TIRF 이미징 | 올림푸스 생명과학

TIRF 이미징

TIRF 대물렌즈와 Ixplore TIRF

TIRF를 위한 고해상도 대물렌즈

높은 개구 수 (NA)는 TIRF 현미경 관찰에서 중요합니다. TIRF 현미경의 선구자로써 당사는 1.45 부터 세계 최고 수준의 1.7*¹의 높은 개구수 및 60배 부터 150배까지의 배율을 가진 다양한 라인업의 대물렌즈를 제공합니다. 초 고해상도 및 sCMOS 카메라로 넓은 시야로 이미지를 캡처하는 것과 같은 최신 관측 방법은 최고 품질의 대물렌즈를 요구합니다. 그래서 우리는 첨단의 대물렌즈 제조 기술을 개발했습니다. 이 첨단 폴리싱 기술은 1.5*².NA를 가진 세계 최초의 계획 수정된 apochromat 대물 렌즈를 생산을 가능하게 하였습니다. 이러한 대물렌즈는 넓은 시야에서도 균일 한 이미지 품질을 제공하며 TIRF 이미징에 이상적입니다.

*1 2018년 11월 현재, 올림푸스 연구에 따름.
*2 2018년 11월 현재, 올림푸스 연구에 따름

Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Objectives

관련 영상	Plasma Membrane 과 FBP17 Membrane-Bending Protein 간의 Polymerization 과 Depolymerization을 기록한 타임 랩스 TIRF 이미징 침투 깊이(Penetration depth)는 높은 개구수에서 높은 신호대 잡음비를 얻기 위해 조정 되었습니다. TIRF 이미징은 새로운 유형의 고급 세포 연구를 가능케 합니다. 이 Show는 세포막 아래의 membrane morphology와 molecular dynamics를 변화시킵니다. 이미지는 UAPON100XOTIRF 대물 렌즈를 사용하여 획득했습니다.^{4 4 UPLAP0100XOHR의 이전 모델} 이미지 데이터 제공 : Kazuya Tsujita, Ph.D., Toshiki Itoh, Ph.D., 고베 대학교 첨단 과학 기술기구 Biosignal Research Center 참고 : Nat Cell Biol. 2015년 6월; 17 (6) : 749-58. doi : 10.1038 / ncb3162. TIRF 대물렌즈에 대해 더 알아보기

Plasma Membrane 과 FBP17 Membrane-Bending Protein 간의 Polymerization 과 Depolymerization을 기록한 타임 랩스 TIRF 이미징

침투 깊이(Penetration depth)는 높은 개구수에서 높은 신호대 잡음비를 얻기 위해 조정 되었습니다.
TIRF 이미징은 새로운 유형의 고급 세포 연구를 가능케 합니다. 이 Show는 세포막 아래의 membrane morphology와 molecular dynamics를 변화시킵니다. 이미지는 UAPON100XOTIRF 대물 렌즈를 사용하여 획득했습니다.*^{4

*4 UPLAP0100XOHR의 이전 모델}

이미지 데이터 제공 : Kazuya Tsujita, Ph.D., Toshiki Itoh, Ph.D., 고베 대학교 첨단 과학 기술기구 Biosignal Research Center 참고 : Nat Cell Biol. 2015년 6월; 17 (6) : 749-58. doi : 10.1038 / ncb3162.

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Transmembrane Ion Channel 복합체의 서브 유닛을 카운트하는 단일 분자(Single-Molecule) 형광 이미징 (APON100XHOTIRF)

이 대물렌즈는 1.70의 개구 수 덕분에 더 높은 해상도와 더 밝은 이미지로 단일 분자(Single-Molecule) TIRF 이미징을 가능하게 합니다.

하나의 Kv4.2-DPP10 복합체에서 transmembrane ion channel Kv4.2에 결합하는 부속 dipeptidyl peptidase-like protein 10 (DPP10) 분자의 수를 분석하기 위해 Subunit counting*⁵기법을 사용되었습니다. APON100XHOTIRF 대물 렌즈의 높은 NA는 단일 분자의 photobleaching으로 인한 형광 휘도 변화를 연구자가 측정 할 수 있게합니다. 이 연구*⁶는 DPP10 서브 유닛의 최대 4 분자가 이온 채널 Kv4.2와 복합체를 형성한다는 것을 밝혀냈습니다.

*5 Ulbrich, MH, and Isacoff EY. “Subunit counting in membrane–bound proteins.” Nature Methods, 4 (2007): 319–321.
*6 Kitazawa M, Kubo Y, and Nakajo K. “Kv4.2 and accessory dipeptidyl peptidase–like protein 10 (DPP10) subunit preferentially form a 4:2 (Kv4.2:DPP10) channel complex.” J Biol Chem, 290 (2015): 22724–22733.

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TIRF 대물렌즈 선정 가이드

	작동거리 (mm)	배율	대물렌즈 시야 수^*3	개구수	이멀젼	어플리케이션
UPLAPO60XOHR	0.11	60X	22	1.50	실리콘 오일	Organelles/whole-cell TIRF 이미징과 같은 미세구조의 실시간 초고해상도 이미징
UPLAPO100XOHR	0.12	100X	22	1.50	실리콘 오일	단일 분자 수준의 실험이나 Organelles/cell membrane 혹은 subcellular organelles의 고해상도 이미징과 같은 미세구조의 실시간 초고해상도 이미징
APON100XHOTIRF	0.08	100X	22	1.70	특수 오일	단일 분자 수준에서 단백질 또는 소낭의 움직임 관찰
UAPON150XOTIRF	0.08	150X	22	1.45	실리콘 오일	Subcelluar 이미징 (organelles, endoplasmic reticulum 및 intracellular vesicle trafficking 과 같은)

*3 접안렌즈를 통한 관찰할 수 있는 최대 시야 수

TIRF를 위한 고해상도 대물렌즈

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IXplore TIRF

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