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Procesamiento de imágenes de organoides automatizado y análisis de imágenes 3D de
alto rendimiento

Descubra un sistema inteligente de procesamiento de imágenes cuyo objetivo es simplificar su
flujo de trabajo para favorecer detecciones más rápidas y aplicar una magnificación
secuencial automatizada alta a baja en objetos 3D.

Imágenes de nivel macro a micro

Cuando se procesan muestras 3D en imágenes, como organoides o tejidos gruesos, localizar los objetos de interés puede ser un proceso desafiante y lento. En especial, esta tarea requiere mucho tiempo al procesar recipientes de múltiples cámaras (apilables) o placas de múltiples pocillos. Mediante este proceso de adquisición automatizado, es posible reducir drásticamente el tiempo que se dedica a operar el microscopio:

  1. El microscopio de escaneo láser confocal FV3000 captura automáticamente imágenes con baja magnificación.
  2. Después, el módulo Macro a Micro del software FV detecta los objetos de interés en la bandeja o pocillo y los captura con gran magnificación.
     

Imágenes de nivel macro a micro

Condición de observación

Para muestras que requieren una D. T. igual o inferior a 600 µm

Para procesar imágenes en microplacas con fondo de vidrio/plástico

Para organoides más grandes que requieren una D. T. superior a 600 µm

UPLXAPO20X

UCPLFLN20XPH

UPLSAPO30XS

UPLXAPO20X

UCPLFLN20XPH

UPLSAPO30XS

Apertura numérica (A. N.)

0.8

0.7

1.05

Distancia de trabajo
(D. T)

600 μm

800 μm–1800 μm

800 μm

Campo visual/de visión (FOV)

900 μm

900 μm

540 μm

Medio de inmersión

Aéreo/Seco

Aéreo/Seco

Aceite de silicona

Índice de refracción (IR)

1.0

1.0

1.4

Más información sobre cuán importante es la selección de objetivos

Imágenes de alta calidad con objetivos X Line y A Line

Olympus ofrece varios objetivos con características que permiten resolver los desafíos planteados a partir de las condiciones del procesamiento de imágenes y los requisitos de observación de los organoides.

En el caso de organoides ubicados en una microplaca con fondo de plástico o vidrio, se recomienda usar el objetivo UPLXAPO20X de la galardonada serie X Line. Este objetivo 20X proporciona un excelente equilibrio entre resolución, campo de visión y profundidad de enfoque. Con el propósito de facilitar la visualización de imágenes en una microplaca, éste presenta las siguientes características: alta apertura numérica de 0.8; distancia de trabajo de 600 µm, y medio de inmersión en aire. En el caso de aplicaciones de imagen para tejidos profundos, se recomienda usar el objetivo de inmersión en aceite de silicona de 30X UPLSAPO30XS, cuyo alcance es de hasta 800 µm de profundidad en muestras. El objetivo UCPLFLN20XPH, que otorga un impresionante rango de distancia de trabajo de 800 µm a 1800 µm, también posibilita el procesamiento de imágenes a través de recipientes con fondo de plástico.

Análisis de imágenes 3D de alto rendimiento

El software de análisis de células 3D NoviSight™ está optimizado para analizar modelos 3D en microplacas. Cuando los objetos de interés son detectados en 3D, es posible analizar los datos por medio de diferentes vistas dimensionales:

  • Información estadística (1D)
  • Imagen XY (2D)
  • Vóxel (3D)

Esta flexibilidad permite evaluar los resultados del experimento con un alto rendimiento y de forma cuantitativa.

Análisis de imágenes 3D de alto rendimiento

Dr. Seungil Kim, gerente de equipo de microscopía.

«El procesamiento de imágenes automático de organoides permite a los investigadores procesar imágenes específicas. Esto favorece una detección rápida, así como un procesamiento de imágenes secuenciales de gran magnificación para objetos 3D. A la larga, esto contribuye a la eficiencia de nuestro flujo de procesamiento de imágenes cuando se examinan los cambios fenotípicos de los organoides, derivados de pacientes, en respuesta a las perturbaciones de los medicamentos.
El software NoviSight proporciona un análisis de imágenes de organoides 3D continuo e interactivo, ya que mide múltiples parámetros con alta reproducibilidad, lo cual es clave para imágenes de alto contenido y detección de fármacos de alto rendimiento».

Dr. Seungil Kim, gerente de equipo de microscopía.
Instituto Lawrence J. Ellison de Medicina Transformacional de la Universidad del Sur de California

Mapa en 4X

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Corte/sección única a 20X

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Proyección de máxima intensidad a 20X

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El sistema FLUOVIEW™ FV3000, optimizado para tratar la alta sensibilidad y baja fototoxicidad, proporciona el rendimiento y la flexibilidad justa para superar los desafíos en la observación de células vivas y tejidos profundos. La sensibilidad del detector TruSpectral™ en el rango de longitud de onda de 400 nm a 800 nm viabiliza la detección hasta de fluorocromos tenues. Ajustar la longitud de onda de detección a la resolución de 1 nm permite capturar de forma eficiente imágenes 3D de alta resolución. Las opciones que ofrece el modo de procesamiento de imágenes comprenden el nivel macro a micro, la súper resolución y los análisis de datos cuantitativos.

  • Disponible con las configuraciones de escaneo galvanométrico (microscopio de escaneo FV3000) o híbrida galvanométrica-resonante (FV3000RS).
  • Sistema de compensación de deriva Z TruFocus™ que mantiene el enfoque cuando se adquieren las imágenes de células vivas a pesar de los cambios de temperatura o de los reactivos añadidos.
  • Opciones de estativo invertido y vertical para adaptarse a una variedad de aplicaciones y tipos de muestras
  • Solución de infrarrojo cercano (NIR) FV3000 Red que amplifica las capacidades de detección de la longitud de onda hasta 890 nm en la región NIR, lo que permite una detección simultánea de hasta seis canales para la multiplexación.

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Optimice su análisis de imágenes 3D con el software de análisis de células en 3D NoviSight™ a fin de mejorar el procesamiento de ensayos y obtener datos estadísticos más reveladores e inteligentes provenientes de esferoides u otros objetos 3D por medio de experimentos de microplacas. El software permite cuantificar la actividad celular en tres dimensiones, capturar de forma más fácil los eventos celulares extraños, obtener recuentos celulares precisos y mejorar la sensibilidad de la detección. La intuitiva interfaz del usuario ofrece las herramientas requeridas para el reconocimiento, el análisis y las estadísticas de alto rendimiento; entre ellas:

  • Examen morfológico de las muestras
  • Mediciones a partir de una variedad de parámetros para esferoides o núcleos celulares, como el volumen y la esfericidad.
  • Reconocimiento 3D rápido y eficiente
  • Conjuntos de datos y ensayos de células 3D automatizados y listos para usar

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