools und der Support von Abbelight die Bildgebung und Analyse erheblich erleichtern können.
Häufige FragenWebinar FAQs | Bildgebung mehrerer subzellulärer Strukturen im NanometerbereichWie lange dauert es, mehrfarbige Nanoskopie-Bilder in 3D aufzunehmen?Bei Anwendung der spektralen Entmischung dauert die Aufnahme von dreifarbigen Bildern in der Regel weniger als eine Minute fürbei einem ein Standard-Sehfeld in 3D (etwa 50 × 50 µm) in der Regel weniger als eine Minute und einige Minuten fürbei einem größeren Sehfelder (150 × 150 µm) einige Minuten. Wie schwierig ist es, Nanoskopie-Strukturen vorzubereiten?Die Probenvorbereitung erfordert nur eine einfache Änderung des Standardvorbereitungsverfahrens, beispielsweise eine Änderung der Konzentration des Fixiermittels (z. B. PFA) oder eine Erhöhung der Antikörperkonzentration. Es ist lediglich eine Feinabstimmung des eigenen Protokolls erforderlich. Das Abbelight-Team kann Sie bei Bedarf dabei unterstützen. Wie gehen Sie mit chromatischen Aberrationen bei Mehrfarbenexperimenten und mit Probendrifts um?Die Strategie der spektralen Entmischung ermöglicht die gleichzeitige Abbildung von 2 bis 3 Kanälen im fernen Rotbereich wie 647 nm, 660 nm und 680 nm. Da die 3 Farben in ihrer Wellenlänge sehr nahe beieinander liegen, gibt es bei dieser Technik keine chromatischen Aberrationen. Probendrifts werden immer in Echtzeit während der Aufnahme berechnet und auf das Bild angewendet. Sie können mit verschiedenen veröffentlichten Algorithmen und Methoden in der Nachbearbeitung verfeinert werden. Welche Bedeutung hat die Nanoskopie bei der Diagnose von Krankheiten wie Parkinson, Alzheimer und viralen Infektionen?Die Leistungsfähigkeit der SMLM-Nanoskopie ist vor allem darin begründet, dass das Ergebnis einer Aufnahme nicht nur ein Bild ist, sondern eine Textdatei mit der X-, Y- und Z-Position jedes während der Aufnahme entdeckten Moleküls. Dies ermöglicht die:
Dieses Potenzial wird derzeit genutzt, um Krankheiten zu diagnostizieren, neue Therapien zu entwickeln, virale oder bakterielle Infektionen zu erkennen und vieles mehr. |
