Nachverfolgung von sich
bewegenden Proben

Automatisierte und motorgesteuerte Tischnachführung

Sich bewegende Proben wie C. elegans (Fadenwürmer) lassen sich während der Zeitraffer-Bildaufnahme nur schwer im Sichtfeld des Mikroskops halten. Eine Lösung bietet unsere Software für eine automatisierte und motorgesteuerte Tischnachführung für FLUOVIEW Laser-Scanning-Mikroskope. Die bedienerfreundliche Software erkennt das Zielobjekt relativ zur Schwerpunktposition des XY-Tisches während der Aufnahme von Zeitrafferbildern und bewegt den Tisch so, dass sich das Zielobjekt stets in der Mitte des Sehfeldes befindet.

Die Software ist für XYT/XYZT*-Zeitraffer-Bildaufnahmen mit zwei Algorithmen zur Erkennung von Bildern mittels Fluoreszenz- und Durchlichtmikroskopie konzipiert.

*Automatische Anpassung nur in horizontaler Richtung (XY-Koordinaten).

Bildquelle:
Asuka Takeishi Ph.D. (RIKEN Hakubi Team Leader)
Neural Circuit of Multisensory Integration, RIKEN Hakubi Research Team.

Probenzustand: C. elegans grün markiert (Muskelzellen, myo-3p::GCaMP3) und rot markiert (Zölomozyten, unc-119p::dsRed)
Aufnahmebedingung: UPLXAPO4X mit 1,8x Zoom, resonant in eine Richtung, 512 × 512, 15 fps
Tracking-Erkennungsbedingung: Automatische Erkennung basierend auf dsRed (rot) Fluoreszenzintensität/-größe.

„Wir brauchten unbedingt eine Tracking-Software, die die Aufnahme mehrfarbiger Fluoreszenzbilder von Neuronen mit gleichzeitiger, automatischer Tischnachführung bei sich schnell bewegenden C. elegans (Fadenwürmer) ermöglicht.
Mit dieser Software können wir C. elegans über einen langen Zeitraum hinweg verfolgen und gleichzeitig Bilder mit hochauflösender konfokaler Mikroskopie aufnehmen.
Die Software unterstützt unsere Forschungsarbeiten durch die Möglichkeit, Details des Verhaltens und der neuronalen Aktivität des Fadenwurms gleichzeitig zu beobachten.“

Asuka Takeishi, Ph.D.
RIKEN Hakubi Team Leader,
Neural Circuit of Multisensory Integration, RIKEN Hakubi Research Team.